com@iramn.ru
 
bbm.ktbm@gmail.com



КЛЕТОЧНЫЕ  ТЕХНОЛОГИИ  В  БИОЛОГИИ  И  МЕДИЦИНЕ

2019 г., № 3

 СОДЕРЖАНИЕ

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1b НА ПРОНИЦАЕМОСТЬ ГЭБ МЫШЕЙ С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГЛИОМОЙ М6 МЕТОДОМ ПРИЖИЗНЕННОЙ КОНФОКАЛЬНОЙ МИКРОСКОПИИ
П.А.Мельников1, М.П.Валихов1, И.И.Кузнецов1, Н.Ф.Гриненко1, К.К.Сухинич2, А.С.Симбирцев3, З.И.Кекелидзе1, В.П.Чехонин1151
1Отдел фундаментальной и прикладной нейробиологии ФГБУ НМИЦ ПН им. В.П.Сербского Минздрава России, Москва; 2ФГБУН Институт биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН, Москва, РФ; 3ФГУП ГосНИИ ОЧБ ФМБА России, Санкт-Петербург
          Исследовано влияние IL-1b на проницаемость капилляров головного мозга интактных мышей. Методом при­жизненной (интравитальной) микроскопии показано повышение проницаемости сосудов при парентеральном введении IL-1b, обеспечивающее прохождение свободной флюоресцентной метки Alexa Fluor 488 через стенку капилляра, но недостаточное для пенетрации липосомами. Кроме того, в серии экспериментов на интракраниальной мышиной глиоме M6 было показано, что при парентеральном введении IL-1b в концентрации 2 мкг/мл липосомы способны проникать через стенки капилляров опухоли. Применение провоспалительного цитокина IL-1b при терапии опухолей головного мозга может значительно повысить терапевтическую эффективность систем доставки лекарственных препаратов, особенно с ограниченной способностью проникать через гематоэнцефалический барьер.
Ключевые слова: гематоэнцефалический барьер, IL-1b, адресная доставка лекарств, липосомы, опухоли мозга
Адрес для корреспонденции: marat.valikhov@gmail.com. Валихов М.П.
Литература
1.
Chekhonin V.P., Baklaushev V.P., Yusubalieva G.M., Gurina O.I. Targeted transport of 125I-labeled antibody to GFAP and AMVB1 in an experimental rat model of C6 glioma // J. Neuroimmune Pharmacol. 2009. Vol. 4, N 1. P. 28-34.
2. Chekhonin V.P., Potapov A.A., Konovalov A.N. Vector nanosystems for drug delivery to target cells // Herald Russ. Acad. Sci. 2016. Vol. 86, N 3. P. 164-269.
3. Chekhonin V.P., Shein S.A., Korchagina A.A., Gurina O.I. VEGF in tumor progression and targeted therapy // Curr. Cancer Drug Targets. 2013. Vol. 13, N 4. P. 423-443.
4. Cui L., Pierce D., Light K.E., Melchert R.B., Fu Q., Kumar K.S., Hauer-Jensen M. Sublethal total body irradiation leads to early cerebellar damage and oxidative stress // Curr. Neurovasc. Res. 2010. Vol. 7, N 2. P. 125-135.
5. Lundy D.J., Lee K.J., Peng I.C., Hsu C.H., Lin J.H., Chen K.H., Tien Y.W., Hsieh P.C.H. Inducing a transient increase in blood brain barrier permeability for improved liposomal drug therapy of glioblastoma multiforme // ACS Nano. 2018. Dec 11. doi: 10.1021/acsnano.8b03785
6. Marriott H.M., Gascoyne K.A., Gowda R., Geary I., Nicklin M.J., Iannelli F., Pozzi G., Mitchell T.J., Whyte M.K., Sabroe I., Dockrell D.H. Interleukin-1b regulates CXCL8 release and influences disease outcome in response to Streptococcus pneumoniae, defining intercellular cooperation between pulmonary epithelial cells and macrophages // Infect. Immun. 2012. Vol. 80, N 3. P. 1140-1149.
7. Qin L.J., Jia Y.S., Zhang Y.B., Wang Y.H. Interleukin-1
b induces the upregulation of caveolin-1 expression in a rat brain tumor model // Biomed. Rep. 2016. Vol. 4, N 4. P. 433-436.
8. Rochfort K.D., Cummins P.M. The blood-brain barrier endothelium: a target for pro-inflammatory cytokines // Biochem. Soc. Trans. 2015. Vol. 43, N 4. P. 702-706.
9. Shein S.A., Nukolova N.V., Korchagina A.A., Abakumova T.O., Kiuznetsov I.I., Abakumov M.A., Baklaushev V.P., Gurina O.I., Chekhonin V.P. Site-directed delivery of VEGF-targeted liposomes into intracranial C6 glioma // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 158, N 3. P. 371-376.
10. Tran S., DeGiovanni P.J., Piel B., Rai P. Cancer nanomedicine: a review of recent success in drug delivery // Clin. Transl. Med. 2017. Vol. 6, N 1. ID 44. doi: 10.1186/s40169-017-0175-0
11. van Tellingen O., Yetkin-Arik B., de Gooijer M.C., Wesseling P., Wurdinger T., de Vries H.E. Overcoming the blood-brain tumor barrier for effective glioblastoma treatment // Drug Resist. Updat. 2015. Vol. 19. P. 1-12.
12. Zhou Y., Peng Z., Seven E.S., Leblanc R.M. Crossing the blood-brain barrier with nanoparticles // J. Control.
Release. 2018. Vol. 270. P. 290-303.

ФЕНОТИП И СЕКРЕТОМ МОНОЦИТПРОИЗВОДНЫХ МАКРОФАГОВ ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ С МЕЗЕНХИМНЫМИ СТРОМАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ В УСЛОВИЯХ ГИПОКСИЧЕСКОГО СТРЕССА
О.Ю.Алексеева, П.И.Бобылева, Е.Р.Андреева – 158
ГНЦ РФ — Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, РФ
          Изучено влияние короткого гипоксического стресса на фенотипическую поляризацию моноцитпроизводных макрофагов и их секреторную активность при взаимодействии с мезенхимными стромальными клетками. В присутствии стромальных клеток моноцитпроизводные макрофаги проявляли признаки М2-поляризации, о чём свидетельствовало повышение экспрессии маркеров CD206 и CD163, а также увеличение транскрипции и трансляции IL-6. Кратковременный гипоксический стресс способствовал сдвигу провоспалительного М1-фенотипа макрофагов в сторону противовоспалительного М2 в монокультуре и сокультуре со стромальными клетками. Мезенхимные стромальные клетки кроме иммунорегуляторного действия проявляли стромальную активность, поддерживая высокую жизнеспособность моноцитпроизводных макрофагов.
Ключевые слова: моноциты/макрофаги, мезенхимные стромальные клетки, гипоксия, поляризация фенотипа, секретом
Адрес для корреспонденции: andreeva1564@gmail.com. Андреева Е.Р.
Литература

1. Буравкова Л.Б., Гринаковская О.С., Андреева Е.Р., Жамбалова А.П., Козионова М.П. Характеристика мезенхимных стромальных клеток из липоаспирата человека, культивируемых при пониженном содержании кислорода // Цитология.
2009. Т. 51, № 1. С. 5-11.
2. Anton K., Banerjee D., Glod J. Macrophage-associated mesenchymal stem cells assume an activated, migratory, pro-inflammatory phenotype with increased IL-6 and CXCL10 secretion // PLoS One. 2012. Vol. 7, N 4. ID e35036. doi: 10.1371/journal.pone.0035036
3. Buechler C., Ritter M., Orsó E., Langmann T., Klucken J., Schmitz G. Regulation of scavenger receptor CD163 expression in human monocytes and macrophages by pro- and antiinflammatory stimuli // J. Leukoc. Biol. 2000. Vol. 67, N 1. P. 97-103.
4. Cramer T., Yamanishi Y., Clausen B.E., Förster I., Pawlinski R., Mackman N., Haase V.H., Jaenisch R., Corr M., Nizet V., Firestein G.S., Gerber H.P., Ferrara N., Johnson R.S. HIF‑1alpha is essential for myeloid cell-mediated inflammation // Cell. 2003. Vol. 112, N 5. P. 645-657.
5. Eggenhofer E., Hoogduijn M.J. Mesenchymal stem cell-educated macrophages // Transplant. Res. 2012. Vol. 1, N 1. ID 12. doi: 10.1186/2047-1440-1-12
6. Egners A., Erdem M., Cramer T. The response of macrophages and neutrophils to hypoxia in the context of cancer and other inflammatory diseases // Mediators Inflamm. 2016. Vol. 2016. ID 2053646. doi: 10.1155/2016/2053646
7. Espagnolle N., Balguerie A., Arnaud E., Sensebé L., Varin A. CD54-mediated interaction with pro-inflammatory macrophages increases the immunosuppressive function of human mesenchymal stromal cells // Stem Cell Rep. 2017. Vol. 8, N 4. P. 961-976.
8. Fleischer J., Soeth E., Reiling N., Grage-Griebenow E., Flad H.D., Ernst M. Differential expression and function of CD80 (B7-1) and CD86 (B7-2) on human peripheral blood monocytes // Immunology. 1996. Vol. 89, N 4. P. 592-598.
9. Gordon S., Taylor P.R. Monocyte and macrophage hetero­geneity // Nat. Rev. Immunol. 2005. Vol. 5, N 12. P. 953-964.
10. Kim J., Hematti P. Mesenchymal stem cell-educated mac­ro­phages: a novel type of alternatively activated macrophages //
Еxp. Hematol. 2009. Vol. 37, N 12. P. 1445-1453.
11. Lahat N., Rahat M.A., Kinarty A., Weiss-Cerem L., Pinchevski S., Bitterman H. Hypoxia enhances lysosomal TNF-alpha degradation in mouse peritoneal macrophages // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2008. Vol. 295, N 1. P. C2-C12.
12. Mantovani A., Biswas S.K., Galdiero M.R., Sica A., Locati M. Macrophage plasticity and polarization in tissue repair and remodelling // J. Pathol. 2013. Vol. 229, N 2. P. 176-185.
13. Melief S.M., Schrama E., Brugman M.H., Tiemessen M.M., Hoogduijn M.J., Fibbe W.E., Roelofs H. Multipotent stromal cells induce human regulatory T cells through a novel pathway involving skewing of monocytes toward anti-inflammatory macrophages // Stem Cells. 2013. Vol. 31, N 9. P. 1980-1991.
14. Ren G., Zhao X., Zhang L., Zhang J., L’Huillier A., Ling W., Roberts A.I., Le A.D., Shi S., Shao C., Shi Y. Inflammatory cytokine-induced intercellular adhesion molecule-1 and vascular cell adhesion molecule-1 in mesenchymal stem cells are critical for immunosuppression // J. Immunol. 2010. Vol. 184, N 5. P. 2321-2328.
15. Rhim T., Lee D.Y., Lee M. Hypoxia as a target for tissue spe­­cific gene therapy // J. Control. Release. 2013. Vol. 172, N 2. P. 484-494.
16. Roebuck K.A., Finnegan A. Regulation of intercellular adhesion molecule-1 (CD54) gene expression // J. Leukoc. Biol. 1999. Vol. 66, N 6. P. 876-888.
17. Varesio L., Raggi F., Pelassa S., Pierobon D., Cangelosi D., Giovarelli M., Bosco M.C. Hypoxia reprograms human macrophages towards a proinflammatory direction // J. Immunol. 2016. Vol. 196, N 1, Suppl. ID 201.2.
18. Vasandan A.B., Jahnavi S., Shashank C., Prasad P., Kumar A., Prasanna S.J. Human Mesenchymal stem cells program macrophage plasticity by altering their metabolic status via a PGE2-dependent mechanism // Sci. Rep. 2016. Vol. 6. ID 38308. doi:10.1038/srep38308
19. Wang N., Liang H., Zen K. Molecular mechanisms that influence the macrophage m1-m2 polarization balance // Front. Immunol. 2014. Vol. 5. ID 614. doi: 10.3389/fimmu. 2014.00614
20. Zhang Q.Z., Su W.R., Shi S.H., Wilder-Smith P., Xiang A.P., Wong A., Nguyen A.L., Kwon C.W., Le A.D. Human gingiva-derived mesenchymal stem cells elicit polarization of m2 macrophages and enhance cutaneous wound healing // Stem Cells. 2010. Vol. 28, N 10. P. 1856-1868.
21. Zuk P.A., Zhu M., Mizuno H., Huang J., Futrell J.W., Katz A.J., Benhaim P., Lorenz H.P., Hedrick M.H. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies // Tissue Eng. 2001.
Vol. 7, N 2. P. 211-228.

Выделение высокомолекулярных комплексов активации инициаторных каспаз при повреждениях ДНК
А.В.Замараев1, А.Ю.Егоршина1, И.Н.Лаврик1,2, Б.Д.Животовский1,3, Г.С.Копеина1 165
1Факультет фундаментальной медицины МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ; 2Otto von Guericke University, Magdeburg, 39120 Germany; 3Karolinska Institutet, Stockholm, 317177 Sweden
          Запуск апоптоза с помощью химиотерапевтических препаратов является одним из самых эффективных подходов к лечению онкологических заболеваний. Каспазы — основные ферменты апоптоза — проходят процесс активации для инициации гибели. Активация инициаторных каспаз требует их присоединения к специальным белковым комплексам. Для изучения механизмов апоптоза необходимо выделение таких комплексов. Однако их очистка — сложная биохимическая задача, поскольку они образуются в клетке в небольшом количестве и быстро деградируют. Мы разработали эффективный способ выделения комплексов активации каспаз, образующихся в опухолевых клетках при повреждениях ДНК. Способ основан на использовании сочетания гель-фильтрации с иммунопреципитацией. Первый этап направлен на разделение высокомолекулярных комплексов активации каспаз и их мономерных форм, что позволяет увеличить эффективность выделения комплексов на втором этапе.
Ключевые слова: апоптоз, инициаторная каспаза, повреждения ДНК, цисплатин
Адрес для корреспонденции: boris.zhivotovsky@ki.se. Животовский Б.Д.; lirroster@gmail.com. Копеина Г.С.
Литература

1. Егоршина А.Ю., Замараев А.В., Лаврик И.Н., Животовский Б.Д., Копеина Г.С. Каспаза-2 — онкосупрессор и регулятор метаболизма: что день грядущий нам готовит? // Мол. биол.
2018. Т. 52, № 5. С. 750-763.
2. Boege Y., Malehmir M., Healy M.E., Bettermann K., Lorentzen A., Vucur M., Ahuja A.K., Böhm F., Mertens J.C., Shimizu Y., Frick L., Remouchamps C., Mutreja K., Kähne T., Sundaravinayagam D., Wolf M.J., Rehrauer H., Koppe C., Speicher T., Padrissa-Altés S., Maire R., Schattenberg J.M., Jeong J.S., Liu L., Zwirner S., Boger R., Hüser N., Davis R.J., Müllhaupt B., Moch H., Schulze-Bergkamen H., Clavien P.A., Werner S., Borsig L., Luther S.A., Jost P.J., Weinlich R., Unger K., Behrens A., Hillert L., Dillon C., Di Virgilio M., Wallach D., Dejardin E., Zender L., Naumann M., Walczak H., Green D.R., Lopes M., Lavrik I., Luedde T., Heikenwalder M., Weber A. A dual role of caspase-8 in triggering and sensing proliferation-associated DNA damage, a key determinant of liver cancer development // Cancer Cell. 2017. Vol 32, N 3. P. 342-359.e10.
3. Cain K., Bratton S.B., Cohen G.M. The Apaf-1 apoptosome: a large caspase-activating complex // Biochimie. 2018. Vol. 84, N 2-3. P. 203-214.
4. Degterev A., Boyce M., Yuan J. A decade of caspases // Oncogene. 2003. Vol. 22, N 53. P. 8543-8567.
5. Imre G., Heering J., Takeda A.N., Husmann M., Thiede B., zu Heringdorf D.M., Green D.R., van der Goot F.G., Sinha B., Dötsch V., Rajalingam K. Caspase-2 is an initiator caspase responsible for pore-forming toxin-mediated apoptosis // EMBO J. 2012. Vol. 31, N 11. P. 2615-2628.
6. Jin Z., El-Deiry W.S. Overview of cell death signaling pathways // Cancer Biol. Ther. 2005. Vol. 4, N 2. P. 139-163.
7. Kopeina G.S., Zamaraev A.V., Zhivotovsky B.D., Lavrik I.N. Identification of new complex for caspase-2 activation after DNA damage // Russ. J. Bioorgan. Chem. 2016. Vol. 42, N 1. P. 74-82.
8. Kuranaga E. Beyond apoptosis: caspase regulatory mechanisms and functions in vivo // Genes Cells. 2012. Vol. 17, N 2. P. 83-97.
9. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. Vol. 227. P. 680-685.
10. Lavrik I.N., Krammer P.H. Regulation of CD95/Fas signaling at the DISC // Cell Death Differ. 2012. Vol. 19, N 1. P. 36-41.
11. Li H., Zhu H., Xu C.J., Yuan J. Cleavage of BID by caspase 8 mediates the mitochondrial damage in the Fas pathway of apoptosis. // Cell. 1998. Vol 94, N 4. P. 491-501.
12. Manzl C., Krumschnabel G., Bock F., Sohm B., Labi V., Baumgartner F., Logette E., Tschopp J., Villunger A. Caspase-2 activation in the absence of PIDDosome formation // J. Cell Biol. 2009. Vol. 185, N 2. P. 291-303.
13. Martinon F., Tschopp J. Inflammatory caspases: linking an intracellular innate immune system to autoinflammatory diseases // Cell. 2004. Vol. 117, N 5. P. 561-574.
14. Tenev T., Bianchi K., Darding M., Broemer M., Langlais C., Wallberg F., Zachariou A., Lopez J., MacFarlane M., Cain K., Meier P. The Ripoptosome, a signaling platform that assembles in response to genotoxic stress and loss of IAPs // Mol. Cell. 2011. Vol. 43, N 3. P. 432-448.
15. Tinel A., Tschopp J. The PIDDosome, a protein complex implicated in activation of caspase-2 in response to genotoxic stress // Science. 2004. Vol. 304. P. 843-846.
16. Vermes I., Haanen C., Steffens-Nakken H., Reutelingsperger C. A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labelled Annexin V // J. Immunol. Methods. 1995. Vol. 184, N 1. P. 39-51.
17. Zamaraev A.V., Kopeina G.S., Buchbinder J.H., Zhivotovsky B., Lavrik I.N. Caspase-2 is a negative regulator of necroptosis // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2018. Vol. 102. P.101-108.
18. Zamaraev A.V., Kopeina G.S., Zhivotovsky B., Lavrik I.N. Cell death controlling complexes and their potential therapeutic role // Cell. Mol. Life Sci. 2015. Vol. 72, N 3. P. 505-17.
19. Zhivotovsky B., Orrenius S. Caspase-2 function in response to DNA damage // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005. Vol. 331, N 3. P. 859-867.
20. Zhivotovsky B., Samali A., Orrenius S. Determination of Apoptosis and Necrosis. // Curr.
Protoc. Toxicol. 1999. Chapter 2. Unit 2.2. doi: 10.1002/0471140856.tx0202s00

Влияние пептида AEDG на длину теломер и митотический индекс ФГА-стимулированных лимфоцитов крови человека
В.Х.Хавинсон1, А.А.Пендина2, О.А.Ефимова2, А.В.Тихонов2, А.С.Кольцова2, М.И.Крапивин2, А.В.Петровская-Каминская2, Л.И.Петрова2, Н.С.Линькова1,3, В.С.Баранов2 175
1Отдел биогеронтологии АНО НИЦ Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург, РФ; 2Отдел геномной медицины ФГБНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О.Отта, Санкт-Петербург, РФ; 3Кафедра терапии, гериатрии и антивозрастной медицины Академии постдипломного образования ФГБУ ФНКЦ ФМБА России, Москва
          Изучено влияние пептида AEDG на длину теломер и митотический индекс ФГА-стимулированных лимфоцитов крови индивидов мужского пола младшей (18-22 года, 5 человек) и средней (49-54 года, 6 человек) возрастной группы. В младшей возрастной группе достоверного изменения митотического индекса выявлено не было, а в средней — зарегистрировано уменьшение значения данного параметра в одном случае. Относительная длина теломерных районов метафазных хромосом оценивалась методом флюоресцентной гибридизации in situ с ДНК-зондами к теломерным последовательностям. После воздействия пептида AEDG установлены достоверные изменения относительной длины теломер у 7 из 11 индивидов (3 случая в младшей возрастной группе и 4 случая в средней). Достоверное увеличение длины теломер после воздействия пептида AEDG было зарегистрировано в 5 случаях, в том числе у двух индивидов младшей возрастной группы (на 41 и 55%) и у трёх индивидов средней возрастной группы (на 156, 18 и 76%). У одного представителя младшей возрастной группы и одного — средней возрастной группы отмечено достоверное уменьшение длины теломер (на 37 и 15% соответственно). При этом наблюдалась тенденция к нормализации длин теломер: их увеличению у индивидов, у которых была выявлена исходно меньшая длина теломер по отношению к средней внутри группы, и к их уменьшению, если индивидуальное значение превышало среднее внутри группы.
Ключевые слова: длина теломер, пептид AEDG, лимфоциты крови человека, молодой и средний возраст
Адрес для корреспонденции: miayy@yandex.ru. Линькова Н.С.
Литература
1. Кузнецова Т.В., Логинова Ю.А., Чиряева О.Г., Пендина А.А., Ефимова О.А., Федорова И.Д., Баранов В.С. Цитогенетические методы // Медицинские лабораторные технологии / под ред. А
. И. Карпищенко. Москва, 2013. Т. 2. С. 623-650.
2. Anisimov V.N., Khavinson V.Kh. Peptide bioregulation of aging: results and prospects // Biogerontology. 2010. Vol. 11, N 2. P. 139-149.
3.
Azzalin C.M., Lingner J. Molecular biology: damage control // Nature. 2007. Vol. 448. P. 1001-1002.
4.
de Lange T. Protection of mammalian telomeres // Oncogene. 2002. Vol. 21, N 4. P. 532-540.
5. Déjardin J., Kingston R.E. Purification of proteins associated with specific genomic Loci // Cell. 2009. Vol. 136, N 1. P. 175-186.
6. Dunham M.A., Neumann A.A., Fasching C.L., Reddel R.R. Telomere maintenance by recombination in human cells // Nat. Genet. 2000. Vol. 26, N 4. P. 447-450.
7. Khavinson V.Kh., Bondarev I.E., Butyugov A.A. Epithalon peptide induces telomerase activity and telomere elongation in human somatic cells // Bull. Exp. Biol. Med. 2003. Vol. 135, N 6. P. 590-592.
8. Khavinson V.Kh., Bondarev I.E., Butyugov A.A., Smirnova T.D. Peptide promotes overcoming of the division limit in human somatic cell // Bull. Exp. Biol. Med. 2004. Vol. 137, N 5. P. 503-506.
9. Lundblad V. DNA ends: maintenance of chromosome termi­ni versus repair of double strand breaks // Mut. Res. 2000. Vol. 451, N 1-2. P. 227-240.
10. Olovnikov A.M. A theory of marginotomy: the incomplete copying of template margin in enzymic synthesis of polynucleotides and biological significance of the phenomenon // J. Theor. Biol. 1973. Vol. 41, N 1. P. 181-190.
11. O’Sullivan R.J., Karlseder J. Telomeres: protecting chromosomes against genome instability // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2010. Vol. 11, N 3. P. 171-181.
12. Ozturk S., Sozen B., Demir N. Telomere length and telomerase activity during oocyte maturation and early embryo development in mammalian species // Mol. Hum. Reprod. 2013. Vol. 20, N 1. P. 15-30.
13. Schoeftner S., Blasco M.A. Developmentally regulated transcription of mammalian telomeres by DNA-dependent RNA polymerase II // Nat. Cell Biol. 2008. Vol. 10, N 2. P. 228-236.
14. Zhao Y., Hoshiyama H., Shay J.W., Wright W.E. Quantitative telomeric overhang determination using a double-strand specific nuclease // Nucleic Acids Res. 2007.
Vol. 36, N 3. e14.

Содержание внеклеточной ДНК плода в материнской крови и экспрессия ДНК-распознающих ZBP-1 рецепторов в структурах плаценты при преэклампсии и преждевременных родах
О.Р.Баев1,2, А.О.Карапетян1, Н.В.Низяева1, А.А.Садекова1, А.М.Красный1,3 179
1ФГБУ НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава России, Москва; 2Кафедра акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии Института профессионального образования ФГАОУ ВО Первого МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва; 3ФГБУН Институт биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН, Москва, РФ
          Определяли содержание внеклеточной ДНК плода в материнской крови и экспрессию рецепторов ZBP-1 в ткани плаценты при неосложнённом течении беременности, преэклампсии и преждевременных родах. В исследование вошли 16 беременных с преэклампсией (8 случаев ранней преэклампсии и 8 случаев — поздней), а также 16 женщин с преждевременным родоразрешением и 21 женщина с неосложнённой беременностью и своевременными родами (норма). Концентрацию внеклеточной ДНК плода определяли методом ПЦР путём выявления гиперметилированной части гена RASSF1A. Иммуногистохимическое исследование проводили на парафиновых срезах плаценты с использованием первичных поликлональных антител к ZBP-1. Обнаружено значимое увеличение содержания ДНК плода у женщин с преэклампсией по сравнению с нормой независимо от срока манифестации заболевания. Концентрация ДНК плода при преждевременных родах не отличалась от таковой при поздней преэклампсии и в норме, однако была достоверно меньше по сравнению с ранней преэклампсией. Иммуногистохимическое исследование выявило более высокую экспрессию ZBP-1 в синцитиотрофобласте ворсин при ранней преэклампсии, чем при преждевременных родах (p=0.006). Фрагменты повреждённых клеток плаценты, прежде всего трофобласта, поступают в материнский кровоток и являются источником внеклеточной ДНК плода, а также потенциальным лигандом для ZBP-1, что способствует дальнейшему повреждению клеток и приводит к формированию порочного круга. Повышение концентрации ДНК плода в крови беременной и экспрессии ZBP-1 в синцитиотрофобласте при преэклампсии — взаимосвязанные процессы, отражающие нарушение морфофункционального состояния плаценты.
Ключевые слова: внеклеточная ДНК плода, ген RASSF1A, ZBP-1, преэклампсия, преждевременные роды
Адрес для корреспонденции: niziaeva@gmail.com. Низяева Н.В.
Литература
1. Карапетян А.О., Баева М.О., Баев О.Р. Роль внеклеточной ДНК плода в прогнозировании больших акушерских синдромов // Акуш. и гин. 2018. № 4. С. 10-15.
2. Карапетян А.О., Баев О.Р., Красный А.М., Садекова А.А., Муллабаева С.М. Внеклеточная ДНК в динамике не­осложненной беременности // Бюл. экспер. биол. 2018. Т. 166, № 7. С. 103-106.
3. Милованов А.П. Патология системы мать — плацента — плод. Москва, 1999.
4. Низяева Н.В., Волкова Ю.С., Муллабаева С.М., Щеголев А.И. Методические основы изучения ткани плаценты и оптимизация режимов предподготовки материала // Акуш. и гин. 2014. № 8. С. 10-18
5. Cухих Г.Т., Ванько Л.В. Иммунные факторы в этиологии и патогенезе осложнений беременности // Акуш. и гин. 2012.
№ 1. C. 128-136.
6. Biological DNA Sensor. The Impact of Nucleic Acids on Diseases and Vaccinology / Eds K.Ishii, C.K.Tang. Academic Press, 2013.
7. Dong X., Gou W., Li C., Wu M., Han Z., Li X., Chen Q. Proteinuria in preeclampsia: Not essential to diagnosis but related to disease severity and fetal outcomes // Pregnancy Hypertens. 2017. Vol. 8. P. 60-64.
8. Dugoff L., Barberio A., Whittaker P.G., Schwartz N., Sehdev H., Bastek J.A. Cell-free DNA fetal fraction and preterm birth // Am. J. Obstet. Gynecol. 2016. Vol. 215, N 2. P. 231.e 1-7.
9. Guo H., Gilley R.P., Fisher A., Lane R., Landsteiner V.J., Ragan K.B., Dovey C.M., Carette J.E., Upton J.W., Mocarski E.S., Kaiser W.J. Species-independent contribution of ZBP1/DAI/DLM-1-triggered necroptosis in host defense against HSV1 // Cell Death Dis. 2018. Vol. 9, N 8. ID 816. doi: 10.1038/s41419-018-0868-3
10. Maelfait J., Liverpool L., Bridgeman A., Ragan K.B., Upton J.W., Rehwinkel J. Sensing of viral and endogenous RNA by ZBP1/DAI induces necroptosis // EMBO J. 2017. Vol. 36, N 17. P. 2529-2543.
11. Magee L.A., Pels A., Helewa M., Rey E., von Dadelszen P.; SOGC Hypertension Guideline Committee. Diagnosis, evaluation, and management of the hypertensive disorders of pregnancy: executive summary // J. Obstet. Gynaecol. Can. 2014. Vol. 36, N 4. P. 575-576.
12. Mitsui Y., Langridge R., Shortle B.E., Cantor C.R., Grant R.C., Kodama M., Wells R.D. Physical and enzymatic studies on poly d(I-C)-poly d(I-C), an unusual double-helical DNA // Nature. 1970. Vol. 228. P. 1166-1169.
13. Nizyaeva N.V., Sukhacheva T.V., Kulikova G.V., Nagovitsyna M.N., Kan N.E., Tyutyunnik V.L., Serov R.A., Shchyogolev A.I., Sukhikh G.T. Ultrastructure features of placenta villi in cases of preeclampsia // Virchows Archiv. 2016. Vol. 469, Suppl. 1. P. S184-S185.
14. Seval M.M., Karabulut H.G., Tükün A., Koç A. Cell free fetal DNA in the plasma of pregnant women with preeclampsia // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2015. Vol. 42, N 6. P. 787-791.
15. Taglauer E.S., Wilkins-Haug L., Bianchi D.W. Cell-free fetal DNA in the maternal circulation as an indication of placental health and disease // Placenta. 2014. Vol. 35, Suppl. P. S64‑S68.
16. Takaoka A., Wang Z., Choi M.K., Yanai H., Negishi H., Ban T., Lu Y., Miyagishi M., Kodama T., Honda K., Ohba Y., Taniguchi T. DAI (DLM-1/ZBP1) is a cytosolic DNA sensor and an activator of innate immune response // Nature. 2007. Vol. 448. P. 501-505.
17. Upton J.W., Kaiser W.J., Mocarski E.S. DAI/ZBP1/DLM-1 complexes with RIP3 to mediate virus-induced programmed necrosis that is targeted by murine cytomegalovirus vIRA // Cell Host Microbe. 2012. Vol. 11, N 3. P. 290-297.
18. Wallach D., Kang T.B., Dillon C.P., Green D.R. Programmed necrosis in inflammation: Toward identification of the effector molecules // Science. 2016. Vol. 352. ID aaf2154. doi: 10.1126/science.aaf2154
19. Wang G., Vasquez K.M. Models for chromosomal replication-independent non-B DNA structure-induced genetic instability // Mol. Carcinog. 2009. Vol. 48, N 4. P. 286-298.
20. WHO recommendations for prevention and treatment of pre-eclampsia and eclampsia. World Health Organization, 2011.

Цитокиновый профиль при экспериментальной модели критической ишемии конечностей у крыс
А.П.Лыков1,2, Н.А.Бондаренко1,2, О.В.Повещенко1,2, А.В.Кабаков1, М.А.Суровцева1,2, И.И.Ким1,2, О.В.Казаков1, А.Ф.Повещенко1,2, Е.В.Янкайте1 185
1НИИКЭЛ филиал ИЦиГ СО РАН, Новосибирск, РФ; 2НМИЦ им. акад. Е.Н.Мешалкина Минздрава России, Новосибирск, РФ
          Исследовано влияние внутримышечного введения клеточного продукта (мезенхимные стволовые клетки, кондиционные среды, эритропоэтин) на уровни цитокинов в сыворотке крови, кондиционных средах от костномозговых мононуклеаров и мышцах голени у крыс Вистар с ишемией нижней конечности. Клеточный продукт способствует снижению провоспалительного фона на ранних сроках эксперимента и увеличению проангиогенных факторов.
Ключевые слова: ишемия нижних конечностей, цитокины, клеточный продукт
Адрес для корреспонденции:
aplykov2@mail.ru.
Лыков А.П.
Литература
1. Лебедев С.В., Карасев А.В., Кунгурцев В.В., Лохонина А.В., Клейменова Е.Б. Клеточная терапия критической ишемии нижних конечностей (проблемы и перспективы) // Вестник РАМН. 2013. Т. 68, № 3. С. 33-44.
2. Повещенко О.В., Лыков А.П., Бондаренко Н.А., Ким И.И., Янкайте Е.В., Казаков О.В., Суровцева М.А., Бгатова Н.П., Карпенко А.А., Покушалов Е.А., Коненков В.И. Эффективность внутримышечного введения стволовых/прогениторных клеток в эксперименте на модели ишемии нижней конечности // Ангиология и сосуд. хир. 2016. Т
. 22, № 4. С. 51-54.
3. Asahara T., Kawamoto A. Endothelial progenitor cells for postnatal vasculogenesis // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2004. Vol. 287, N 3. P. C572-C579.
4. Bennis Y., Sarlon-Bartoli G., Guillet B., Lucas L., Pellegrini L., Velly L., Blot-Chabaud M., Dignat-Georges F., Sabatier F., Pisano P. Priming of late endothelial progenitor cells with erythropoietin before transplantation requires the CD131 receptor subunit and enhances their angiogenic potential // J. Thromb. Haemost. 2012. Vol. 10, N 9. P. 1914-1928.
5. Brenes R.A., Jadlowiec C.C., Bear M., Hashim P., Protack C.D., Li X., Lv W., Collins M.J., Dardik A. Toward a mouse model of hind limb ischemia to test therapeutic angiogenesis // J. Vasc. Surg. 2012. Vol. 56, N 6. P. 1669-1679.
6. Chen L., Liu H., Yuan M., Lu W., Wang J., Wang T. The roles of interleukins in perfusion recovery after peripheral arterial disease // Biosci. Rep. 2018. Vol. 38, N 1. pii: BSR20171455. doi: 10.1042/BSR20171455
7. Fan Y., Ye J., Shen F., Zhu Y., Yeghiazarians Y., Zhu W., Chen Y.,  Lawton M.T., Young W.L., Yang G.Y. Interleukin-6 stimulates circulating blood-derived endothelial progenitor cell angiogenesis in vitro // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2008. Vol. 28, N 1. P. 90-98.
8. Jalkanen J., Maksimow M., Hollmén M., Jalkanen S., Hakovirta H. Compared to intermittant claudication critical limb ischemia is associated with elevated levels of cytokines // PLoS One. 2016. Vol. 11, N 9. ID e0162353. doi: 10.1371/journal.pone.0162353
9. Lawlor D.K., Brock R.W., Harris K.A., Potter R.F. Cytokines contribute to early hepatic parenchymal injury and microvascular dysfunction after bilateral hindlimb ischemia // J. Vasc. Surg. 1999. Vol. 30, N 3. P. 533-541.
10. Liew A., O’Brien T. Therapeutic potential for mesenchymal stem cell transplantation in critical limb ischemia // Stem Cell Res. Ther. 2012. Vol. 3, N 4. ID 28. doi: 10.1186/scrt119
11. Lin Z.Q., Kondo T., Ishida Y., Takayasu T., Mukaida N. Essential involvement of IL-6 in the skin wound-healing process as evidenced by delayed wound healing in IL-6-deficient mice // J. Leukoc. Biol. 2003. Vol. 73, N 6. P. 713‑721.
12. Tang G.L., Chang D.S., Sarkar R., Wang R., Messina L.M. The effect of gradual or acute arterial occlusion on skeletal muscle blood flow, arteriogenesis, and inflammation in rat hindlimb ischemia // J. Vasc. Surg. 2005. Vol. 41, N 2. P. 312-320.
13. Tebebi P.A., Kim S.J., Williams R.A., Milo B., Frenkel V., Burks S.R., Frank J.A. Improving the therapeutic efficacy of mesenchymal stromal cells to restore perfusion in critical limb ischemia through pulsed focused ultrasound // Sci. Rep. 2017. Vol. 7. ID 41550. doi: 10.1038/srep41550
14. Tournois C., Pignon B., Sevestre M.A., Al-Rifai R., Creuza V., Poitevin G., François C., Nguyen P. Cell therapy in critical limb ischemia: A comprehensive analysis of two cell therapy products // Cytotherapy. 2017. Vol. 19, N 2. P. 299-310.
15. Zhong W., Zhao Y., Tian Y., Chen M., Lai X. The protective effects of HGF against apoptosis in vascular endothelial cells caused by peripheral vascular injury //Acta Biochim.
Biophys. Sin (Shanghai). 2018. Vol. 50, N 7. P. 701-708.

Количественные изменения популяции опухолевых стволовых клеток после радиационного воздействия в дозе 10 Гр как прогностический маркер ближайших результатов лечения плоскоклеточного рака шейки матки
И.А.Замулаева, Е.И.Селиванова, О.Н.Матчук, Л.И.Крикунова, Л.С.Мкртчян, Г.З.Кулиева, А.Д.Каприн – 191
Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф.Цыба — филиал ФГБУ НМИЦ радиологии Минздрава России, Обнинск
          Определяли прогностическое значение доли опухолевых стволовых клеток в соскобах с шейки матки 38 больных раком шейки матки до лечения, а также изменений этого показателя после облучения в суммарной очаговой дозе 10 Гр в отношении ближайших результатов радио- и химиорадиотерапии, которые оценивали по степени регрессии первичного опухолевого очага через 3-6 мес после окончания лечения. Опухолевые стволовые клетки выявляли по иммунофенотипу CD44+CD24low с помощью проточной цитометрии. При полной регрессии опухоли доля опухолевых стволовых клеток в среднем уменьшалась на 2.2±1.1% после первых сеансов облучения, в то время как при частичной регрессии этот показатель увеличивался в среднем на 3.3±2.3% (р=0.03). В результате множественного регрессионного анализа выявлено два независимых по­казателя, влияющих на степень регрессии опухоли: стадия заболевания (что вполне ожидаемо) и изменение доли опухолевых стволовых клеток после первых сеансов облучения (R=0.60, р<0.002 для модели в целом). Доля опухолевых стволовых клеток до лечения не имела прогностического значения.
Ключевые слова: опухолевые стволовые клетки, рак шейки матки, радиотерапия, прогноз
Адрес для корреспонденции: zamulaeva@mail.ru. Замулаева И.А.
Литература
1.
Chhabra R. Cervical cancer stem cells: opportunities and challenges // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2015. Vol. 141, N 11. P. 1889-1897.
2. Chopra S., Deodhar K., Pai V., Pant S., Rathod N., Goda J.S., Sudhalkar N., Pandey P., Waghmare S., Engineer R., Mahantshetty U., Ghosh J., Gupta S., Shrivastava S. Cancer Stem cells, CD44 and outcomes following chemoradiation in locally advanced cervical cancer: Results from a prospective study // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2019. Vol. 103, N 1. P. 161-168.
3. Eisenhauer E.A., Therasse P., Bogaerts J., Schwartz L.H., Sargent D., Ford R., Dancey J., Arbuck S., Gwyther S., Mooney M., Rubinstein L., Shankar L., Dodd L., Kaplan R., Lacombe D., Verweij J. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1) // Eur. J. Cancer. 2009. Vol. 45, N 2. P. 228-247.
4. Feng D., Peng C., Li C., Zhou Y., Li M., Ling B., Wei H., Tian Z. Identification and characterization of cancer stem-like cells from primary carcinoma of the cervix uteri // Oncol. Rep. 2009. Vol. 22, N 5. P. 1129-1134.
5. Fu H.C., Chuang I.C., Yang Y.C., Chuang P.C., Lin H., Ou Y.C., Chang Chien C.C., Huang H.S., Kang H.Y. Low P16INK4A expression associated with high expression of cancer stem cell markers predicts poor prognosis in cervical cancer after radiotherapy // Int. J. Mol. Sci. 2018. Vol. 19, N 9. pii: E2541. doi: 10.3390/ijms19092541
6. Gu W., Yeo E., McMillan N., Yu C. Silencing oncogene expres­sion in cervical cancer stem-like cells inhibits their cell growth and self-renewal ability // Cancer Gene Ther. 2011. Vol. 18, N 12. P. 897-905.
7. Hou T., Zhang W., Tong C., Kazobinka G., Huang X., Huang Y., Zhang Y. Putative stem cell markers in cervical squamous cell carcinoma are correlated with poor clinical outcome // BMC Cancer. 2015. Vol. 15. ID 785. doi: 10.1186/s12885-015-1826-4
8. Kim B.W., Cho H., Choi C.H., Ylaya K., Chung J.Y., Kim J.H., Hewitt S.M. Clinical significance of OCT4 and SOX2 protein expression in cervical cancer // BMC Cancer. 2015. Vol. 15. ID 1015. doi: 10.1186/s12885-015-2015-1
9. Li J., Zhou B.P. Activation of
b-catenin and Akt pathways by Twist are critical for the maintenance of EMT associated cancer stem cell-like characters // BMC Cancer. 2011. Vol. 11. ID 49. doi: 10.1186/1471-2407-11-49
10. Liu H., Wang Y.J., Bian L., Fang Z.H., Zhang Q.Y., Cheng J.X. CD44+/CD24+ cervical cancer cells resist radiotherapy and exhibit properties of cancer stem cells // Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2016. Vol. 20, N 9. P. 1745-1754.
11. Lv Y., Yang L., Wang F. Chemoradiation therapy reduces aldehyde dehydrogenase 1 expression in cervical cancer but does not improve patient survival // Med. Oncol. 2015. Vol. 32, N 5. ID 155. doi: 10.1007/s12032-015-0597-8
12. Xie Q., Liang J., Rao Q., Xie X., Li R., Liu Y., Zhou H., Han J., Yao T., Lin Z. Aldehyde dehydrogenase 1 expression predicts chemoresistance and poor clinical outcomes in patients with locally advanced cervical cancer treated with neoadjuvant chemotherapy prior to radical hysterectomy // Ann. Surg. Oncol. 2016. Vol. 23, N 1. P. 163-170.
13. Yao T., Lu R., Zhang Y., Zhang Y., Zhao C., Lin R., Lin Z. Cervical cancer stem cells // Cell Prolif. 2015. Vol. 48, N 6. P. 611-625.
14. Zhang J., Chen X., Bian L., Wang Y., Liu H. CD44+/CD24+-expressing cervical cancer cells and radioresistant cervical cancer cells exhibit cancer stem cell characteristics // Gynecol. Obstet. Invest. 2019. Vol.84, N 2. P. 174-182.
15. Zhang X.P., Cheng Q.H., Yang H.J., Qiao E.Q. Research progresses in cancer stem cells of three common fertility-related female malignancies // Pathol. Oncol. Res. 2019. Vol. 25, N 3. P. 827-835.

Оценка взаимодействия материалов на основе магния с клетками крови и культурой диплоидных клеток человека in vitro
Н.В.Боровкова1, С.В.Добаткин2,3, М.С.Макаров1, И.Н.Пономарев1, А.А.Офицеров1, М.В.Сторожева1, Н.С.Мартыненко2,3, Ю.З.Эстрин4,5 195
1ГБУЗ НИИ скорой помощи им. Н.В.Склифосовского ДЗ г. Москвы, Москва, РФ; 2ФГБУН Институт металлургии и материаловедения им. А.А.Байкова РАН, Москва, РФ; 3НИТУ МИСиС, Москва, РФ; 4Department of Materials Science and Engineering, Monash University, Clayton, VIC 3800, Australia; 5Department of Mechanical Engineering, The University of Western Australia, Nedlands, WA 6009, Australia
          Исследовали морфофункциональные свойства клеток человека при контакте с материалами на основе магния. Использовали три типа материалов: чистый магний (Mg), магниевый сплав, легированный иттрием, неодимом и цирконием (Mg-Y-Nd-Zr), магниевый сплав, легированный цинком и кальцием (Mg-Zn-Ca). Материалы помещали в кровь доноров и в культуру мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, общее время экспозиции составляло 3 сут. Исследуемые материалы in vitro не вызывали массового разрушения эритроцитов и лейкоцитов человека, однако при этом наблюдалось постепенное снижение их структурной целостности. Во всех случаях через 6 ч экспозиции отмечена спонтанная агрегация тромбоцитов. В присутствии чистого магния и сплава Mg-Zn-Ca это сопровождалось снижением уровня тромбоцитов с гранулами. Через 24 ч во всех опытах значительная часть тромбоцитов дегранулировала, через 72 ч все тромбоциты не содержали гранул. Одновременно с этим наблюдалось формирование крупных агрегатов до 60 мкм в диаметре. В культуре стромальных клеток через 1 сут все материалы на основе магния вызывали нарушение структурной целостности клеток без выраженного угнетения способности к пролиферации. Структурная целостность стромальных клеток частично восстанавливалась к 3-м суткам культивирования. Изученные материалы Mg, Mg-Y-Nd-Zr и Mg-Zn-Ca не обладают значительной токсичностью, однако оказывают выраженное проагрегантное действие, способны стимулировать спонтанную дегрануляцию тромбоцитов и вызывают снижение жизне­спо­собности диплоидных клеток in vitro.
Ключевые слова: магний, сплавы, клетки, морфофункциональный статус, пролиферация
Адрес для корреспонденции: mcsimmc@yandex.ru. Макаров М.С.
Литература
1. Макаров М.С. Влияние наночастиц на биологическую полноценность тромбоцитов человека // Мол. мед. 2017. Т. 15, № 6. С. 9-13.
2. Макаров М.С. Флюоресценция в исследовании клеток: пути и возможности // Мол. мед. 2013. № 4. С. 10-14.
3. Хватов В.Б., Свищев А.В., Ваза А.Ю., Боровкова Н.В., Миронов А.С., Похитонов Д.Ю., Андреев Ю.В. Способ изготовления лиофилизированного аллотрансплантата кости // Трансплантология.
2016. № 1. С. 13-18.
4. Dobatkin S.V., Lukyanova E.A., Martynenko N.S., Anisimova M.Yu., Kiselevskiy M.V., Gorshenkov M.V., Yurchenko N. Yu., Raab G.I., Yusupov V.S., Birbilis N., Salishchev G.A., Estrin Y.Z. Strength, corrosion resistance, and biocompatibility of ultrafine-grained Mg alloys after different modes of severe plastic deformation // IOP Conf. Ser. Mater. Sci. Eng. 2017. N 194. ID 012004. doi:10.1088/1757-899X/194/1/012004
5. Kim Y.K., Lee K.B., Kim S.Y., Bode K., Jang Y.S., Kwon T.Y., Jeon M.H., Lee M.H. Gas formation and biological effects of biodegradable magnesium in a preclinical and clinical observation // Sci. Technol. Adv. Mater. 2018. Vol. 19, N 1. P. 324-335.
6. Li G., Zhang L., Wang L., Yuan G., Dai K., Pei J., Hao Y. Dual modulation of bone formation and resorption with zoledronic acid-loaded biodegradable magnesium alloy implants improves osteoporotic fracture healing: An in vitro and in vivo study // Acta Biomater. 2018. Vol. 65. P. 486-500.
7. Liu C., Ren Z., Xu Y., Pang S., Zhao X., Zhao Y. Biodegradable magnesium alloys developed as bone repair materials: a review // Scanning. 2018. Vol. 2018. ID 9216314. doi: 10.1155/2018/9216314
8. Lukyanova E., Martynenko N., Dobatkin S., Estrin Y., Anisimova N., Kiselevsky M. Features of in vitro and in vivo behaviour of magnesium alloy WE43 // Mater. Lett. 2018. Vol. 215. P. 308-311.
9. Makarov M.S., Kobzeva E.N., Vysochin I.V., Borovkova N.V., Khvatov V.T. Morphofunctional analysis of human platelets by vital staining // Bull. Exp. Biol. Med. 2014. Vol. 156, N 3. P. 409-412.
10. Martynenko N.S., Lukyanova E.A., Dobatkin S.V., Estrin Y., Serebryany V.N., Gorshenkov M.V., Shchetinin I.V., Raab G.I. Increasing strength and ductility of magnesium alloy WE43 by equal-channel angular pressing // Mater. Sci. Eng. A. 2018. Vol. 712. P. 625-629.
11. Martynenko N.S., Lukyanova E.A., Serebryany V.N., Prosvirnin D. Terentiev V., Raab G., Dobatkin S., Estrin Y. Effect of equal channel angular pressing on structure, texture, mechanical and in-service properties of a biodegradable magnesium alloy // Mater. Lett. 2019. Vol. 238. P. 218-221.
12. Mayer A., Vadon M., Rinner B., Novak A., Wintersteiger R., Fröhlich E. The role of nanoparticle size in hemocompatibility // Toxicology. 2009. Vol. 258, N 2-3. P. 139-147.
13. Perez J.R., Kouroupis D., Li D.J., Best T.M., Kaplan L., Correa D. Tissue engineering and cell-based therapies for fractures and bone defects // Front. Bioeng. Biotechnol. 2018. Vol. 6. ID 105. doi: 10.3389/fbioe.2018.00105
14. Wang H., Hao Z., Wen S. Do biodegradable magnesium alloy intramedullary interlocking nails prematurely lose fixation stability in the treatment of tibial fracture? A numerical simulation // J. Mech. Behav. Biomed. Mater. 2017. Vol. 65. P. 117-126.
15. Zhang X., Zhang C., Xu W., Zhong B., Lin F., Zhang J., Wang Q., Ji J., Wei J., Zhang Y. Biodegradable mesoporous calcium-magnesium silicate-polybutylene succinate scaffolds for osseous tissue engineering // Int. J. Nanomedicine.
2015. Vol. 10. P. 6699-6708.

Изменения кровеносной и лимфатической системы внутренних половых органов самок крыс при внутривенном и лимфотропном введении мультипотентных мезенхимных стволовых клеток и продуктов их секреции
Т.И.Дергачева, А.В.Шурлыгина, Е.В.Старкова, О.В.Повещенко, В.В.Климонтов, В.И.Коненков – 203
НИИКЭЛ — филиал ИЦиГ СО РАН, Новосибирск, РФ
          Изучены эффекты внутривенного и лимфотропного введения костномозговых мультипотентных мезенхимных стромальных клеток и продуктов их секреции в кондиционную среду на гемо- и лимфоциркуляцию в матке и яичниках, а также на фолликулогенез у самок крыс Вистар. Показано, что оба способа введения стромальных клеток и кондиционных сред этих клеток приводят к увеличению количества и диаметра кровеносных сосудов как в стенке матки, так и в мозговом слое яичников. На фолликулярный аппарат яичников мезенхимные стромальные клетки и их кондиционные среды влияния не оказывают.
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стромальные клетки, кровеносные и лимфатические сосуды, матка, яичники, фолликулярный аппарат
Адрес для корреспонденции: anna_v_s@mail.ru. Шурлыгина А.В.
Литература
1. Бородин Ю.И., Асташова Т.А., Асташов В.В., Морозов С.В., Любарский М.С. Методы лимфосанации в клинической и оздоровительной медицине // Бюл. СО РАМН. 2000. Т. 20, № 2. С. 99-102.
2. Коненков В.И. Комплексный анализ функций лимфатической системы // Вестник лимфологии. 2008. № 2. С. 27-28.206
3. Королева Е.Г., Дергачева Т.И., Шурлыгина А.В., Повещенко О.В., Красильников С.Э., Коненков В.И. Влияние мультипотентных мезенхимных стволовых клеток костномозгового происхождения на состояние кровеносной и лимфатической сосудистых сетей в тканях стенки матки крыс Вистар при экспериментальном хроничес­ком метроэндометрите // Бюл. экспер. биол. 2018. Т. 165, № 2. С. 166-169.
4. Лыков А.П., Кабаков А.В., Повещенко О.В., Бондаренко Н.А., Повещенко А.Ф., Казаков О.В., Никонорова Ю.В., Коненков В.И. Эффективность терапии клеточным продуктом острого инфаркта миокарда у крыс линии Wistar по данным биоэлектрической активности миокарда // Междунар. журн. прикл. и фундамент. исследований.
2014. № 8-4. С. 78-84.
5. Caplan A.I. Why are MSCs therapeutic? New data: new insight // J. Pathol. 2009. Vol. 217, N 2. P. 318-324.
6. Dergacheva T.I., Shurlygina A.V., Mel’nikova E.V., Gritsyk O.B., Tenditnik M.V., Poveshchenko O.V., Konenkov V.I. Effects of bone marrow multipotent mesenchymal stromal cells and their secretion products on the cellular composition of the thymus and spleen of female Wistar rats with experimental chronic inflammation of the internal genitals // Bull. Exp. Biol. Med. 2017. Vol. 164, N 1. P. 75-79.
7. Kim N., Cho S.G. Clinical applications of mesenchymal stem cells // Korean J. Intern. Med. 2013. Vol. 28, N 4. P. 387-402.
8. Prockop D.J. Repair of tissues by adult stem/progenitor cells (MSCs): controversies, myths, and changing paradigms // Mol. Ther. 2009. Vol. 17, N 6. P. 939-946.
9. Takehara Y., Yabuuchi A., Ezoe K., Kuroda T., Yamadera R., Sano C., Murata N., Aida T., Nakama K., Aono F., Aoyama N., Kato K., Kato O. The restorative effects of adipose-derived mesenchymal stem cells on damaged ovarian function // Lab. Invest. 2013. Vol. 93, N 2. P. 181-193.
10. Tan X., Gong Y.Z., Wu P., Liao D.F., Zheng X.L. Mesenchymal stem cell-derived microparticles: a promising therapeutic strategy // Int. J. Mol. Sci. 2014. Vol. 15, N 8. P. 14 348-14 363.
11. Tsuchiya S., Sugimoto K., Kamio H., Okabe K., Kuroda K., Okido M., Hibi H. Kaempferol-immobilized titanium dioxide promotes formation of new bone: effects of loading methods on bone marrow stromal cell differentiation in vivo and in vitro // Int. J. Nanomedicine.
2018. Vol. 13. P. 1665-1676.

Сыворотка/плазма пуповинной крови: цитокиновый профиль и перспективы применения в регенеративной медицине
Ю.А.Романов1,3, В.В.Вторушина2, Т.Н.Дугина3, А.Ю.Романов2, Н.В.Петрова3 208
1ФГБУ НМИЦ кардиологии Минздрава России, Москва; 2ФГБУ НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава России, Москва; 3ООО “КриоЦентр”, Москва, РФ
          С помощью мультиплексного анализа исследовано содержание цитокинов и факторов роста в сыворотке и плазме пуповинной крови человека. Установлено, что по сравнению с сывороткой периферической крови взрослых доноров сыворотка и плазма пуповинной крови содержат достоверно более высокие концентрации большинства исследованных молекул, в том числе интерлейкинов 4, 5, 6, 7, 10 и 15, MCP-1, SCF, SDF, а также факторов роста, принимающих участие в процессах регенерации: G-CSF, HGF, PDGF-BB и VEGF. Плазма и особенно сыворотка пуповинной крови являются богатейшим источником цитокинов и ростовых факторов, обладающих противовоспалительным, антиапоптотическим и ангиогенным действием и могут найти применение в различных областях регенеративной медицины.
Ключевые слова: сыворотка пуповинной крови, плазма пуповинной крови, цитокины, факторы роста, регенеративная медицина
Адрес для корреспонденции: romanov@cryocenter.ru. Романов Ю.А.
Литература
1. Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Сыворотка пуповинной крови человека: эффективная замена эмбриональной телячьей сыворотки для культивирования мультипотентных мезенхимных стромальных клеток человека // Клет. технол. в биол. и мед. 2016. № 4. С. 215-220.
2. Романов Ю.А., Романов А.Ю. Ткани перинатального происхождения: уникальный источник клеток для регенеративной медицины. Часть II. Пупочный канатик // Неонатология: НМО. 2018. Т. 6, № 3. С. 54-76.
3. Романов Ю.А., Романов А.Ю. Ткани перинатального происхождения — уникальный источник клеток для регенеративной медицины. Часть I. Пуповинная кровь // Неонатология: НМО. 2018. Т. 6, № 2. С. 64-77.
4.
Ang L.P., Do T.P., Thein Z.M., Reza H.M., Tan X.W., Yap C., Tan D.T., Beuerman R.W. Ex vivo expansion of conjunctival and limbal epithelial cells using cord blood serum-supple­mented culture medium // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2011. Vol. 52, N 9. P. 6138-6147.
5. Azizi R., Aghebati-Maleki L., Nouri M., Marofi F., Negargar S., Yousefi M. Stem cell therapy in Asherman syndrome and thin endometrium: Stem cell- based therapy // Biomed. Pharmacother. 2018. Vol. 102. P. 333-343.
6. Bae S.H., Jo A., Park J.H., Lim C.W., Choi Y., Oh J., Park J.M., Kong T., Weissleder R., Lee H., Moon J. Bioassay for monitoring the anti-aging effect of cord blood treatment // Theranostics. 2019. Vol. 9, N 1. P. 1-10.
7.. Ballen K. Update on umbilical cord blood transplantation // F1000Research. 2017. Vol. 6. ID 1556. doi: 10.12688/f1000research.11952.1
8. Borrás F.E., Matthews N.C., Patel R., Navarrete C. Dendritic cells can be successfully generated from CD34+ cord blood cells in the presence of autologous cord blood plasma // Bone Marrow Transplant. 2000. Vol. 26, N 4. P. 371-376.
9. Castellano J.M., Mosher K.I., Abbey R.J., McBride A.A., James M.L., Berdnik D., Shen J.C., Zou B., Xie X.S., Tingle M., Hinkson I.V., Angst M.S., Wyss-Coray T. Human umbilical cord plasma proteins revitalize hippocampal function in aged mice // Nature. 2017. Vol. 544. P. 488-492.
10. Chakraborty A., Dutta J., Das S., Datta H. Effect of cord blood serum on ex vivo human limbal epithelial cell culture // J. Ocul. Biol. Dis. Infor. 2012. Vol. 5, N 3-4. P. 77-82.
11. Chapman P., Reyes C., Gupta V. Normal physiological levels of human cytokines using Bio-Plex ProTM cytokine assays. Bio-Rad Laboratories, Inc., Tech Note 6029. URL:  http://www.bio-rad.com/webroot/web/pdf/lsr/literature/Bulletin_6029.pdf
12. Christensen R.D., Carroll P.D., Josephson C.D. Evidence-based advances in transfusion practice in neonatal intensive care units // Neonatology. 2014. Vol. 106, N 3. P. 245-253.
13. Ding Y., Yang H., Feng J.B., Qiu Y., Li D.S., Zeng Y. Human umbilical cord-derived MSC culture: the replacement of animal sera with human cord blood plasma // In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 2013. Vol. 49, N 10. P. 771-777.
14. Dugan K.J., Shalika S., Smith R.D., Padilla S.L. Comparison of synthetic serum substitute and fetal cord serum as media supplements for in vitro fertilization: a prospective, randomized study // Fertil. Steril. 1997. Vol. 67, N 1. P. 166-168.
15. Eichler H., Schaible T., Richter E., Zieger W., Voller K., Leveringhaus A., Goldmann S.F. Cord blood as a source of autologous RBCs for transfusion to preterm infants // Transfusion. 2000. Vol. 40, N 9. P. 1111-1117.
16. Giannaccare G., Buzzi M., Fresina M., Velati C., Versura P. Efficacy of 2-month treatment with cord blood serum eye drops in ocular surface disease: an in vivo confocal microscopy study // Cornea. 2017. Vol. 36, N 8. P. 915-921.
17. Gluckman E., Broxmeyer H.A., Auerbach A.D., Friedman H.S., Douglas G.W., Devergie A., Esperou H., Thierry D., Socie G., Lehn P. Hematopoietic reconstitution in a patient with Fanconi’s anemia by means of umbilical-cord blood from an HLA-identical sibling // N. Engl. J. Med. 1989. Vol. 321, N 17. P. 1174-1178.
18. Horowitz A.M., Villeda S.A. Therapeutic potential of systemic brain rejuvenation strategies for neurodegenerative disease // F1000Research. 2017. Vol. 6. ID 1291. doi: 10.12688/f1000research.11437.1
19. Huang L., Critser P.J., Grimes B.R., Yoder M.C. Human umbilical cord blood plasma can replace fetal bovine serum for in vitro expansion of functional human endothelial colony-forming cells // Cytotherapy. 2011. Vol. 13, N 6. P. 712-721.
20. Khodabux C.M., Brand A. The use of cord blood for transfusion purposes: current status // Vox Sang. 2009. Vol. 97, N 4. P. 281-293.
21. Ma H.Y., Yao L., Yu Y.Q., Li L., Ma L., Wei W.J., Lu X.M., Du L.L., Jin Y.N. An effective and safe supplement for stem cells expansion ex vivo: cord blood serum. // Cell Transplant. 2012. Vol. 21, N 5. P. 857-869.
22. Mahajan N., Sharma S. The endometrium in assisted reproductive technology: How thin is thin? // J. Hum. Reprod. Sci. 2016. Vol. 9, N 1. P. 3-8.
23. Pereira T., Ivanova G., Caseiro A.R., Barbosa P., Bártolo P.J., Santos J.D., Luís A.L., Maurício A.C. MSCs conditioned media and umbilical cord blood plasma metabolomics and composition // PLoS One. 2014. Vol. 9, N 11. ID e113769. doi: 10.1371/journal.pone.0113769
24. Romanov Y.A., Balashova E.E., Volgina N.E., Kabaeva N.V., Dugina T.N., Sukhikh G.T. Isolation of multipotent me­sen­chymal stromal cells from cryopreserved human umbilical cord tissue // Bull. Exp. Biol. Med. 2016. Vol. 160, N 4. P. 530-534.
25. Salazar C.A., Isaacson K., Morris S. A comprehensive review of Asherman’s syndrome: causes, symptoms and treatment options // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 2017. Vol. 29, N 4. P. 249-256.
26. Sharma N., Lathi S.S., Sehra S.V., Agarwal T., Sinha R., Titiyal J.S., Velpandian T., Tandon R., Vajpayee R.B. Comparison of umbilical cord serum and amniotic membrane transplantation in acute ocular chemical burns // Br. J. Ophthalmol. 2015. Vol. 99, N 5. P. 669-673.
27. Taguchi T., Suita S., Nakamura M., Yamanouchi T., Ogita K., Taguchi S., Uesugi T., Nakano H., Inaba S. The efficacy of autologous cord-blood transfusions in neonatal surgical patients // J. Pediatr. Surg. 2003. Vol. 38, N 4. P. 604-607.
28. Yoon K.C. Use of umbilical cord serum in ophthalmology // Chonnam Med. J. 2014.
Vol. 50, N 3. P. 82-85.

Влияние биоактивного пептидного комплекса, выделенного из сыворотки крови быка, на пролиферацию и миграцию мезенхимных стромальных клеток in vitro, а также на восстановление костных дефектов in vivo
А.И.Шайхалиев1, М.С.Краснов2, И.В.Вахрушев3, А.П.Ильина2, Е.Ю.Рыбакова4, К.Н.Ярыгин3, В.П.Ямскова4, И.А.Ямсков2 213
1ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва;2ФГБУН Институт элементоорганических соединений им. А.Н.Несмеянова РАН, Москва, РФ; 3ФГБНУ НИИ биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича, Москва, РФ; 4ФГБУН Институт биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН, Москва, РФ
          Исследовано влияние биоактивного пептидного комплекса, выделенного из сыворотки крови крупного рогатого скота, на пролиферативный потенциал и скорость миграции мезенхимных стромальных клеток in vitro, а также на заживление модельных костных дефектов у крыс. Данный биорегуляторный препарат стимулирует пролиферацию мезенхимных стромальных клеток пульпы молочного зуба in vitro, однако не влияет на скорость их миграции в двумерных культурах. Эксперименты in vivo показали, что применение препарата в комплексе с гидроксиапатитом и хитозановым гелем ускоряет регенерацию костной ткани, обеспечивая восстановление морфологически нормального костного матрикса. Таким образом, сыворотка крови крупного рогатого скота является доступным сырьём для производства биорегуляторных препаратов, которые могут быть использованы в медицинских целях.
Ключевые слова: биорегулятор, сыворотка крови, регенеративная медицина, мезенхимные стромальные клетки, пульпа зуба
Адрес для корреспонденции: embrmsk@mail.ru. Краснов М.С.
Литература
1. Вахрушев И.В., Антонов Е.Н., Попова А.В., Константинова Е.В., Каралкин П.А., Холоденко И.В., Лупатов А.Ю., Попов В.К., Баграташвили В.Н., Ярыгин К.Н. Разработка тканеинженерных имплантов для регенерации костной ткани на основе полилактогликолидных скаффолдов нового поколения и мультипотентных мезенхимальных клеток пульпы молочного зуба (SHED-клеток) // Клет. технол. в биол. и мед. 2012. № 1. С. 29-33.
2. Вахрушев И.В., Суздальцева Ю.Г., Бурунова В.В., Каралкин П.А., Лупатов А.Ю., Ярыгин К.Н. Мезенхимальные клетки пульпы молочного зуба: цитофенотип и первичная оценка возможности применения в тканевой инженерии костной ткани // Клет. технол. в биол. и мед. 2010. № 1. С. 55-60.
3. Гундорова Р.А., Хорошилова-Маслова И.П., Ченцова Е.В., Илатовская Л.В., Ямскова В.П., Романова И.Ю. Применение адгелона в лечении проникающих ранений роговицы в эксперименте // Вестник офтальмол. 1997. Т. 113, № 2. С. 12-15.
4. Константиновский А.А., Краснов М.С., Ямскова В.П., Рыбакова Е.Ю., Ямсков И.А. Исследование ранозаживляющего действия биорегуляторов, выделенных из тканей глаза и сыворотки крови быка, на модели экспериментальной травмы роговицы у кроликов in vivo // Бюл. экспер. биол. 2012. Т. 153, № 2. С. 177-182.
5. Краснов М.С., Рыбакова Е.Ю., Тихонов В.Е., Стрецкий Г.М., Авдеенко О.Е., Шайхалиев А.И., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Противоожоговое действие композиции, содержащей хитозановый гель и биорегулятор сыворотки крови // Клет. технол. в биол. и мед. 2012. № 2. С. 79-82.
6. Краснов М.С., Шайхалиев А.И., Коршаков Е.В., Ефименко М.В., Солошенков П.П., Давыдова Т.Р., Звукова Н.Д., Синицкая Е.С., Ямскова В.П., Ямсков И.А., Лозинский В.И. Индукция остеогенеза костной ткани крысы с использованием криогенно-структурированных пористых 3D-материалов с содержанием биорегулятора // Бюл. экспер. биол. 2019. Т. 168, № 7. С. 113-117.
7. Рыбакова Е.Ю., Краснов М.С., Ильина А.П., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Влияние биорегуляторов, выделенных из сыворотки крови и костной ткани млекопитающих, на состояние регенератов хвостов тритонов при роллерном органотипическом культивировании in vitro // Фундаментальные исследования. 2014. № 5-2. С. 283-289.
8. Стрецкий Г.М., Краснов М.С., Рыбакова Е.Ю., Авдеенко О.Е., Тихонов В.Е., Шайхалиев А.И., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Исследование влияния композиции на основе хитозанового геля и биорегулятора сыворотки крови на заживление гнойных ран у мышей // Клет. технол. в биол. и мед. 2011. № 4. С. 211-214.
9. Шайхалиев А.И., Стрецкий Г.М., Краснов М.С., Рыбакова Е.Ю., Тихонов В.Е., Ямскова В.П., Ямсков И.А. Действие новых композиций на восстановление костных дефектов у крыс в эксперименте // Фундаментальные исследования. 2013. № 9-2. С. 271-276.
10. Ямсков И.А., Виноградов А.А., Даниленко А.Н., Маслова Л.А., Рыбакова Е.И., Ямскова В.П. Низкомолекулярный гликопротеин из сыворотки крови крупного рогатого скота: структура и свойства // Прикл. биохим. и микробиол. 2001. Т. 37, № 1. С. 36-42.
11. Ямскова В.П., Рыбакова Е.Ю., Виноградов А.А., Вечеркин В.В., Ямсков И.А. Исследование белка-инактиватора адгезивного гликопротеина из сыворотки крови млекопитающих // Прикл. биохим. и микробиол. 2004. Т
. 40, № 4. С. 407-413.
12. Liaw C.W., Cannon C., Power M.D., Kiboneka P.K., Rubin L.L. Identification and cloning of two species of cadherins in bovine endothelial cells // EMBO J. 1990. Vol. 9, N 9. P. 2701-2708.
13. Yamskova V.P., Krasnov M.S., RybakovaE.Yu., Vecherkin V.V., Borisenko A.V., Yamskov A. Analysis of regulatory proteins from bovine blood serum that display biological activity at ultra low doses: 2. Tissue localization and role in wound healing // Biochemical Physics Frontal Research / Eds S.D.Varfolomeev, E.B.Burlakova, A.A.Popov, G.E.Zaikov. Hauppauge, New York, 2007. P. 71-78.