bbm.ktbm@gmail.com
com@iramn.ru
 



КЛЕТОЧНЫЕ  ТЕХНОЛОГИИ  В  БИОЛОГИИ  И  МЕДИЦИНЕ

2018 г., № 4

 СОДЕРЖАНИЕ

использование аденоассоциированного вирусного вектора для получения SCF-содержащих внеклеточных везикул мезенхимных стромальных клеток
Е.С.Зубкова*,**, И.Б.Белоглазова*,**, Е.Г.Евтушенко*, А.Т.Копылов, Е.К.Шевченко*, К.В.Дергилев*,**, Е.И.Ратнер*, Е.В.Парфенова*,**, М.Ю.Меньшиков* – 211
*ФГБУ НМИЦ кардиологии Минздрава России, Москва; **МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
          Мезенхимные стромальные клетки жировой ткани крысы трансдуцировали рекомбинантным аденоассоциированным вирусом (ААВ), несущим ген фактора роста стволовых клеток SCF, который стимулирует пролиферацию c-kit+ клеток сердца, способствует улучшению сердечной функции и выживания животных после инфаркта. Из кондиционированной среды мезенхимных стромальных клеток были выделены внеклеточные везикулы и охарактеризованы методами просвечивающей электронной микроскопии, анализа траекторий наночастиц, иммуноокрашивания и масс-спектрометрии. С помощью протеомного анализа показано, что трансгенный SCF обнаруживается во внеклеточных везикулах, высвобождаемых генно-модифицированными мезенхимными стромальными клетками и был выявлен ряд белков, характерных только для внеклеточных везикул трансдуцированных клеток. Внеклеточные везикулы мезенхимных стромальных клеток, трансдуцированных ААВ, могут быть использованы для доставки трансгенного белка в клетки сердца, поскольку они поглощаются клетками кардиосфер и прогениторными клетками сердца
Ключевые слова: мезенхимные стромальные клетки, внеклеточные везикулы, генетическая модификация, SCF, прогениторные клетки сердца
Адрес для корреспонденции: cat.zubkova@gmail.com. Зубкова Е.С.
Литература
1.            Патент РФ № 2542964. Способ получения прогениторных клеток миокарда / К.В.Дергилев, К.А.Рубина, В.Ю.Сысоева, Р.С.Акчурин, В.А.Ткачук, Е.В.Парфенова // Бюл. № 6. Опубликовано 27.02.2015.
2.            Armstrong J.P., Holme M.N., Stevens M.M. Re-engineering extracellular vesicles as smart nanoscale therapeutics // ACS Nano. 2017. Vol. 11, N 1. P. 69-83.
3.            Cheng L., Zhang K., Wu S., Cui M., Xu T. Focus on mesenchymal stem cell-derived exosomes: opportunities and challenges in cell-free therapy // Stem Cells Int. 2017. Vol. 2017. ID 6305295. doi: 10.1155/2017/6305295.
4.            Ciardiello C., Cavallini L., Spinelli C., Yang J., Reis-Sobreiro M., de Candia P., Minciacchi V.R., Di Vizio D. Focus on extracellular vesicles: new frontiers of cell-to-cell communication in cancer // Int. J. Mol. Sci. 2016. Vol. 17, N 2. P. 175. doi: 10.3390/ijms17020175.
5.            Fazel S., Chen L., Weisel R.D., Angoulvant D., Seneviratne C., Fazel A., Cheung P., Lam J., Fedak P.W., Yau T.M., Li R.K. Cell transplantation preserves cardiac function after infarction by infarct stabilization: augmentation by stem cell factor // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 2005. Vol. 130, N 5. P. 1310.
6.            Gilligan K.E., Dwyer R.M. Engineering exosomes for cancer therapyn // Int. J. Mol. Sci. 2017. Vol. 18, N 6. pii: E1122. doi: 10.3390/ijms18061122.
7.            He J.G., Li H.R., Han J.X., Li B.B., Yan D., Li H.Y., Wang P., Luo Y. GATA-4-expressing mouse bone marrow mesenchymal stem cells improve cardiac function after myocardial infarction via secreted exosomes // Sci. Rep. 2018. Vol. 8, N 1. P. 9047. doi: 10.1038/s41598-018-27435-9.
8.            Ishikawa K., Fish K., Aguero J., Yaniz-Galende E., Jeong D., Kho C., Tilemann L., Fish L., Liang L., Eltoukhy A.A., Anderson D.G., Zsebo K., Costa K.D., Hajjar R.J. Stem cell factor gene transfer improves cardiac function after myocardial infarction in swine // Circ. Heart Fail. 2015. Vol. 8, N 1. P. 167-174.
9.            Kang K., Ma R., Cai W., Huang W., Paul C., Liang J., Wang Y., Zhao T., Kim H.W., Xu M., Millard R.W., Wen Z., Wang Y. Exosomes secreted from CXCR4 overexpressing mesenchymal stem cells promote cardioprotection via akt signaling pathway following myocardial infarction // Stem Cells Int. 2015. Vol. 2015. ID 659890. doi: 10.1155/2015/659890.
10.          Ma J., Zhao Y., Sun L., Sun X., Zhao X., Sun X., Qian H., Xu W., Zhu W. Exosomes derived from akt-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells improve cardiac regeneration and promote angiogenesis via activating platelet-derived growth factor D // Stem Cells Transl. Med. 2017. Vol 6, N 1. P. 51-59.
11.          Meléndez-Hevia E., De Paz-Lugo P., Cornish-Bowden A., Cárdenas M.L. A weak link in metabolism: the metabolic capacity for glycine biosynthesis does not satisfy the need for collagen synthesis // J. Biosci. 2009. Vol. 34, N 6. P. 853-872.
12.          Mi H., Huang X., Muruganujan A., Tang H., Mills C., Kang D., Thomas P.D. PANTHER version 11: expanded annotation data from Gene Ontology and Reactome pathways, and data analysis tool enhancements // Nucl. Acids Res. 2017. Vol. 45, D1. P. D183-D189.
13.          Mingozzi F., High K.A. Therapeutic in vivo gene transfer for genetic disease using AAV:progress and challenges // Nat. Rev. Genet. 2011.Vol. 12, N 5. P. 341-355.
14.          Ohtsuka M., Takano H., Zou Y., Toko H., Akazawa H., Qin Y., Suzuki M., Hasegawa H., Nakaya H., Komuro I. Cytokine therapy prevents left ventricular remodeling and dysfunction after myocardial infarction through neovascularization // FASEB J. 2004.Vol. 18, N 7. P. 851-853.
15.          Orlic D., Kajstura J., Chimenti S., Limana F., Jakoniuk I., Quaini F., Nadal-Ginard B., Bodine D.M., Leri A., Anversa P. Mobilized bone marrow cells repair the infarcted heart, improving function and survival // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2001. Vol. 98, N 18. P. 10 344-10 349.
16.          Phinney D.G., Pittenger M.F. Concise review: MSC-derived exosomes for cell-free therapy // Stem Cells. 2017. Vol. 35, N 4. P. 851-858.
17.          Xiang F.L., Lu X., Hammoud L., Zhu P., Chidiac P., Robbins J., Feng Q. Cardiomyocyte-specific overexpression of human stem cell factor improves cardiac function and survival after myocardial infarction in mice // Circulation. 2009. Vol. 120, N 12. P. 1065-1074.
18.          Yang Y., Ye Y., Su X., He J., Bai W., He X. MSCs-Derived exosomes and neuroinflammation, neurogenesis and therapy of traumatic brain injury // Front. Cell Neurosci. 2017. Vol. 11. P. 55. doi: 10.3389/fncel.2017.00055.
19.          Yaniz-Galende E., Chen J., Chemaly E., Liang L., Hulot J.S., McCollum L., Arias T., Fuster V., Zsebo K.M., Hajjar R.J. Stem cell factor gene transfer promotes cardiac repair after myocardial infarction via in situ recruitment and expansion of c-kit+ cells// Circ. Res. 2012. Vol. 111, N 11. P. 1434-1445.
20.          Yu B., Kim H.W., Gong M., Wang J., Millard R.W., Wang Y., Ashraf M., Xu M. Exosomes secreted from GATA-4 overexpressing mesenchymal stem cells serve as a reservoir of antiapoptotic microRNAs for cardioprotection // Int. J. Cardiol. 2015. Vol. 182. P. 349-360.
21.          Zubkova E.S., Beloglazova I.B., Makarevich P.I., Boldyreva M.A., Sukhareva O.Y., Shestakova M.V., Dergilev K.V., Parfyonova Y.V., Menshikov M.Y. Regulation of adipose tissue stem cells angiogenic potential by tumor necrosis factor-alpha // J. Cell. Biochem
. 2016. Vol. 117, N 1. P. 180-196.

сравнительный анализ секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток пупочного канатика и костного мозга человека
Ю.А.Романов*,***, Н.Е.Волгина**, В.В.Вторушина**, А.Ю.Романов**, Т.Н.Дугина***, Н.В.Кабаева*, Г.Т.Сухих** – 220
*ФГБУ НМИЦ кардиологии Минздрава России, Москва; **ФГБУ НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава России, Москва; ***ООО “КриоЦентр”, Москва, РФ
          С помощью мультиплексного анализа был проведен сравнительный анализ продукции цитокинов и факторов роста культивируемыми мезенхимальными стромальными клетками ткани пупочного канатика и костного мозга человека. В подавляющем числе случаев концентрация биологически активных факторов в кондиционированной среде стромальных клеток ткани пупочного канатика в десятки-сотни раз превосходила аналогичный показатель для клеток костного мозга. Полученные данные дают основания полагать, что при прочих равных условиях как сами стромальные клетки ткани пупочного канатика, так и бесклеточные продукты на их основе могут обладать более выраженным терапевтическим эффектом по сравнению с мезенхимальными стромальными клетками, получаемыми из “взрослых” источников.
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, пупочный канатик, костный мозг, секретом.
Адрес для корреспонденции: romanov@cryocenter.ru. Романов Ю.А.
Литература
1.            Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Оптимизированный протокол выделения мультипотентных мезенхимных стромальных клеток пупочного канатика человека // Клет. технол. в биол. и мед. 2015. № 3. С. 174-180.
2.            Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Сыворотка пуповинной крови человека: эффективная замена эмбриональной телячьей сыворотки для культивирования мультипотентных мезенхимных стромальных клеток человека // Клет. технол. в биол. и мед. 2016. № 4. С. 215-220.
3.            Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Выделение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток после криогенного хранения ткани пупочного канатика человека // Клет. технол. в биол. и мед. 2015. № 4. С. 218-223.
4.            Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Экспрессия поверхностных молекул мезенхимальными стромальными клетками человека при сокультивировании с ядросодержащими клетками пуповинной крови // Клет. технол. в биол. и мед. 2016. № 4. С. 270-274.
5.            Романов Ю.А., Волгина Н.Е., Балашова Е.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Сокультивирование с мезенхимальными стромальными клетками пупочного канатика человека поддерживает жизнеспособность кроветворных стволовых клеток пуповинной крови, но не “стволовость” их потомков // Клет. технол. в биол. и мед. 2017. № 2. С. 71-76.
6.            Романов Ю.А., Волгина Н.Е., Дугина Т.Н., Кабаева Н.В., Сухих Г.Т. Экспрессия поверхностных маркеров микровезикулами мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток пупочного канатика человека соответствует фенотипу родительских клеток // Клет. технол. в биол. и мед. 2018. № 3. С. 146-151.
7.            Романов Ю.А., Романов А.Ю. Ткани перинатального происхождения — уникальный источник клеток для регенеративной медицины. Часть I. Пуповинная кровь // Неонатология: новости, мнения, обучение. 2018. Т. 6, № 2. С. 64-77.
8.            Abbasi-Malati Z., Roushandeh A.M., Kuwahara Y., Roudkenar M.H. Mesenchymal stem cells on horizon: a new arsenal of therapeutic agents // Stem Cell Rev. 2018. Vol. 14, N 4. P. 484-499.
9.            Arutyunyan I., Elchaninov A., Fatkhudinov T., Makarov A., Kananykhina E., Usman N., Bolshakova G., Glinkina V., Goldshtein D., Sukhikh G. Elimination of allogeneic multipotent stromal cells by host macrophages in different models of regeneration // Int. J. Clin. Exp. Pathol. 2015. Vol. 8, N 5. P. 4469-4480.
10.          Batsali A.K., Kastrinaki M.C., Papadaki H.A., Pontikoglou C. Mesenchymal stem cells derived from Wharton’s Jelly of the umbilical cord: biological properties and emerging clinical applications // Curr. Stem Cell Res. Ther. 2013. Vol. 8, N 2. P. 144–155.
11.          Beer L., Mildner M., Ankersmit H.J. Cell secretome based drug substances in regenerative medicine: when regulatory affairs meet basic science // Ann. Transl. Med. 2017. Vol. 5, N 7. P. 170.
12.          Campagnoli C., Roberts I.A., Kumar S., Bennett P.R., Bellantuono I., Fisk N.M. Identification of mesenchymal stem/progenitor cells in human first-trimester fetal blood, liver, and bone marrow // Blood. 2001. Vol. 98, N 8. P. 2396-2402.
13.          Can A., Celikkan F.T., Cinar O. Umbilical cord mesenchymal stromal cell transplantations: A systemic analysis of clinical trials // Cytotherapy. 2017. Vol. 19, N 12. P. 1351-1382.
14.          Caplan A.I. Mesenchymal stem cells // J. Orthop. Res. 1991. Vol. 9, N 5. P. 641-650.
15.          Ding D.C., Chang Y.H., Shyu W.C., Lin S.Z. Human umbilical cord mesenchymal stem cells: a new era for stem cell therapy // Cell Transplant. 2015. Vol. 24, N 3. P. 339-347.
16.          Igura K., Zhang X., Takahashi K., Mitsuru A., Yamaguchi S., Takashi T.A. Isolation and characterization of mesenchymal progenitor cells from chorionic villi of human placenta // Cytotherapy. 2004. Vol. 6, N 6. P. 543-553.
17.          Kalaszczynska I., Ferdyn K. Wharton’s jelly derived mesenchymal stem cells: future of regenerative medicine? Recent findings and clinical significance // Biomed. Res. Int. 2015. Vol. 2015. ID 430847. doi: 10.1155/2015/430847.
18.          Keshtkar S., Azarpira N., Ghahremani M.H. Mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles: novel frontiers in regenerative medicine // Stem Cell Res. Ther. 2018. Vol. 9, N 1. P. 63.
19.          Konala V.B., Mamidi M.K., Bhonde R., Das A.K., Pochampally R., Pal R. The current landscape of the mesenchymal stromal cell secretome: a new paradigm for cell-free re­generation. Cytotherapy. 2016. Vol. 18, N 1. P. 13-24.
20.          Pawitan J.A. Prospect of stem cell conditioned medium in regenerative medicine // Biomed. Res. Int. 2014. Vol. 2014. ID 965849. doi: 10.1155/2014/965849.
21.          Romanov Y.A., Svintsitskaya V.A., Smirnov V.N. Searching for alternative sources of postnatal human mesenchymal stem cells: candidate MSC-like cells from umbilical cord // Stem Cells. 2003. Vol. 21, N 1. P. 105-110.
22.          Tsai M.S., Lee J.L., Chang Y.J., Hwang S.M. Isolation of human multipotent mesenchymal stem cells from second-trimester amniotic fluid using a novel two-stage culture protocol // Hum. Reprod. 2004. Vol. 19, N 6. P. 1450-1456.
23.          Zvaifler N.J., Marinova-Mutafchieva L., Adams G., Edwards C.J., Moss J., Burger J.A., Maini R.N. Mesenchymal precursor cells in the blood of normal individuals // Arthritis Res. 2000. Vol
. 2, N 6. P. 477-488.

Участие актиновых филаментов в реализации цитотоксического действия GD2-специфичных антител
И.И.Доронин*,**, И.В.Холоденко***, А.А.Зубарева*, К.Н.Ярыгин***, С.М.Деев*, Р.В.Холоденко* – 226
*ФГБУН Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; **ООО “Реал Таргет”, Москва, РФ; ***ФГБНУ Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича, Москва, РФ
          Индукция прямой клеточной гибели является одним из механизмов противоопухолевого действия GD2-специфичных антител, используемых для терапии нейробластомы высокого риска. Механизмы проведения цитоток­сического сигнала, запускаемого связыванием антител с ганглиозидом GD2 на поверхности опухолевой клетки, изучены недостаточно. С использованием ингибиторного анализа показано, что в проведении индуцированного GD2-специфичными антителами сигнала клеточной гибели участвуют актиновые микрофиламенты. В GD2-позитивных опухолевых линиях выявлен сильный антагонистический эффект цитохалазина Д на цитотоксическое действие GD2-специфичных антител, выражающийся по крайней мере в 20% увеличении выживаемости клеток и значительном снижении доли клеток с фрагментированной ДНК.
Ключевые слова: ганглиозид GD2, GD2-специфичные антитела, опухолеассоциированные ганглиозиды, клеточная гибель, актиновые микрофиламенты
Адрес для корреспонденции: khol@mail.ru. Холоденко Р.В.
Литература
1.            Вишнякова П.А., Доронин И.И., Холоденко И.В., Рязанцев Д.Ю., Молотковская И.М., Холоденко Р.В. Активность каспаз в клеточной гибели, индуцированной GD2-специфичными антителами // Биоорган. химия. 2014. Т. 40, № 3. С. 305-314.
2.            Деев С.М., Лебеденко Е.Н., Петровская Л.Е., Долгих Д.А., Габибов А.Г., Кирпичников М.П. Неприродные антитела и иммуноконъюгаты с заданными свойствами: оптимизация функций через направленное изменение структуры // Успехи химии. 2015. Т. 84, № 1. С. 1-26.
3.            Зубарева А.А., Бойко А.А., Холоденко И.В., Розов Ф.Н., Ларина М.В., Алиев Т.К., Доронин И.И., Вишнякова П.А., Молотковская И.М., Холоденко Р.В. Хитозановые наночастицы, направленные на опухолеассоциированный ганглиозид GD2 // Биоорган. химия. 2016. Т. 42, № 5. С. 588-602.
4.            Холоденко И.В., Буздин А.А., Холоденко Р.В., Байбикова Ю.А., Сорокин В.Ф., Ярыгин В.Н., Свердлов Е.Д. Сокультивирование клеток-предшественников сетчатки (КПС) мыши с культурой клеток пигментного эпителия влияет на особенности дифференцировки КПС // Биохимия.
2006. Т. 71, № 7. С. 945-953.
5.            Doronin I.I., Vishnyakova P.A., Kholodenko I.V., Ponomarev E.D., Ryazantsev D.Y., Molotkovskaya I.M., Kholodenko R.V. Ganglioside GD2 in reception and transduction of cell death signal in tumor cells // BMC Cancer. 2014. Vol. 14. P. 295. doi: 10.1186/1471-2407-14-295.
6.            Faraj S., Bahri M., Fougeray S., El Roz A., Fleurence J., Véziers J., Leclair M.D., Thébaud E., Paris F., Birklé S. Neuroblastoma chemotherapy can be augmented by immunotargeting O-acetyl-GD2 tumor-associated ganglioside // Oncoimmunology. 2017. Vol. 7, N 1. P. e1373232. doi: 10.1080/2162402X.2017.1373232.
7.            García-Ruiz C., Colell A., Marí M., Morales A., Calvo M., Enrich C., Fernández-Checa J.C. Defective TNF-alpha-mediated hepatocellular apoptosis and liver damage in acidic sphingomyelinase knockout mice // J. Clin. Invest. 2003. Vol. 111, N 2. P. 197-208.
8.            Giammarioli A.M., Garofalo T., Sorice M., Misasi R., Gambardella L., Gradini R., Fais S., Pavan A., Malorni W. GD3 glycosphingolipid contributes to Fas-mediated apoptosis via association with ezrin cytoskeletal protein // FEBS Lett. 2001. Vol. 506, N 1. P. 45-50.
9.            Horwacik I., Rokita H. Targeting of tumor-associated gangliosides with antibodies affects signaling pathways and leads to cell death including apoptosis // Apoptosis. 2015. Vol. 20, N 5. P. 679-688.
10.          Kholodenko R., Kholodenko I., Sorokin V., Tolmazova A., Sazonova O., Buzdin A. Anti-apoptotic effect of retinoic acid on retinal progenitor cells mediated by a protein kinase A-dependent mechanism // Cell Res. 2007. Vol. 17, N 2. P. 151‑162.
11.          Merrill A.H.Jr. Sphingolipid and glycosphingolipid metabo­lic pathways in the era of sphingolipidomics // Chem. Rev. 2011. Vol. 111, N 10. P. 6387-6422.
12.          Mora J. Dinutuximab for the treatment of pediatric patients with high-risk neuroblastoma // Expert Rev. Clin.
Pharmacol. 2016. Vol. 9, N 5. P. 647-653.

Комбинация мезенхимных стромальных клеток и стволовых клеток сердца в составе многослойной клеточной конструкции способствует активации сигнального пути Notch и инициации эндотелиальной дифференцировки
Е.К.Шевченко, К.В.Дергилев, З.И.Цоколаева, И.Б.Белоглазова, Ю.Д.Молокотина, Е.В.Парфенова, М.Ю.Меньшиков – 233
ФГБУ НМИЦ кардиологии Минздрава России, Москва
          Показана возможность получения комбинированных тканеинженерных конструкций из пластов стволовых клеток сердца и мезенхимных стромальных клеток жировой ткани крысы. Межклеточные взаимодействия в комбинированном клеточном пласте приводят к увеличению пролиферативной активности стволовых клеток сердца, экспрессии в клетках маркера эндотелиальной дифференцировки ETS1, а также активации сигнального пути Notch. Полученные результаты дают новые сведения о возможных механизмах стимуляции эндогенных регенеративных процессов при повреждении миокарда, а также раскрывают потенциал клеточной кардиомиопластики за счет использования таких комбинированных конструкций.
Ключевые слова: мезенхимные стромальные клетки, стволовые клетки сердца, инфаркт миокарда, Notch, клеточные пласты
Адрес для корреспонденции: dr.eshevchenko@gmail.com. Шевченко Е.К.
Литература
1.            Beltrami A.P., Barlucchi L., Torella D., Baker M., Limana F., Chimenti S., Kasahara H., Rota M., Musso E., Urbanek K., Leri A., Kajstura J., Nadal-Ginard B., Anversa P. Adult cardiac stem cells are multipotent and support myocardial regeneration // Cell. 2003. Vol. 114, N 6. P. 763-776.
2.            Bolli R., Hare J.M., March K.L., Pepine C.J., Willerson J.T., Perin E.C., Yang P.C., Henry T.D., Traverse J.H., Mitrani R.D., Khan A., Hernandez-Schulman I., Taylor D.A., DiFede D.L., Lima J.A.C., Chugh A., Loughran J., Vojvodic R.W., Sayre S.L., Bettencourt J., Cohen M., Moyé L., Ebert R.F., Simari R.D.; Cardiovascular Cell Therapy Research Network (CCTRN). Rationale and design of the CONCERT-HF Trial (Combination of Mesenchymal and c-kit+ Cardiac Stem Cells As Regenerative Therapy for Heart Failure) // Circ. Res. 2018. Vol. 122, N 12. P. 1703-1715.
3.            Chugh A.R., Beache G.M., Loughran J.H., Mewton N., Elmore J.B., Kajstura J., Pappas P., Tatooles A., Stoddard M.F., Lima J.A., Slaughter M.S., Anversa P., Bolli R. Administration of cardiac stem cells in patients with ischemic cardiomyopathy: the SCIPIO trial: surgical aspects and interim analysis of myocardial function and viability by magnetic resonance // Circulation. 2012. Vol. 126, N 11, Suppl 1. P. S54-S64.
4.            Dergilev K., Tsokolaeva Z., Boldyreva M., Beloglazova I., Zubkova E., Parfyonova E. Notch activation enchances vascular lineage commitment of cardiac stem cells // Mol. Ther. 2016. Vol. 24, N S1. P. S177-S178.
5.            Guruharsha K.G., Kankel M.W., Artavanis-Tsakonas S. The Notch signalling system: recent insights into the complexity of a conserved pathway // Nat. Rev. Genet. 2012. Vol. 13, N 9. P. 654-666.
6.            Kitagawa M., Hojo M., Imayoshi I., Goto M., Ando M., Ohtsuka T., Kageyama R., Miyamoto S. Hes1 and Hes5 regulate vascular remodeling and arterial specification of endothelial cells in brain vascular development // Mech. Dev. 2013. Vol. 130, N 9-10. P. 458-466.
7.            Lelièvre E., Mattot V., Huber P., Vandenbunder B., Soncin F. ETS1 lowers capillary endothelial cell density at confluence and induces the expression of VE-cadherin // Oncogene. 2000. Vol. 19, N 20. P. 2438-2446.
8.            Madigan M., Atoui R. Therapeutic use of stem cells for myocardial infarction // Bioengineering (Basel). 2018. Vol. 5, N 2. pii: E28. doi: 10.3390/bioengineering5020028.
9.            Meadows S.M., Myers C.T., Krieg P.A. Regulation of endothelial cell development by ETS transcription factors // Semin. Cell Dev. Biol. 2011. Vol. 22, N 9. P. 976-984.
10.          Oskouei B.N., Lamirault G., Joseph C., Treuer A.V., Landa S., Da Silva J., Hatzistergos K., Dauer M., Balkan W., McNiece I., Hare J.M. Increased potency of cardiac stem cells compared with bone marrow mesenchymal stem cells in cardiac repair // Stem Cells Transl. Med. 2012. Vol. 1, N 2. P. 116-124.
11.          Sawa Y., Miyagawa S. Present and future perspectives on cell sheet-based myocardial regeneration therapy // Biomed. Res. Int. 2013. Vol. 2013. ID 583912. doi: 10.1155/2013/583912.
12.          Urbanek K., Cabral-da-Silva M.C., Ide-Iwata N., Maestroni S., Delucchi F., Zheng H., Ferreira-Martins J., Ogórek B., D'Amario D., Bauer M., Zerbini G., Rota M., Hosoda T., Liao R., Anversa P., Kajstura J., Leri A. Inhibition of notch1-dependent cardiomyogenesis leads to a dilated myopathy in the neonatal heart // Circ. Res. 2010. Vol. 107, N 3. P. 429-441.
13.          Valter M.M., Hügel A., Huang H.J., Cavenee W.K., Wiestler O.D., Pietsch T., Wernert N. Expression of the Ets-1 transcription factor in human astrocytomas is associated with Fms-like tyrosine kinase-1 (Flt-1)/vascular endothelial growth factor receptor-1 synthesis and neoangiogenesis // Cancer Res. 1999. Vol
. 59, N 21. P. 5608-5614.

Влияние различных режимов котрансплантации мезенхимных и гемопоэтических стволовых клеток на темпы восстановления кроветворения у мышей после воздействия циклофосфана в сублетальных дозах
В.В.Павлов, Л.Н.Павлова, О.Ф.Чибисова, В.Л.Иванов, Е.И.Селиванова, А.Г.Коноплянников, Л.П.Жаворонков – 239
Медицинский радиологический научный центр им. А.Ф.Цыба — филиал ФГБУ НМИЦ радиологии Минздрава России, Обнинск
          В опытах на 468 линейных мышах изучали влияние котрансплантации мезенхимных стволовых клеток и стволовых кроветворных клеток при разных схемах их введения (последовательность и длительность интервалов в пределах 0-48 ч) на скорость восстановления костномозгового кроветворения при цитостатической аплазии, вызванной однократным введением циклофосфана в дозе 500 мг/кг. Об эффективности применения стволовых клеток судили по общему состоянию и выживаемости животных, динамике массы тела, показателям периферической крови (лейкоциты, тромбоциты, ретикулоциты), общей клеточности костного мозга и содержанию в нем стволовых кроветворных клеток на 9-е сутки после введения циклофосфана. Определение доли стволовых кроветворных клеток от общего числа миелокариоцитов осуществляли методом проточной цитофлюориметрии, используя специфические моноклональные антитела к CD117 и CD184. Показано стимулирующее влияние котрансплантации мезенхимных стволовых и стволовых кроветворных клеток на кроветворение по показателям общей клеточности и доли стволовых кроветворных клеток с антигеном CD117. Режимы с алгоритмом введения мезенхимных стволовых, затем стволовых кроветворных клеток с интервалами 24 и 48 ч были более эффективны.
Ключевые слова: мыши, циклофосфан, котрансплантация, мезенхимные стволовые клетки, стволовые кроветворные клетки
Адрес для корреспонденции: pavlova.ln@inbox.ru. Павлова Л.Н.
Литература
1.            Севанькаева Л.Е., Южаков В.В., Коноплянников А.Г., Романко Ю.С., Бандурко Л.Н., Фомина Н.К., Ингель И.Э., Коноплянников М.А., Яковлева Н.Д., Цыганова М.Г. Радиосенсибилизирующее действие мезенхимальных стволовых клеток человека при локальном воздействии G-излучения на саркому М-1 крыс // Радиация и риск. 2017. Т. 26, № 3. С. 100-115.
2.            An N., Cen B., Cai H., Song J.H., Kraft A., Kang Y. Pim1 kinase regulates c-Kit gene translation // Exp. Hematol. Oncol. 2016. Vol. 5. P. 31. doi: 10.1186/s40164-016-0060-3.
3.            Angelopoulou M., Novelli E., Grove J.E., Rinder H.M., Civin C., Cheng L., Krause D.S. Cotransplantation of human mesenchymal stem cells enhances human myelopoiesis and megakaryocytopoiesis in NOD/SCID mice // Exp. Hematol. 2003. Vol. 31, N 5. P. 413-420.
4.            Caplan A.I. Mesenchymal stem cells // J. Orthop. Res. 1991. Vol. 9, N 5. P. 641-650.
5.            Chapel A., Bertho J.M., Bensidhoum M., Fouillard L., Young R.G., Frick J., Demarquay C., Cuvelier F., Mathieu E., Trompier F., Dudoignon N., Germain C., Mazurier C., Aigueperse J., Borneman J., Gorin N.C., Gourmelon P., Thierry D. Mesenchymal stem cells home to injured tissues when co-infused with hematopoietic cells to treat a radiation-induced multi-organ failure syndrome // J. Gene Med. 2003. Vol. 5, N 12. P. 1028‑1038.
6.            Cheng L., Qasba P., Vanguri P., Thiede M.A. Human mesenchymal stem cells support megakaryocyte and pro-platelet formation from CD34(+) hematopoietic progenitor cells // J. Cell. Physiol. 2000. Vol. 184, N 1. P. 58-69.
7.            Ferrari G., Cusella-De Angelis G., Coletta M., Paolucci E., Stornaiuolo A., Cossu G., Mavilio F. Muscle regeneration by bone marrow-derived myogenic progenitors // Science. 1998. Vol. 279. P. 1528-1530.
8.            Koç O.N., Gerson S.L., Cooper B.W., Dyhouse S.M., Haynesworth S.E., Caplan A.I., Lazarus H.M. Rapid hema­topoietic recovery after coinfusion of autologous-blood stem cells and cultureexpanded marrow mesenchymal stem cells in advanced breast cancer patients receiving high-dose chemotherapy // J. Clin. Oncol. 2000. Vol. 18, N 2. P. 307‑316.
9.            Lazarus H.M., Koc O.N., Devine S.M., Curtin P., Maziarz R.T., Holland H.K., Shpall E.J., McCarthy P., Atkinson K., Cooper B.W., Gerson S.L., Laughlin M.J., Loberiza F.R.Jr, Moseley A.B., Bacigalupo A. Cotransplantation of HLA-identical sibling cultureexpanded mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells in hematologic malignancy patients // Biol Blood Marrow Transplant. 2005. Vol. 11, N 5. P. 389-398.
10.          Lazarus H.M., Haynesworth S.E., Gerson S.L., Rosenthal N.S., Caplan A.I. Ex vivo expansion and subsequent infusion of human bone marrow-derived stromal progenitor cells (mesenchymal progenitor cells): implications for therapeutic use // Bone Marrow Transplant. 1995. Vol. 16, N 4. P. 557-564.
11.          Le Blanc K., Samuelsson H., Gustafsson B., Remberger M., Sundberg B., Arvidson J., Ljungman P., Lönnies H., Nava S., Ringdén O. Transplantation of mesenchymal stem cells to enhance engraftment of hematopoietic stem cells // Leukemia. 2007. Vol. 21, N 8. P. 1733-1738.
12.          Peled A., Petit I., Kollet O., Magid M., Ponomaryov T., Byk T., Nagler A., Ben-Hur H., Many A., Shultz L., Lider O., Alon R., Zipori D., Lapidot T. Dependence of human stem cell engraftment and repopulation of NOD/SCID mice on CXCR4 // Science. 1999. Vol. 283. P. 845-848.
13.          Reya T. Regulation of hematopoietic stem sell self-reneval // Recent Prog. Horm. Res. 2003. Vol. 58. P. 283-295.
14.          Tsyb A.F., Yuzhakov V.V., Roshal' L.M., Sukhikh G.T., Konoplyannikov A.G., Sushkevich G.N., Yakovleva N.D., Ingel' I.E., Bandurko L.N., Sevan'kaeva L.E., Mikhina L.N., Fomina N.K., Marei M.V., Semenova Zh.B., Konoplyannikova O.A., Kal'sina S.Sh., Lepekhina L.A., Semenkova I.V., Agaeva E.V., Shevchuk A.S., Pavlova L.N., Tokarev O.Y., Karaseva O.V., Chernyshova T.A. Morphofunctional study of the therapeutic efficacy of human mesenchimal and neural stem sells in rats with diffuse brain injury // Bull. Exp. Biol. Med. 2009. Vol. 147, N 1. P. 132-146.
15.          Wright D.E., Bowman E.P., Wagers A.J., Butcher E.C., Weissman I.L. Hematopoietic stem cells are uniquely selective in their migratory response to chemokines // J. Exp. Med. 2002. Vol. 195, N 9. P. 1145-1151.

Сравнительный анализ эффектов внутривенного введения мезенхимных стромальных клеток плаценты и нейральных прогениторных клеток, полученных из индуцированных плюрипотентных клеток, на течение острого ишемического инсульта у крыс
Э.А.Черкашова, В.В.Бурунова*, Т.Б.Бухарова**, Д.Д.Наместникова, И.Л.Губский, Д.И.Салихова**, Е.В.Галицына**, Г.Е.Леонов**, В.П.Чехонин, Л.В.Губский, С.Л.Киселёв**,***, Д.В.Гольдштейн**, К.Н.Ярыгин* – 244
ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава России, Москва; *ФГБНУ Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича, Москва, РФ; **ФГБНУ Медико-генетический научный центр, Москва, РФ; ***ФГБУН Институт общей генетики им. Н.И.Вавилова РАН, Москва, РФ
          Проводили сравнительное исследование внутривенного введения мезенхимных стромальных клеток плаценты человека и нейральных прогениторных клеток, полученных из линии индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека. Клетки вводили внутривенно через 24 ч после транзиторной окклюзии средней мозговой артерии и оценивали их терапевтическую эффективность, отслеживая динамику выживаемости, массы тела, неврологического дефицита и объема очага инфаркта мозга через 7, 14, 30 и 60 сут после операции. Нейральные прогениторные клетки, введенные внутривенно, оказывают терапевтическое воздействие на течение экспериментального ишемического инсульта, достоверно повышая выживаемость животных в острейшем периоде и ускоряя компенсацию неврологического дефицита и восстановление массы тела. Нейральные прогениторные клетки были эффективнее мезенхимных стромальных клеток плаценты человека. Эффективность внутривенной трансплантации нейральных прогениторных клеток в модели окклюзии средней мозговой артерии показана нами впервые, хотя лечебное действие их прямой трансплантации в ткань мозга уже было описано.
Ключевые слова: нейральные прогениторные клетки, индуцированные плюрипотентные клетки, клеточная терапия, ишемический инсульт, модель окклюзии средней мозговой артерии
Адрес для корреспонденции: dadnam89@gmail.com. Наместникова Д.Д.
Литература
1.            Boltze J., Kowalski I., Geiger K., Reich D., Gunther A., Buhrle C., Egger D., Kamprad M., Emmrich F. Experimental treatment of stroke in spontaneously hypertensive rats by CD34+ and CD34— cord blood cells // Ger. Med. Sci. 2005. Vol. 3. Doc09.
2.            Chang D.J., Lee N., Park I.H., Choi C., Jeon I., Kwon J., Oh S.H., Shin D.A., Do J.T., Lee D.R., Lee H., Moon H., Hong K.S., Daley G.Q., Song J. Therapeutic potential of human induced pluripotent stem cells in experimental stroke // Cell Transplant. 2013. Vol. 22, N 8. P. 1427-1440.
3.            Gubskiy I.L., Namestnikova D.D., Cherkashova E.A., Chekhonin V.P., Baklaushev V.P., Gubsky L.V., Yarygin K.N. MRI Guiding of the Middle Cerebral Artery Occlusion in Rats Aimed to Improve Stroke Modeling // Transl. Stroke Res. 2018. Vol. 9, N 4. P. 417-425.
4.            Kholodenko I.V., Yarygin K.N., Gubsky L.V., Konieva A.A., Tairova R.T., Povarova O.V., Kholodenko R.V., Burunova V.V., Yarygin V.N., Skvortsova V.I. Intravenous xenotransplantation of human placental mesenchymal stem cells to rats: comparative analysis of homing in rat brain in two models of experimental ischemic stroke // Bull. Exp. Biol. Med. 2012. Vol. 154, N 1. P. 118-123.
5.            Koizumi J., Yoshida Y., Nakazawa T., Ooneda G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area // Nosotchu. 1986. Vol. 8, N 1. P. 1-8.
6.            Liu J. Induced pluripotent stem cell-derived neural stem cells: new hope for stroke? // Stem Cell Res. Ther. 2013. Vol. 4, N 5. P. 115.
7.            Liu X., Ye R., Yan T., Yu S.P., Wei L., Xu G., Fan X., Jiang Y., Stetler R.A., Liu G., Chen J. Cell based therapies for ischemic stroke: from basic science to bedside // Prog. Neurobiol. 2014. Vol. 115. P. 92-115.
8.            Longa E.Z., Weinstein P.R., Carlson S., Cummins R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats // Stroke. 1989. Vol. 20, N 1. P. 84-91.
9.            Nekrasov E.D., Vigont V.A., Klyushnikov S.A., Lebedeva O.S., Vassina E.M., Bogomazova A.N., Chestkov I.V., Semashko T.A., Kiseleva E., Suldina L.A., Bobrovsky P.A., Zimina O.A., Ryazantseva M.A., Skopin A.Y., Illarioshkin S.N., Kaznacheyeva E.V., Lagarkova M.A., Kiselev S.L. Manifestation of Huntington’s disease pathology in human induced pluripotent stem cell-derived neurons // Mol. Neurodegener. 2016. Vol. 11. P. 27. doi: 10.1186/s13024-016-0092-5.
10.          Oki K., Tatarishvili J., Wood J., Koch P., Wattananit S., Mine Y., Monni E., Tornero D., Ahlenius H., Ladewig J., Brüstle O., Lindvall O., Kokaia Z. Human-induced pluripotent stem cells form functional neurons and improve recovery after grafting in stroke-damaged brain // Stem Cells. 2012. Vol. 30, N 6. P. 1120-1133.
11.          Polentes J., Jendelova P., Cailleret M., Braun H., Romanyuk N., Tropel P., Brenot M., Itier V., Seminatore C., Baldauf K., Turnovcova K., Jirak D., Teletin M., Côme J., Tournois J., Reymann K., Sykova E., Viville S., Onteniente B. Human induced pluripotent stem cells improve stroke outcome and reduce secondary degeneration in the recipient brain // Cell Transplant. 2012. Vol. 21, N 12. P. 2587-2602.
12.          Sinden J.D., Hicks C., Stroemer P., Vishnubhatla I., Corteling R. Human neural stem cell therapy for chronic ischemic stroke: charting progress from laboratory to patients // Stem Cells Dev. 2017. Vol. 26, N 13. P. 933-947.
13.          Suzdal'tseva Y.G., Burunova V.V., Petrakova N.V., Vakhrushev I.V., Yarygin K.N., Yarygin V.N. Comparatine analysis of cytophenotypes of cells of mesenchymal lineage isolated from human tissues // Bull. Exp. Biol. Med. 2007. Vol. 143, N 1. P. 147-154.
14.          Suzdal'tseva Y.G., Burunova V.V., Vakhrushev I.V., Yarygin V.N., Yarygin K.N. Capability of human mesenchymal cells isolated from different sources to differentiation into tissues of mesodermal origin // Bull. Exp. Biol. Med. 2007. Vol. 143, N 1. P. 114-121.
15.          von Kummer R., Broderick J.P., Campbell B.C., Demchuk A., Goyal M., Hill M.D., Treurniet K.M., Majoie C.B., Marquering H.A., Mazya M.V., San Román L., Saver J.L., Strbian D., Whiteley W., Hacke W. The Heidelberg bleeding classification: classification of bleeding events after ischemic stroke and reperfusion therapy // Stroke. 2015. Vol. 46, N 10. P. 2981-2986.
16.          Yarygin K.N., Kholodenko I.V., Konieva A.A., Burunova V.V., Tairova R.T., Gubsky L.V., Cheglakov I.B., Pirogov Y.A., Yarygin V.N., Skvortsova V.I. Mechanisms of positive effects of transplantation of human placental mesenchymal stem cells on recovery of rats after experimental ischemic stroke // Bull. Exp. Biol. Med. 2009. Vol. 148, N 6. P. 862-868.
17.          Yuan T., Liao W., Feng N.H., Lou Y.L., Niu X., Zhang A.J., Wang Y., Deng Z.F. Human induced pluripotent stem cell-derived neural stem cells survive, migrate, differentiate, and improve neurologic function in a rat model of middle cerebral artery occlusion // Stem Cell Res. Ther
. 2013. Vol. 4, N 3. P. 73. doi: 10.1186/scrt224.

Цитотоксическая активность NK-клеток периферической крови в отношении клеток трофобласта при беременности
В.А.Михайлова, Д.О.Баженов, Л.П.Вязьмина, А.О.Агнаева, О.Н.Беспалова, С.А.Сельков, Д.И.Соколов – 254
ФГБНУ Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О.Отта, Санкт-Петербург, РФ
          Оценивали цитотоксическую активность NK-клеток периферической крови в отношении клеток трофобласта. NK-клетки вызывали гибель клеток трофобласта как в составе мононуклеаров, так и изолированно от мононуклеарной фракции. У женщин с физиологической беременностью цитотоксический эффект NK-клеток в составе мононуклеаров, преинкубированных с IL-2, был ниже, чем у небеременных женщин без беременности в анамнезе и фертильных женщин. Цитотоксическая активность изолированных NK-клеток, преинкубированных с IL-2, в отношении клеток трофобласта была снижена у фертильных женщин по сравнению c небеременными женщинами без беременности в анамнезе.
Ключевые слова: NK-клетки, цитотоксическая активность, трофобласт, JEG-3
Адрес для корреспонденции: mva_spb@mail.ru. Михайлова В.А.
Литература
1.            Михайлова В.А., Белякова К.Л., Сельков С.А., Соколов Д.И. Особенности дифференцировки NK-клеток: CD56dim и CD56bright NK-клетки во время и вне беременности // Мед. иммунол. 2017. Т. 19, № 1. С. 19-26.
2.            Михайлова В.А., Овчинникова О.М., Онохина Я.С., Чугунова А.А., Зайнулина М.С., Сельков С.А., Соколов Д.И. Функциональная активность NK-клеток периферической крови при гестозе // Иммунология. 2014. Т. 35, № 1. С. 4‑8.
3.            Соколов Д.И., Степанова О.И., Сельков С.А. Роль различных субпопуляций CD4+Т-лимфоцитов при бере­менности // Мед. иммунол.
2016. Т. 18, № 6. С. 521-536.
4.            Agarwal R., Loganath A., Roy A.C., Wong Y.C., Ng S.C. Expression profiles of interleukin-15 in early and late gestational human placenta and in pre-eclamptic placenta // Mol. Hum. Reprod. 2001. Vol. 7, N 1. P. 97-101.
5.            Alter G., Malenfant J.M., Altfeld M. CD107a as a functional marker for the identification of natural killer cell activity // J. Immunol. Methods. 2004. Vol. 294, N 1-2. P. 15-22.
6.            Carrega P., Ferlazzo G. Natural killer cell distribution and trafficking in human tissues // Front. Immunol. 2012. Vol. 3. P. 347. doi: 10.3389/fimmu.2012.00347.
7.            Co E.C., Gormley M., Kapidzic M., Rosen D.B., Scott M.A., Stolp H.A., McMaster M., Lanier L.L., Bárcena A., Fisher S.J. Maternal decidual macrophages inhibit NK cell killing of invasive cytotrophoblasts during human pregnancy // Biol. Reprod. 2013. Vol. 88, N 6. P. 155. doi: 10.1095/biolreprod. 112.099465.
8.            Cooper M.A., Fehniger T.A., Turner S.C., Chen K.S., Ghaheri B.A., Ghayur T., Carson W.E., Caligiuri M.A. Human natural killer cells: a unique innate immunoregulatory role for the CD56(bright) subset // Blood. 2001. Vol. 97, N 10. P. 3146‑3151.
9.            Fehniger T.A., Caligiuri M.A. Interleukin 15: biology and relevance to human disease // Blood. 2001. Vol. 97, N 1. P. 14‑32.
10.          Fu Q., Sun Y., Tao Y., Piao H., Wang X., Luan X., Du M., Li D. Involvement of the JAK-STAT pathway in collagen regulation of decidual NK cells // Am. J. Reprod. Immunol. 2017. Vol. 78, N 6. doi: 10.1111/aji.12769.
11.          Gomez-Lopez N., Guilbert L.J., Olson D.M. Invasion of the leukocytes into the fetal-maternal interface during pregnancy // J. Leukoc. Biol. 2010. Vol. 88, N 4. 625-633.
12.          Hunt J.S., Petroff M.G., McIntire R.H., Ober C. HLA-G and immune tolerance in pregnancy // FASEB J. 2005. Vol. 19, N 7. P. 681-693.
13.          Kim T.J., Kim M., Kim H.M., Lim S.A., Kim E.O., Kim K., Song K.H., Kim J., Kumar V., Yee C., Doh J., Lee K.M. Homotypic NK cell-to-cell communication controls cytokine responsiveness of innate immune NK cells // Sci. Rep. 2014. Vol. 4. ID 7157. doi: 10.1038/srep07157.
14.          Konjevič G., Mirjacić Martinović K., Vuletić A., Radenković S. Novel aspects of in vitro IL-2 or IFN-
a enhanced NK cytotoxicity of healthy individuals based on NKG2D and CD161 NK cell receptor induction // Biomed. Pharmacother. 2010. Vol. 64, N 10. P. 663-671.
15.          Kopcow H.D., Karumanchi S.A. Angiogenic factors and natural killer (NK) cells in the pathogenesis of preeclampsia // J. Reprod. Immunol. 2007. Vol. 76, N 1-2. P. 23-29.
16.          Langhans B., Ahrendt M., Nattermann J., Sauerbruch T., Spengler U. Comparative study of NK cell-mediated cytotoxicity using radioactive and flow cytometric cytotoxicity assays // J. Immunol. Methods. 2005. Vol. 306, N 1-2. P. 161-168.
17.          Marie J.C., Letterio J.J., Gavin M., Rudensky A.Y. TGF-beta1 maintains suppressor function and Foxp3 expression in CD4+CD25+ regulatory T cells // J. Exp. Med. 2005. Vol. 201, N 7. P. 1061-1067.
18.          Parish C.R., Glidden M.H., Quah B.J., Warren H.S. Use of the intracellular fluorescent dye CFSE to monitor lymphocyte migration and proliferation // Curr
ю Protocю Immunol. 2009. Chapter 4:Unit4.9. doi: 10.1002/0471142735.im0409s84.
19.          Park D.W., Lee H.J., Park C.W., Hong S.R., Kwak-Kim J., Yang K.M. Peripheral blood NK cells reflect changes in decidual NK cells in women with recurrent miscarriages // Am. J. Reprod. Immunol. 2010. Vol. 63, N 2. P. 173-180.
20.          Park S.Y., Yun S., Ryu B.J., Han A.R., Lee S.K. Trophoblasts regulate natural killer cells via control of interleukin-15 receptor signaling // Am. J. Reprod. Immunol. 2017. Vol. 78, N 2. doi: 10.1111/aji.12628.
21.          Peterson R.A. Regulatory T-cells: diverse phenotypes integral to immune homeostasis and suppression // Toxicol. Pathol. 2012. Vol. 40, N 2. P. 186-204.
22.          Rautela J., Huntington N.D. IL-15 signaling in NK cell cancer immunotherapy // Curr. Opin. Immunol. 2017. Vol. 44. P. 1‑6.
23.          Romee R., Schneider S.E., Leong J.W., Chase J.M., Keppel C.R., Sullivan R.P., Cooper M.A., Fehniger T.A. Cytokine activation induces human memory-like NK cells // Blood. 2012. Vol. 120, N 24. P. 4751-4760.
24.          Sierich H., Eiermann T. Comparing individual NK cell activity in vitro // Curr. Protoc. Immunol. 2013. Chapter 14:Unit 14.32.. doi: 10.1002/0471142735.im1432s100.
25.          Souza S.S., Castro F.A., Mendon
зa H.C., Palma P.V., Morais F.R., Ferriani R.A., Voltarelli J.C. Influence of menstrual cycle on NK activity // J. Reprod. Immunol. 2001. Vol. 50, N 2. P. 151-159.
26.          Tang A.W., Alfirevic Z., Quenby S. Natural killer cells and pregnancy outcomes in women with recurrent miscarriage and infertility: a systematic review // Hum. Reprod. 2011. Vol. 26, N 8. 1971-1980.
27.          Tilburgs T., Evans J.H., Crespo
В.C., Strominger J.L. The HLA-G cycle provides for both NK tolerance and immunity at the maternal-fetal interface // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2015. Vol. 112, N 43. P. 13 312-13 317.
28.          Verma S., Hiby S.E., Loke Y.W., King A. Human decidual natural killer cells express the receptor for and respond to the cytokine interleukin 15 // Biol. Reprod. 2000. Vol. 62, N 4. P. 959-968.
29.          Yu J., Freud A.G., Caligiuri M.A. Location and cellular stages of natural killer cell development // Trends Immunol. 2013. Vol. 34, N 12. P. 573-582.
30.          Zhang J., Dunk C., Croy A.B., Lye S.J. To serve and to protect: the role of decidual innate immune cells on human pregnancy // Cell Tissue Res. 2016.
Vol. 363, N 1. 249-265.

Влияние внеклеточных везикул из мультипотентных мезенхимных стромальных клеток на облученных животных
И.Б.Алчинова**,*, М.В.Полякова*, Е.Н.Яковенко*, Ю.С.Медведева*, И.Н.Сабурина*,***, М.Ю.Карганов* – 262
*ФГБНУ Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии, Москва, РФ; **Научно-исследовательский институт космической медицины ФГБУ Федерального научно-клинического центра специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий ФМБА России, Москва; ***ФГБОУ ДПО Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования Минздрава России, Москва
          Мышей линии С57Bl/6J облучали гамма-излучением в дозе 7.5 Гр. Через неделю им внутривенно вводили внеклеточные везикулы, выделенные из культуральной жидкости мультипотентных мезенхимных стромальных клеток костного мозга человека. Изменения физиологических параметров животных оценивали методами лазерной корреляционной спектроскопии, гистологического исследования, цитометрии, подсчета лейкоцитарной формулы крови. Через 3 и 6 нед исследуемые параметры опытной группы занимали промежуточное положение между интактной и облученной или значимо не отличались от параметров интактной группы. Восстановление происходило с различной скоростью и эффективностью на разных уровнях организации. Показано снижение повреждений, вызванных облучением в сублетальной дозе, на разных структурно-функциональных уровнях организма экспериментальных животных.
Ключевые слова: внеклеточные везикулы, мультипотентные мезенхимные стромальные клетки, гамма-излучение, лазерная корреляционная спектроскопия
Адрес для корреспонденции: nedzumy@bk.ru. Полякова М.В.
Литература
1.            Алчинова И.Б., Полякова М.В., Сабурина И.Н., Карганов М.Ю. Размеры внеклеточных везикул, секретируемых разными видами стволовых клеток // Патогенез. 2017. Т. 15, № 4. С. 38-42.
2.            Анохина Е.Б., Буравкова Л.Б. Гетерогенность стромальных клеток-предшественников, выделенных из костного мозга крыс // Цитология. 2007. Т. 49, № 1. С. 40-47.
3.            Вялкина М.В., Алчинова И.Б., Яковенко Е.Н., Медведева Ю.С., Сабурина И.Н., Карганов М.Ю. Долговременные эффекты стволовых клеток на облученных мышей // Биомедицина. 2017. № 4. С. 18-33.
4.            Карганов М.Ю., Алчинова И.Б., Яковенко Е.Н., Ковалева О.И., Медведева Ю.С., Вялкина М.В. Применение метода лазерной корреляционной спектроскопии в лабораторной медицине // Клин. лаб. диагност. 2016. Т. 61, № 9. С. 533-534.
5.            Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. Л., 1969.
6.            Пантелеев М.А., Абаева А.А., Нечипуренко Д.Ю., Обыденный С.И., Свешникова А.Н., Шибеко А.М. Физиология и патология внеклеточных везикул //Онкогематология. 2017. Т. 12, №. 1. С. 62-70.
7.            Темнов А.А., Астрелина Т.А., Рогов К.А., Лебедев В.Г., Насонова Т.А., Лырщикова А.В., Дешевой Ю.Б., Добрынина О.А., Мелерзанов А.В., Самойлов А.С., Бушманов А.Ю., Мороз Б.Б. Исследование влияния факторов кондиционной среды, полученной при культивировании мезенхимальных стволовых клеток костного мозга, на течение тяжелых местных лучевых поражений кожи у крыс // Мед. радиол. и радиац. безопасность.
2018. Т. 63, № 1. С. 35-39.
8.            Alchinova I., Arkhipova E., Medvedeva Yu., Cherepov A., Antipov A., Lysenko N., Noskin L., Karganov M. The complex of tests for the quantitative evaluation of the effects of radiation on laboratory animals // Am. J. Life Sci. 2015. Vol. 3, N 1-2. P. 5-12.
9.            Aliotta J.M., Sanchez-Guijo F.M., Dooner G.J., Johnson K.W., Dooner M.S., Greer K.A., Greer D., Pimentel J., Kolankiewicz L.M., Puente N., Faradyan S., Ferland P., Bearer E.L., Passero M.A., Adedi M., Colvin G.A., Quesenberry P.J. Alteration of marrow cell gene expression, protein production, and engraftment into lung by lung derived microvesicles: A novel mechanism for phenotype modulation // Stem Cells. 2007. Vol. 25, N 9. P. 2245-2256.
10.          De Toro J., Herschlik L., Waldner C., Mongini C. Emerging roles of exosomes in normal and pathological conditions: new insights for diagnosis and therapeutic applications // Front. Immunol. 2015. Vol. 6. P. 203. doi: 10.3389/fimmu. 2015.00203.
11.          Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper-Cortenbach I., Marini F., Krause D., Deans R., Keating A., Prockop Dj, Horwitz E. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement // Cytotherapy. 2006. Vol. 8, N 4. P. 315‑317.
12.          Gardiner C., Ferreira Y.J., Dragovic R.A., Redman C.W., Sargent I.L. Extracellular vesicle sizing and enumeration by nanoparticle tracking analysis // J. Extracell. Vesicles. 2013. Vol. 2. doi: 10.3402/jev.v2i0.19671.
13.          Lange C., Brunswig-Spickenheier B., Cappallo-Obermann H., Eggert K., Gehling U.M., Rudolph C., Schlegelberger B., Cornils K., Zustin J., Spiess A.N., Zander A.R. Radiation rescue: mesenchymal stromal cells protect from lethal irradiation // PLoS One. 2011. Vol. 6, N 1. P. e14486. doi: 10.1371/journal. pone.0014486.
14.          Mortazavi S.M., Shekoohi-Shooli F., Aghamir S.M., Mehrabani D., Dehghanian A., Zare S., Mosleh-Shirazi M.A. The healing effect of bone marrow-derived stem cells in acute radiation syndrome // Pak. J. Med. Sci. 2016. Vol. 32, N 3. P. 646-651.
15.          Schoefinius J.S., Brunswig-Spickenheier B., Speiseder T., Krebs S., Just U., Lange C. Mesenchymal stromal cell-derived extracellular vesicles provide long-term survival after total body irradiation without additional hematopoietic stem cell support // Stem Cells. 2017. Vol. 35, N 12. P. 2379-2389.
16.          Wen S., Dooner M., Cheng Y., Papa E., Del Tatto M., Pereira M., Deng Y., Goldberg L., Aliotta J., Chatterjee D., Stewart C., Carpanetto A., Collino F., Bruno S., Camussi G., Quesenberry P. Mesenchymal stromal cell-derived extracellular vesicles rescue radiation damage to murine marrow hematopoietic cells // Leukemia. 2016. Vol. 30, N 11. P. 2221-2231.
17.          Williams J.P., McBride W.H. After the bomb drops: a new look at radiation-induced multiple organ dysfunction syndrome (MODS) // Int. J. Radiat. Biol. 2011. Vol. 87, N 8. P. 851-868.

Влияние полиэтилентерефталата и политетрафторэтилена на функциональные свойства эндотелиальных и мезенхимных клеток
А.П.Лыков*,**, О.В.Повещенко*,**, М.А.Суровцева*,**, Н.А.Бондаренко*,**, И.И.Ким*,**, А.А.Карпенко*, Е.А.Покушалов*, А.М.Караськов* – 269
*
ФГБУ НМИЦ им. акад. Е.Н.Мешалкина Минздрава России, Новосибирск; **НИИКЭЛ — филиал ФГБНУ ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, РФ
          Исследовали влияние сосудистых протезов из политетрафторэтилена и полиэтилентерефталата на пролифера­цию, миграцию, продукцию оксида азота костномозговыми мезенхимными стволовыми и эндотелиальными прогениторными клетками человека и эндотелиальными клетками линии EA.hy926, а также заселение поверхности протезов этими клетками. Синтетические протезы оказывают неблагоприятное влияние на пролиферацию и миграцию клеток, а обработка поверхности протезов белками (фибронектином или желатиназой) усиливает заселение клетками.
Ключевые слова: политетрафторэтилен, полиэтилентерефталат, эндотелиальные клетки, мезенхимные стволовые клетки, заселение сосудистых протезов
Адрес для корреспонденции: aplykov2@mail.ru. Лыков А.П.
Литература
1.            Бокерия Л.А., Пурсанов М.Г., Соболев А.В., Вартанов П.В., Караев А.В. Анализ результатов интраоперационной шунтографии у 600 больных ишемической болезнью сердца после операции коронарного шунтирования // Груд. и серд.-сосуд. хир. 2016. Т. 58, № 3. С. 143-151.
2.            Лыков А.П., Повещенко О.В., Бондаренко Н.А., Суровцева М.А., Ким И.И. Усиление адгезии стволовых прогениторных клеток к синтетическим материалам внеклеточным матриксом // Вестн. РАМН. 2017. Т. 72, № 5. С. 336-345.
3.            Розанова И.А., Повещенко О.В., Карпенко А.А., Павлова С.В., Сергеевичев Д.С., Лыков А.П., Бондаренко Н.А., Докучаева А.В. Разработка и изучение in vitro тканеинженерной конструкции на основе политетрафторэтилена и мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток (сообщение № 1) // Патол. кровообр. и кардиохир. 2015. Т. 19, № 4-2. С. 20-27.
4.            Саббатовский К.Г., Виленский А.И., Соболев В.Д. Электроповерхностные свойства облученных тяжелыми ионами пленок полиэтилентерефталата и трековых мембран на их основе // Коллоидный журнал. 2016. Т. 78, № 4. С. 534.
5.            Сайфуллина Д.В., Шахмаева И.И., Бондарь О.В., Абдуллин Т.И. Применение электроаналитических методов для характеристики клеток человека // Клет. трансплантол. и ткан. инженерия. 2012. Т. 7, № 1. С. 86-91.
6.            Севостьянова В.В., Головкин А.С., Филипьев Д.Е., Глушкова Т.В., Борисов В.В., Бураго А.Ю., Барбараш Л.С. Выбор оптимальных параметров электроспиннинга для изготовления сосудистого графта малого диаметра из поликапролактона // Фундаментальные исследования. 2014. № 10-1. С. 180-184.
7.            Шумков К.В., Лефтерова Н.П., Пак Н.Л., Какучая Т.Т., Смирнова Ю.Ю., Полунина А.Г., Воеводина В.М., Мерзляков В.Ю., Голухова Е.З., Бокерия Л.А. Аортокоронарное шунтирование в условиях искусственного кровообращения и на работающем сердце: сравнительный анализ ближайших и отдаленных результатов и послеоперационных осложнений (нарушения ритма сердца, когнитивные и неврологические расстройства, реологические особенности и состояние системы гемостаза) // Креативная кардиология.
2009. № 1. С. 28-50.
8.            Bellón Caneiro J.M., Buján Varela J., Navlet Armenta J., Gianonatti Alias M.C., Hernando Fraile A., García Honduvilla N., Turégano Fuentes F. The seeding of porcine endothelial cells on a polytetrafluoroethylene (PTFE) sub­strate. An experimental study // Angiologia. 1992. Vol. 44, N 3. P. 95‑101.
9.            Boivin M.C., Chevallier P., Hoesli C.A., Lagueux J., Bareille R., Rémy M., Bordenave L., Durrieu M.C., Laroche G. Human saphenous vein endothelial cell adhesion and expansion on micropatterned polytetrafluoroethylene // J. Biomed. Mater. Res. A. 2013. Vol. 101, N 3. P. 694-703.
10.          Ertel S.I., Ratner B.D., Kaul A., Schway M.B., Horbett T.A. In vitro study of the intrinsic toxicity of synthetic surfaces to cells // J. Biomed. Mater. Res. 1994. Vol. 28, N 6. P. 667-675.
11.          Jantzen A.E., Lane W.O., Gage S.M., Haseltine J.M., Galinat L.J., Jamiolkowski R.M., Lin F.H., Truskey G.A., Achneck H.E. Autologous endothelial progenitor cell-seeding technology and biocompatibility testing for cardiovascular devices in large animal model // J. Vis. Exp. 2011. N 55. pii: 3197. doi: 10.3791/3197.
12.          Knetsch M.L., Olthof N., Koole L.H. Polymers with tunable toxicity: a reference scale for cytotoxicity testing of biomaterial surfaces // J. Biomed. Mater. Res. A. 2007. Vol. 82, N 4. P. 947-957.
13.          Lamichhane S., Anderson J.A., Remund T., Sun H., Larson M.K., Kelly P., Mani G. Responses of endothelial cells, smooth muscle cells, and platelets dependent on the surface topography of polytetrafluoroethylene // J. Biomed. Mater. Res. A. 2016. Vol. 104, N 9. P. 2291-2304.
14.          Lamichhane S., Anderson J.A., Vierhout T., Remund T., Sun H., Kelly P. Polytetrafluoroethylene topographies determine the adhesion, activation, and foreign body giant cell formation of macrophages // J. Biomed. Mater. Res. A. 2017. Vol. 105, N 9. P. 2441-2450.
15.          Laube H.R., Duwe J., Rutsch W., Konertz W. Clinical experience with autologous endothelial cell-seeded polytetra­fluoroethylene coronary artery bypass grafts // J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 2000. Vol. 120, N 1. P. 134-141.
16.          Lehle K., Buttstaedt J., Birnbaum D.E. Expression of adhesion molecules and cytokines in vitro by endothelial cells seeded on various polymer surfaces coated with titaniumcarboxonitride // J. Biomed. Mater. Res. A. 2003. Vol. 65, N 3. P. 393-401.
17.          Scharner D., Rössig L., Carmona G., Chavakis E., Urbich C., Fischer A., Kang T.B., Wallach D., Chiang Y.J., Deribe Y.L., Dikic I., Zeiher A.M., Dimmeler S. Caspase-8 is involved in neovascularization-promoting progenitor cell functions // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2009. Vol. 29, N 4. P. 571‑578.
18.          Xu X.P., He H.L., Hu S.L., Han J.B., Huang L.L., Xu J.Y., Xie J.F., Liu A.R., Yang Y., Qiu H.B. Ang II-AT2R increases mesenchymal stem cell migration by signaling through the FAK and RhoA/Cdc42 pathways in vitro // Stem Cell Res Ther. 2017. Vol
. 8, N 1. P. 164. doi: 10.1186/s13287-017-0617-z.

Церебральный кровоток у крыс SHR после трансплантации мезенхимных стволовых клеток
И.Б.Соколова, Г.И.Лобов – 275
ФГБУН физиологии им. И.П.Павлова РАН, Санкт-Петербург, РФ
          Интрацеребральная трансплантация мезенхимных стволовых клеток привела к ангиогенезу в мягкой мозговой оболочке крыс линии SHR в 6- и 12-месячном возрасте. Перфузия ткани мозга у 6-месячных крыс SHR после трансплантации клеток значительно увеличилась, а у 12-месячных — осталась на прежнем уровне. Наблюдалась выраженная активация регуляторных процессов в церебральной сосудистой системе, в максимальной степени она была выражена у 12-месячных крыс SHR. Нейрогенный и миогенный тонус церебральных сосудов значительно возрос, а эндотелийзависимый тонус несколько снизился. Увеличение миогенного и нейрогенного тонуса сосудов у крыс SHR в возрасте 6 и 12 мес после трансплантации стволовых клеток, по-видимому, объясняется образованием новых гладкомышечных клеток в стенке ранее существовавших артерий. Бóльшая мышечная масса развивала бóльшую силу и способствовала сужению просвета артерий, в итоге, несмотря на ангиогенез ниже по течению, возрастания кровотока не происходило. Некоторое снижение эндотелийзависимого тонуса объясняется способностью новообразованных эндотелиальных клеток продуцировать значительное количество вазодилататоров.
Ключевые слова: интрацеребральная трансплантация мезенхимных стволовых клеток, перфузия, сосудистый тонус
Адрес для корреспонденции: lobovgi@infran.ru. Лобов Г.И.
Литература
1.            Лобов Г.И., Гурков А.С. Модуляция кровотока в микроциркуляторном русле пальцев кисти после формирования радиоцефалической артериовенозной фистулы // Нефрология и диализ. 2014. Т. 16, № 3. С. 364-371.
2.            Соколова И.Б., Сергеев И.В., Скоробогатая Е.В., Уфимцева А.И., Полынцев Д.Г., Дворецкий Д.П. Влияние трансплантации мезенхимных стволовых клеток на плотность микрососудистой сети пиальной оболочки коры головного мозга спонтанно-гипертензивных крыс линии SHR разного возраста // Клет. технол. в биол. и мед. 2017.
№ 1. С. 19-22.
3.            Armulik A., Abramsson A., Betsholtz C. Endothelial/pericyte interactions // Circ. Res. 2005. Vol. 97, N 6. P. 512-523.
4.            Bronckaers A., Hilkens P., Martens W., Gervois P., Ratajczak J., Struys T., Lambrichts I. Mesenchymal stem/stromal cells as a pharmacological and therapeutic approach to accelerate angiogenesis // Pharmacol. Ther. 2014. Vol. 143, N 2. P. 181‑196.
5.            da Silva Meirelles L., Caplan A.I., Nardi N.B. In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells // Stem Cells. 2008. Vol. 26, N 9. P. 2287-2299.
6.            de Oliveira L.F., Almeida T.R., Ribeiro Machado M.P., Cuba M.B., Alves A.C., da Silva M.V., Rodrigues Júnior V., Dias da Silva V.J. Priming mesenchymal stem cells with endothelial growth medium boosts stem cell therapy for systemic srterial hypertension // Stem Cells Int. 2015. Vol. 2015. ID 685383. doi: 10.1155/2015/685383.
7.            Heinert G., Casadei B., Paterson D.J. Hypercapnic cerebral blood flow in spontaneously hypertensive rats // J. Hypertens. 1998. Vol. 16, N 10. P. 1491-1498.
8.            Lee T.H., Liu H.L., Yang S.T., Yang J.T., Yeh M.Y., Lin J.R. Effects of aging and hypertension on cerebral ischemic susceptibility: evidenced by MR diffusion-perfusion study in rat // Exp. Neurol. 2011. Vol. 227, N 2. P. 314-321.
9.            Li Y., Shen Q., Huang S., Li W., Muir E.R., Long J.A., Duong T.Q. Cerebral angiography, blood flow and vascular reactivity in progressive hypertension // Neuroimage. 2015. Vol. 111. P. 329-337.
10.          Meneses A., Hong E. Spontaneously hypertensive rats: a potential model to identify drugs for treatment of learning disorders // Hypertension. 1998 Vol. 31, N 4. P. 968-972.
11.          Sabbatini M., Strocchi P., Vitaioli L., Amenta F. Microanatomical changes of intracerebral arteries in spontaneously hypertensive rats: a model of cerebrovascular disease of the elderly // Mech. Ageing Dev. 2001. Vol. 122, N 12. P. 1257‑1268.
12.          Tayebati S.K., Tomassoni D., Amenta F. Spontaneously hypertensive rat as a model of vascular brain disorder: micr­oanatomy, neurochemistry and behavior // J. Neurol. Sci. 2012. Vol. 322, N 1-2. P. 241-249.
13.          Touyz R.M. Reactive oxygen species, vascular oxidative stress, and redox signaling in hypertension: what is the clinical significance? // Hypertension. 2004. Vol. 44, N 3. P. 248-252.
14.          Wang L., Mu Z., Lin X., Geng J., Xiao T.Q., Zhang Z., Wang Y., Guan Y., Yang G.Y. Simultaneous imaging of cerebrovascular structure and function in hypertensive rats using synchrotron radiation angiography // Front. Aging Neurosci. 2017. Vol. 9. P. 359. doi: 10.3389/fnagi.2017.00359.
15.          Zhou Q., Dong Y., Huang L., Yang S., Chen W. Study of cerebrovascular reserve capacity by magnetic resonance perfusion weighted imaging and photoacoustic imaging // Magn. Reson. Imaging. 2009. Vol. 27, N 2. P. 155-162.