info@iramn.ru
com@iramn.ru
bam.d@g23.relcom.ru



КЛЕТОЧНЫЕ  ТЕХНОЛОГИИ  В  БИОЛОГИИ  И  МЕДИЦИНЕ

2017 г., № 1

 СОДЕРЖАНИЕ

Интернализация векторизованных липосом, загруженных плазмидной ДНК, в клетки глиомы С6
П.А.Мельников1,2, В.П.Баклаушев2, А.Н.Габашвили1, Н.В.Нуколова1,3, И.И.Кузнецов4, С.А.Черепанов1, Ф.А.Кошкин1, А.В.Леопольд1, В.П.Чехонин1,33
1
Отдел фундаментальной и прикладной нейробиологии ФГБУ ФМИЦПН им. В.П.Сербского Минздрава РФ, Москва; 2ФГБУ ФНКЦ ФМБА России, Москва; 3Кафедра медицинских нанобиотехнологий медико-биологического факультета РНИМУ им. Н.И.Пирогова, Москва, РФ; 4Кафедра химической энзимологии химического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
Исследована интернализация клетками глиомы С6 векторных наноконтейнеров, загруженных плазмидной ДНК. Для повышения селективности доставки липосомы были конъюгированы с моноклональными антителами к VEGF и его рецептору 2-го типа (VEGFR2). Методами проточной цитофлюориметрии и лазерной сканирующей конфокальной микроскопии было показано, что векторизованные антителами липосомы более чем в 2 раза активнее проникают и накапливаются в опухолевых клетках глиомы С6 по сравнению с контролем (липосомы, модифицированные неспецифическими антителами, и невекторные липосомы). С помощью количественного анализа флюоресцентного сигнала продемонстрировано, что полученные катионизированные иммунолипосомы достоверно более эффективно доставляют внутрь клетки плазмидную ДНК pCop-Green-N, приводя к эффективной трансфекции клеток глиомы С6
Ключевые слова: катионизированные липосомы, глиома С6, генная терапия, интернализация
Адрес для корреспонденции: proximopm@gmail.com. Мельников П.А.
Литература
1.             Шеин С.А., Нуколова Н.В., Корчагина А.А., Абакумова Т.О., Кузнецов И.И., Абакумов М.А., Баклаушев В.П., Гурина О.И., Чехонин В.П. избирательная доставка VEGF-направленных липосом в интракраниальную глиому С6 // Бюл. экспер. биол.
2014. Т. 158, № 9. С. 359-365.
2.             Almofti M.R., Harashima H., Shinohara Y., Almofti A., Baba Y., Kiwada H. Cationic liposome-mediated gene delivery: biophysical study and mechanism of internalization // Arch Biochem. Biophys. 2003. Vol. 410, N 2. P. 246-253.
3.             Baum C., Kustikova O., Modlich U., Li Z., Fehse B. Mutagenesis and oncogenesis by chromosomal insertion of gene transfer vectors // Hum. Gene Ther. 2006. Vol. 17, N 3. P. 253-263.
4.             Bessis N., Garcia Cozar F.J., Boissier M.C. Immune responses to gene therapy vectors: influence on vector function and effector mechanisms // Gene Ther. 2004. Vol. 11, Suppl. 1. P. S10-S17.
5.             Chekhonin V.P., Baklaushev V.P., Yusubalieva G.M., Gurina O.I. Targeted transport of 125I-labeled antibody to GFAP and AMVB1 in an experimental rat model of C6 glioma // J. Neuroimmune Pharmacol. 2009. Vol. 4, N 1. P. 28-34.
6.             Eastman S.J., Lukason M.J., Tousignant J.D.,
Murray H., Lane M.D., St George J.A., Akita G.Y., Cherry M., Cheng S.H., Scheule R.K. A concentrated and stable aerosol formulation of cationic lipid: DNA complexes giving high-level gene expression in mouse lung // Hum. Gene Ther. 1997. Vol. 8, N 6. P. 765-773.
7.             Ewe A., Aigner A. Cationic lipid-coated polyplexes (lipopolyplexes) for DNA and small RNA delivery // Methods Mol. Biol. 2016. Vol. 1445. P. 187-200.
8.             Ewe A., Schaper A., Barnert S., Schubert R., Temme A., Bakowsky U., Aigner A. Storage stability of optimal liposome-polyethylenimine complexes (lipopolyplexes) for DNA or siRNA delivery // Acta Biomater. 2014. Vol. 10, N 6. P. 2663‑2673.
9.             Farhood H., Serbina N., Huang L. The role of dioleoyl phosphatidylethanolamine in cationic liposome mediatedgene transfer // Biochim. Biophys. Acta. 1995. Vol. 1235, N 2. P. 289-295.
10.           Klibanov A.L., Maruyama K., Torchilin V.P., Huang L. Amphipathic polyethyleneglycols effectively prolong the circulation time of liposomes // FEBS Lett. 1990. Vol. 268, N 1. P. 235-237.
11.           Lechanteur A., Furst T., Evrard B., Delvenne P., Hubert P., Piel G. PEGylation of lipoplexes: The right balance between cytotoxicity and siRNA effectiveness // Eur. J. Pharm. Sci. 2016. Vol. 93. P. 493-503.
12.           Manosroi A., Khositsuntiwong N., Komno C., Manosroi W., Werner R.G., Manosoi J. Chemical stability and cytotoxicity of human insulin loaded in cationic DPPC/CTA/DDAB liposomes // J. Biomed. Nanotechnol. 2011. Vol. 7, N 2. P. 308-316.
13.           Mintzer M.A., Simanek E.E. Nonviral vectors for gene delivery // Chem. Rev. 2009. Vol. 109, N 2. P. 259-302.
14.           Sarisozen C., Salzano G., Torchilin V.P. Recent advances in siRNA delivery // Biomol. Concepts. 2015. Vol. 6, N 5-6. P. 321-341.
15.           Semple S.C., Akinc A., Chen J., Sandhu A.P., Mui B.L., Cho C.K., Sah D.W., Stebbing D., Crosley E.J., Yaworski E., Hafez I.M., Dorkin J.R., Qin J., Lam K., Rajeev K.G., Wong K.F., Jeffs L.B., Nechev L., Eisenhardt M.L., Jayaraman M., Kazem M., Maier M.A., Srinivasulu M., Weinstein M.J., Chen Q., Alvarez R., Barros S.A., De S., Klimuk S.K., Borland T., Kosovrasti V., Cantley W.L., Tam Y.K., Manoharan M., Ciufolini M.A., Tracy M.A., de Fougerolles A., MacLachlan I., Cullis P.R., Madden T.D., Hope M.J. Rational design of cationic lipids for siRNA delivery // Nat. Biotechnol. 2010. Vol. 28, N 2. P. 172-176.
16.           Thomas C.E., Ehrhardt A., Kay M.A. Progress and problems with the use of viral vectors for gene therapy // Nat.
Rev. Genet. 2003. Vol. 4, N 5. P. 346-358.

Влияние концентрации коллагенового геля на функциональную активность мезенхимных стромальных клеток костного мозга
Ю.А.Нащекина*,**, Н.М.Юдинцева*, П.О.Никонов*, Е.А.Иванова*, Л.В.Смагина*, И.В.Воронкина* – 12
*ФГБУН Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, РФ; **ФГАОУ ВО Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, РФ
На основе коллагена I были получены гели с концентрацией белка 1, 2 и 3.5 мг/мл. Для уменьшения контракции геля коллаген заключали в пористый полилактидный скаффолд. Концентрация геля не влияла на его деградацию. Коллагеновые гели способствовали образованию сети клеточных структур. Клетки в коллагеновом геле в концентрации 1 мг/мл, заключенном в полилактидный скаффолд, имели вытянутую веретеновидную структуру, в отличие от хорошо распластанных клеток в коллагеновом геле в этой же концентрации, но в незакрепленном состоянии. Закрепление коллагенового геля в полилактидный скаффолд способствовало активному синтезу клетками ламинина и фибронектина уже на 5-е сутки культивирования по сравнению с аналогичными субстратами в незакрепленном состоянии.
Ключевые слова: коллагеновый гель, полилактидный скаффолд, мезенхимные стромальные клетки костного мозга
Адрес для корреспонденции: yuliya.shved@gmail.com. Нащекина Ю.А.
Литература
1.             Дарбе А. Практическая химия белка. М., 1989.
2.             Нащекина Ю.А., Никонов П.О., Михайлов В.М., Пинаев Г.П. Зависимость заполнения стромальными клетками костного мозга трехмерной матрицы от способа посева клеток и типа модификации поверхности матрицы // Цитология. 2014. Т. 56, № 4. C. 283-290.
3.             Николаенко Н.С., Цупкина Н.В., Пинаев Г.П., Дулаев А.К., Деев Р.В., Гололобов В.Г. Выделение и культивирование стромальных клеток костного мозга с целью их дальнейшего использования в лечении дефектов костной ткани // Трансплантология. 2003. Т. 4, № 1. С. 169-171.
4.             Швед Ю.А., Кухарева Л.В., Зорин И.М., Соловьев А.Ю., Блинова М.И., Билиби А.Ю., Пинаев Г.П. Взаимодействие культивируемых клеток кожи с разным структурными формами коллагена, нанесенного на полилактидную матриц // Цитология.
2007. Т. 49, № 1. С. 32-39.
5.             Ahn S., Yoon H., Kim G., Kim Y., Lee S., Chun W. Designed three-dimensional collagen scaffolds for skin tissue regeneration // Tissue Eng. Part C. Methods. 2010. Vol. 16, N 5. P.
813-820.
6.             Bell E., Ivarsson B., Merrill C. Production of a tissue-like structure by contraction of collagen lattices by human fibroblasts of different proliferative potential in vitro // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1979. Vol. 76, N 3. P. 1274-1278.
7.             Cao Z., Dou C., Dong S. Scaffolding Biomaterials for Cartilage Regeneration // J. Nanomaterials. 2014. Vol. 2014. ID489128. doi:10.1155/2014/489128.
8.             Chandrakasan G., Torchia D.A., Piez K.A. Preparation of intact monomeric collagen from rat tail tendon and skin and the structure of the nonhelical ends in solution // J. Biol. Chem. 1967. Vol. 251, N 19. P. 6062-6067.
9.             Drury J.L., Mooney D.J. Hydrogels for tissue engineering: scaffold design variables and applications // Biomaterials. 2003. Vol. 24, N 24. P. 4337-4351.
10.           Gellynck K., Shah R., Deng D., Parkar M., Liu W., Knowles J.C., Buxton P. Cell cytoskeletal changes effected by static compressive stress lead to changes in the contractile properties of tissue regenerative collagen membranes // Eur. Cell Mater. 2013. Vol. 25. P. 317-325.
11.           Grinnell F. Fibroblasts, myofibroblasts, and wound contraction // J. Cell Biol. 1994. Vol. 124, N 4. P. 401-404.
12.           Hou Q., Grijpma D.W., Feijen J. Porous polymeric structures for tissue engineering prepared by a coagulation, compression moulding and salt leaching technique // Biomaterials. 2003. Vol. 24, N 11. P. 1937-1947.
13.           Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. Vol. 227. P. 680-685.
14.           Li W.J., Tuli R., Okafor C., Derfoul A., Danielson K.G., Hall D.J., Tuan R.S. A three-dimensional nanofibrous scaffold for cartilage tissue engineering using human mesenchymal stem cells // Biomaterials. 2005. Vol. 26, N 6. P. 599-609.
15.           Oliveira S.M., Ringshia R.A., Legeros R.Z., Clark E., Yost M.J., Terracio L., Teixeira C.C. An improved collagen scaffold for skeletal regeneration // J. Biomed. Mater. Res. A. 2010. Vol. 94, N 2. P. 371-379.
16.           Parenteau-Bareil R., Gauvin R., Berthod F. Collagen-based biomaterials for tissue engineering applications // Materials. 2010. Vol. 3. P. 1863-1887. doi:10.3390/ma3031863.
17.           Schwarz U.S., Gardel M.L. United we stand: integrating the actin cytoskeleton and cell-matrix adhesions in cellular mechanotransduction // J. Cell Sci. 2012. Vol. 125, Pt 13. P. 3051-3060.
18.           Towbin H., Staehelin T., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1979. Vol. 76, N 9. P. 4350-4354.
19.           Zhu Y.K., Umino T., Liu X.D., Wang H.J., Romberger D.J., Spurzem J.R., Rennard S.I. Contraction of fibroblast-containing collagen gels: initial collagen concentration regulates the degree of contraction and cell survival // In Vitro Cell. Dev.
Biol. Anim. 2001. Vol. 37, N 1. P. 10-16.

Влияние трансплантации мезенхимных стволовых клеток на плотность микрососудистой сети пиальной оболочки коры головного мозга спонтанно-гипертензивных крыс линии SHR разного возраста
И.Б.Соколова, И.В.Сергеев, Е.В.Скоробогатая*, А.И.Уфимцева*, Д.Г.Полынцев*, Д.П.Дворецкий – 19
Лаборатория физиологии сердечно-сосудистой и лимфатической систем ФГБУН Института физиологии им. И.П.Павлова РАН, Санкт-Петербург, РФ; *ООО “Транс-Технологии”, Санкт-Петербург, РФ
С помощью телевизионной установки для изучения микроциркуляции (при увеличении 40) исследовали плотность всей микрососудистой сети и плотность артериальных сосудов в пиальной оболочке сенсомоторной коры головного мозга спонтанно-гипертензивных крыс линии SHR разного возраста (3-4 мес, 12 мес) после интрацеребральной трансплантации мезенхимных стволовых клеток человека. У крыс линии SHR плотность микрососудистой сети в пиальной оболочке после трансплантации мезенхимных стволовых клеток человека повышалась до уровня молодых животных линии Wistar-Kyoto.
Ключевые слова: головной мозг, интрацеребральная трансплантация, мезенхимные стволовые клетки, ангиогенез, артериогенез
Адрес для корреспонденции: sib@kolt.infran.ru. Соколова И.Б.
Литература
1.             Верещагин Н.Ф., Моргунов В.А., Гилевская Т.С. Патология головного мозга при атеросклерозе и артериальной гипертонии. М., 1997.
2.             Вовенко Е.П., Чуйкин А.Е. Профили тканевого напряжения кислорода вблизи артериол и венул коры головного мозга крысы при развитии острой анемии // Рос. физиол. журн. 2009. Т. 95, № 7. С. 673-687.
3.             Соколова И.Б., Анисимов С.В., Пузанов М.В., Сергеев И.В., Дворецкий Д.П. Старение микрососудистой сети, образовавшейся в коре головного мозга после интрацеребральной трансплантации мезенхимных стволовых клеток // Успехи геронтологии. 2015. Т. 28, № 1. С. 48-52.
4.             Соколова И.Б., Зинькова Н.Н., Билибина А.А., Кругляков П.В., Гилерович Е.Г., Полынцев Д.Г., Отеллин В.А. Возможности применения клеточной терапии при лечении ишемического инсульта в эксперименте // Гены и клетки. 2007. Т. 2, № 4. С. 54-62.
5.             Соколова И.Б., Сергеев И.В., Анисимов С.В., Пузанов М.В., Дворецкий Д.П. Влияние трансплантации мезенхимальных стволовых клеток на плотность микрососудистой сети пиальной оболочки коры головного мозга крыс разного возраста // Клет. технол. в биол. и мед. 2012. № 4. С. 205-209.
6.             Соколова И.Б., Сергеев И.В., Дворецкий Д.П. Влияние повышенного артериального давления на микроциркуляцию в коре головного мозга молодых крыс // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 160. № 9. С. 276-278.
7.             Соколова И.Б., Федотова О.Р., Гилерович Е.Г., Сергеев И.В., Анисимов С.В., Пузанов М.В., Дворецкий Д.П. Эффективность применения интрацеребральной трансплантации мезенхимных стволовых клеток для коррекции возрастных изменений микроциркуляции в головном мозге крыс // Цитология.
2014. Т. 56, № 4. С. 273-282.
8.             Beason-Held L.L., Moghekar A., Zonderman A.B., Kraut M.A., Resnick S.M. Longitudinal changes in cerebral blood flow in the older hypertensive brain // Stroke. 2007. Vol. 38, N 6.
Р. 1766-1773.
9.             Dai W., Lopez O.L., Carmichael O.T., Becker J.T., Kuller L.H., Gach H.M. Abnormal regional cerebral blood flow in cogniti­vely normal elderly subjects with hypertension // Stroke. 2008. Vol. 39, N 2.
Р. 349-354.
10.           Jennings J.R., Muldoon M.F., Ryan C., Price J.C., Greer P., Sutton-Tyrrell K., van der Veen F.M., Meltzer C.C. Reduced cerebral blood flow response and compensation among patients with untreated hypertension // Neurology. 2005. Vol. 64, N 8.
Р. 1358-1365.
11.          
Jennings J.R., Zanstra Y. Is the brain the essential in hypertension? // Neuroimage. 2009. Vol. 47, N 3. Р. 914-921.
12.           Kalaria R. Vascular basis for brain degeneration: faltering controls and risk factors for dementia // Nutr. Rev. 2010. Vol. 68, Suppl. 2.
Р. S74-S87.
13.           Mora-Lee S., Sirerol-Piquer M.S., Gutiérrez-Pérez M., Gomez-Pinedo U., Roobrouck V.D., López T., Casado-Nieto M., Abizanda G., Rabena M.T., Verfaille C., Prósper F., García-Verdugo J.M. Therapeutic effects of hMAPC and hMSC transplantation after stroke in mice // PLoS One. 2012. Vol. 7, N 8. P. e43683.
14.           Rigsby C.S., Pollock D.M., Dorrance A.M. Spironolactone improves structure and increases tone in the cerebral vasculature of male spontaneously hypertensive stroke-prone rats // Microvasc. Res. 2007. Vol. 73, N 3.
Р. 198-205.
15.           Sierra C. Cerebral small vessel disease, cognitive impairment and vascular dementia // Panminerva Med. 2012. Vol. 54, N 3.
Р. 179-188.
16.           Wei L., Erinjeri J.P., Rovainen C.M., Woolsey T.A. Collateral growth and angiogenesis around cortical stroke // Stroke. 2001. Vol. 32, N 9. P. 2179-2184.
17.           Xin H., Li Y., Cui Y., Yang J.J., Zhang Z.G., Chopp M. Systemic administration of exosomes released from mesenchymal stromal cells promote functional recovery and neurovascular plasticity after stroke in rats // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2013. Vol. 33, N 11.
Р. 1711-1715.
18.           Yu X., Chen D., Zhang Y., Wu X., Huang Z., Zhou H., Zhang Y., Zhang Z. Overexpression of CXCR4 in mesenchymal stem cells promotes migration, neuroprotection and angiogenesis in a rat model of stroke // J. Neurol.
Sci. 2012. Vol. 316, N 1-2. Р. 141-149.

Определение уровня эндотелиальных прогениторных клеток фенотипа CD34+CD133+CD309+ у больных ишемической болезнью сердца на фоне терапии различными дозами аторвастатина
А.А.Аншелес, А.В.Рвачева, И.В.Сергиенко – 23
ФГБУ РКНПК Минздрава РФ, Москва
Определяли уровень эндотелиальных прогениторных клеток с фенотипом CD34+CD133+CD309+ в крови, а также динамику уровня эндотелиальных прогениторных клеток, факторов ангиогенеза и липидных показателей на фоне терапии аторвастатином в течение 3 мес у 58 больных ИБС: 26 пациентов принимали препарат в дозе 10 мг/сут, 32 — 40 мг/сут. Контрольную группу составили 15 здоровых добровольцев. Уровень эндотелиальных прогениторных клеток у больных ИБС до лечения был в 4 раза ниже, VEGF — на 52% выше, эндостатина — на 13% ниже, чем в контрольной группе. В результате терапии отмечено достоверное снижение уровня VEGF (на 11%), С-реактивного белка (на 26%), общего холестерина (на 30%), холестерина ЛПНП (на 35%) и триглицеридов (на 18%), уровни эндостатина, MCP-1, холестерина ЛПВП значимо не изменялись. Отме­чалось достоверное увеличение количества эндотелиальных прогениторных клеток на 72%, их прирост не зависел от дозы статина, однако был выше при исходно более низком количестве клеток, а также у больных с бульшим снижением уровня холестерина ЛПНП.
Ключевые слова: эндотелиальные прогениторные клетки, ишемическая болезнь сердца, аторвастатин, факторы ангиогенеза
Адрес для корреспонденции: a.ansheles@gmail.com. Аншелес А.А.
Литература
1.            
António N., Fernandes R., Soares A., Soares F., Lopes A., Carvalheiro T., Paiva A., Pégo G.M., Providéncia L.A., Gonçalves L., Ribeiro C.F. Impact of prior chronic statin therapy and high-intensity statin therapy at dischargeon circulating endothelial progenitor cell levels in patients with acute myocardial infarction: a prospective observational study // Eur. J. Clin. Pharmacol. 2014. Vol. 70, N 10. P. 1181-1193.
2.             Asahara T., Murohara T., Sullivan A., Silver M., van der Zee R., Li T., Witzenbichler B., Schatteman G., Isner J.M. Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis // Science. 1997. Vol. 275. P. 964-967.
3.             Di Sciascio G., Patti G., Pasceri V., Gaspardone A., Colonna G., Montinaro A. Efficacy of atorvastatin reload in patients on chronic statin therapy undergoing percutaneous coronary intervention: results of the ARMYDA-RECAPTURE (Atorvastatin for Reduction of Myocardial Damage During Angioplasty) Randomized Trial // J. Am. Coll. Cardiol. 2009. Vol. 54, N 6. P. 558-565.
4.             Eisen A., Leshem-Lev D., Yavin H., Orvin K., Mager A., Rechavia E., Bental T., Dadush O., Battler A., Kornowski R., Lev E.I. Effect of High Dose Statin Pretreatment on Endothelial Progenitor Cells After Percutaneous Coronary Intervention (HIPOCRATES Study) // Cardiovasc. Drugs Ther. 2015. Vol. 29, N 2. P. 129-135.
5.             Friedrich E.B., Walenta K., Scharlau J., Nickenig G., Werner N. CD34-/CD133+/VEGFR-2+ endothelial progenitor cell subpopulation with potent vasoregenerative capacities // Circ. Res. 2006. Vol. 98, N 3. P. e20-e25.
6.             Fu Y., Wu X., Han Q., Liang Y., He Y., Luo Y. Sulfate stabilizes the folding intermediate more than the native structure of endostatin // Arch. Biochem. Biophys. 2008. Vol. 471, N 2. P. 232-239.
7.             Lin J., Kakkar V., Lu X. Impact of MCP-1 in atherosclerosis // Curr. Pharm. Des. 2014. Vol. 20, N 28. P. 4580-4588.
8.             Pedersen T.R., Faergeman O., Kastelein J.J., Olsson A.G., Tikkanen M.J., Holme I., Larsen M.L., Bendiksen F.S., Lindahl C., Szarek M., Tsai J.; Incremental Decrease in End Points Through Aggressive Lipid Lowering (IDEAL) Study Group. High-dose atorvastatin vs usual-dose simvastatin for secondary prevention after myocardial infarction: the IDEAL study: a randomized controlled trial // JAMA. 2005. Vol. 294, N 19. P. 2437-2445.
9.             Pesaro A.E., Serrano C.V.Jr, Katz M., Marti L., Fernandes J.L., Parra P.R., Campos A.H. Increasing doses of simvastatin versus combined ezetimibe/simvastatin: effect on circulating endothelial progenitor cells // J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. 2013. Vol. 18, N 5. P. 447-452.
10.           Petit
I., Jin D., Rafii S. The SDF-1-CXCR4 signaling pathway: a molecular hub modulating neo-angiogenesis // Trends Immunol. 2007. Vol. 28, N 7. P. 299-307.
11.           Psaltis P.J., Simari R.D. Vascular wall progenitor cells in health and disease // Circ. Res. 2015. Vol. 116, N 8. P. 1392-1412.
12.           Xu Q. Stem cells and transplant arteriosclerosis // Circ. Res. 2008. Vol. 102, N 9. P. 1011-1024.
13.           Zampetaki A., Kirton J.P., Xu Q. Vascular repair by endothelial progenitor cells // Cardiovasc. Res. 2008. Vol. 78, N 3. P. 413‑421.
14.           Zhang Q., Yin H., Liu P., Zhang H., She M. Essential role of HDL on endothelial progenitor cell proliferation with PI3K/Akt/cyclin D1 as the signal pathway // Exp.
Biol. Med. (Maywood). 2010. Vol. 235, N 9. P. 1082-1092.

Численность мультипотентных стромальных клеток в 3-4.5-месячных гетеротопных трансплантатах костного мозга мышей линии СВА, подвергнутых однократному воздействию остеогенных стимулов (кюретаж, введение ВМР-2) или антигенов (антигенный комплекс S. typhimurium, ЛПС)
Ю.Ф.Горская, В.Г.Нестеренко – 27
Лаборатория регуляции иммунитета и иммунологической толерантности (зав. — проф. В.Г.Нестеренко) ФГБУ ФНИЦ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава РФ, Москва
На ранних сроках развития (3 мес) в трансплантатах от доноров костного мозга, которые за 1 сут до трансплантации однократно подвергались различным воздействиям in vivo (кюретаж, введение ВМР-2 или антигенного комплекса S. typhimurium), наблюдалось значительное повышение численности ядерных клеток (в 1.4, 1.9 и 2.9 раза соответственно), эффективности клонирования мультипотентных стромальных клеток (МСК) (в 3.8, 3.8 и 7.2 раза), общей численности МСК (в 5, 7 и 21 раз), остеогенных МСК (в 5, 9 и 15 раз) по сравнению с контролем (интактные доноры), а также более быстрый набор массы костных капсул. В дальнейшем разница в величинах этих параметров между контрольной и опытными группами нивелировалась, но даже через 4.5 мес в опытных группах общая численность МСК на трансплантат превосходила контрольные значения в 1.4-1.7 раза, а остеогенных МСК — в 2 раза. Содержание МСК в исходном костном мозге бедра доноров, использованном для трансплантации, через 1 сут после указанных воздействий увеличивалось в 2.1 раза при проведении кюретажа, в 2.6 раза — при введении антигенов S. typhimurium, в 3.3 раза — ЛПС; введение ВМР-2 снижало эту величину на 50%. При этом содержание остеогенных костномозговых МСК через 1 сут увеличивалось в 1.7 раза (ВМР-2) и 5.5 раза (кюретаж), а при использовании антигенов S. typhimurium соответствовало контролю. Концентрация остеогенных МСК в костном мозге интактных доноров составляла 22%, была максимальной при проведении кюретажа (57%) и введении ВМР-2 (74%) и минимальной — при введении антигенов S. typhimurium (8%). Однако данный показатель в трансплантатах всех групп не сильно различался и выравнивался уже к 3-4 мес, что могло быть следствием регуляции со стороны организма реципиентов. Исходное преимущество в содержании костномозговых МСК у доноров, подвергнутых воздействию остеогенных стимулов и введению антигенов, позволяло обеспечить гораздо более быстрый по сравнению с контролем рост трансплантатов. Полученные данные могут оказаться полезными при разработке оптимальных методов трансплантации тканей.
Ключевые слова: стромальные клетки костного мозга, остеогенные стимулы, иммунный ответ, трансплантабельность
Адрес для корреспонденции: uliya.gorskaya@nearmedic.ru. Горская Ю.Ф.
Литература
1.             Горская Ю.Ф., Данилова Т.А., Карягина А.С., Лунин В.Г., Грабко В.И., Бартов М.С., Громов А.В., Грунина Т.М., Соболева Л.А., Шаповал И.М., Нестеренко В.Г. Влияние введения мышам линии СВА антигенного комплекса S. typhimurium совместно с проведением стимулирующих остеогенез воздействий (кюретаж, ВМР-2) на мультипотентные стромальные клетки костного мозга и концентрацию цитокинов в сыворотке крови // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 158, № 10. С. 466-471.
2.             Горская Ю.Ф., Данилова Т.А., Нестеренко В.Г. Численность стромальных клеток-предшественников в костном мозге и гетеротопных трансплантатах костного мозга мышей, иммунизированных антигенами стрептококка группы А в разные сроки после иммунизации // Бюл. экспер. биол. 2009. Т. 147, № 1. С. 78-81.
3.             Логунов Д.Ю., Верховская Л.В., Ганчева П.Г., Народицкий Б.С., Костарной А.В. Вияние липополисахарида S. typhi на эпителизацию ран кожи и секрецию эпидермального фактора роста // Мед. иммунол.
2012. Т. 14, № 3. С. 223-226.
4.             Chailakhyan R.K., Gerasimov Yu.V., Kuralesova A.I., Latsinik N.V., Genkina E.N., Chailakhyan M.R. Proliferative and differentiation potential of individual clones derived from bone marrow stromal precursor cells // Biol. Bull. 2001. Vol. 28, N 6. P. 572-584.
5.             Frangogiannis N.G. The immune system and cardiac repair // Pharmacol. Res. 2008. Vol. 58, N 2. P.88-111.
6.             Kuznetsov
S.A., Mankani M.H., Robey P.G. In vivo formation of bone and haematopoietic territories by transplanted human bone marrow stromal cells generated in medium with and without osteogenic supplements // J. Tissue Eng. Regen. Med. 2013. Vol. 7, N 3. P. 226-235.
7.             van den Akker F., Deddens J.C., Doevendans P.A., Sluijter J.P. Cardiac stem cell therapy to modulate inflammation upon myocardial infarction // Biochim. Biophys. Acta. 2013. Vol. 1830, N 2. P. 2449-2458.
8.             van den Akker F., de Jager S.C., Sluijter J.P. Mesenchymal stem cell therapy for cardiac inflammation: immunomodulatory properties and the influence of toll-like receptors // Mediators Inflamm.
2013. Vol. 2013. ID 181020. doi: 10.1155/2013/181020.

Первые этапы ангиогенеза после использования клеточных технологий на фоне острого экспериментального локального нарушения венозного оттока
И.В.Майбородин, В.В.Морозов, В.А.Матвеева, А.А.Аникеев, Р.В.Маслов, Г.А.Частикин, Н.Ф.Фигуренко – 32
Центр новых медицинских технологий (зав. — проф. А.И.Шевела) ФГБУН Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, РФ
Методами флюоресцентной световой и конфокальной лазерной микроскопии изучали начало ангиогенеза у крыс после инъекции аутологичных мультипотентных мезенхимных стромальных клеток костномозгового происхождения с трансфицированным геном GFP и окрашенными клеточными мембранами через кожу в проекцию лигированной бедренной вены. Уже через 4 сут в паравазальной клетчатке и послеоперационном рубце присутствовали большие скопления ярко флюоресцирующих фибробластоподобных удлиненных клеток и наблюдались признаки ангиогенеза. Инъецированные клетки не только самостоятельно полностью формировали сосуды, но одновременно встраивались в сосуды, образующиеся из собственных клеток. Часть введенных клеток фагоцитировалась макрофагами, которые приобретали способность к флюоресценции за счет мембранного красителя. Такие макрофаги в указанный срок уже появлялись в регионарных паховых лимфатических узлах, концентрируясь в виде скоплений в лимфоидной паренхиме коркового вещества.
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стромальные клетки, перевязка вены, ангиогенез, макрофаги, лимфатические узлы
Адрес для корреспонденции:
imai@mail.ru. Майбородин И.В.
Литература
1.             Бородин Ю.И., Григорьев В.Н. Лимфатический узел при циркуляторных нарушениях. Новосибирск, 1986.
2.             Майбородин И.В., Матвеева В.А., Маслов Р.В., Оноприенко Н.В., Кузнецова И.В., Частикин Г.А., Аникеев А.А. Некоторые реакции регионарных лимфатических узлов крыс после имплантации в дефект костной ткани мультипотентных стромальных клеток, адсорбированных на полигидроксиалканоате // Морфология. 2016. Т. 149, № 2. С. 21-26.
3.             Майбородин И.В., Морозов В.В., Маркевич Я.В., Матвеева В.А., Артемьева Л.В., Матвеев А.Л., Частикин Г.А., Серяпина Ю.В. Усиление ангиогенеза после паравазального введения мезенхимных стволовых клеток на фоне тромбированной вены в эксперименте // Клет. технол. в биол. и мед. 2015. № 1. С. 15-20.
4.             Майбородин И.В., Морозов В.В., Новикова Я.В., Матвеева В.А., Артемьева Л.В., Матвеев А.Л., Хоменюк С.В., Марчуков С.В. Морфологические результаты введения стромальных стволовых клеток костномозгового происхождения в тромбированную вену в эксперименте // Морфология.
2012. Т. 142, № 4. С. 54-61.
5.             Campo J.J., Aponte J.J., Nhabomba A.J., Sacarlal J., Angulo-Barturen I., Jimenez-Diaz M.B., Alonso P.L., Dobano C. Feasibility of flow cytometry for measurements of Plasmodium falciparum parasite burden in studies in areas of malaria endemicity by use of bidimensional assessment of  YOYO-1 and autofluorescence // J. Clin. Microbiol. 2011. Vol. 49, N 3. P. 968-974.
6.             Li F., Yang M., Wang L., Williamson
I., Tian F., Qin M., Shah P.K., Sharifi B.G. Autofluorescence contributes to false-positive intracellular Foxp3 staining in macrophages: a lesson learned from flow cytometry // J. Immunol. Methods. 2012. Vol. 386, N 1-2. P. 101-107.
7.             Mendes-Jorge L., Ramos D., Luppo M., Llombart C., Alexandre-Pires G., Nacher V., Melgarejo V., Correia M., Navarro M., Carretero A., Tafuro S., Rodriguez-Baeza A., Esperança-Pina J.A., Bosch F., Ruberte J. Scavenger function of resident autofluorescent perivascular macrophages and their contribution to the maintenance of the blood-retinal barrier // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2009. Vol. 50, N 12. P. 5997-6005.
8.             Mitchell A.J., Pradel L.C., Chasson L., Van Rooijen N., Grau G.E., Hunt N.H., Chimini G. Technical advance: autofluorescence as a tool for myeloid cell analysis // J. Leukoc. Biol. 2010. Vol. 88, N 3. P. 597-603.
9.             Potter K.A., Simon J.S., Velagapudi B., Capadona J.R. Reduction of autofluorescence at the microelectrode-cortical tissue interface improves antibody detection // J. Neurosci. Methods. 2012. Vol. 203, N 1. P. 96-105.
10.           Watson J. Suppressing autofluorescence of erythrocytes // Biotech. Histochem. 2011. Vol. 86, N 3. P. 207. doi: 10.3109/10520295.2011.568971.
11.           Wu X., Pan L., Wang Z., Liu X., Zhao D., Zhang X., Rupp R.A., Xu J. Ultraviolet irradiation induces autofluorescence enhancement via production of reactive oxygen species and photodecomposition in erythrocytes // Biochem.
Biophys. Res. Commun. 2010. Vol. 396, N 4. P. 999-1005.

Влияние цитокинов на формирование трубок сосудов эндотелиальными клетками в присутствии клеток трофобласта
Д.И.Соколов, Т.Ю.Львова, Л.С.Окорокова, К.Л.Белякова, А.Р.Шевелева, О.И.Степанова, В.А.Михайлова, С.А.Сельков – 39
ФГНУ НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О.Отта, Санкт-Петербург, РФ
Несмотря на большое количество данных о секреции цитокинов в зоне маточно-плацентарного контакта, до сих пор недостаточно изучен вопрос о влиянии клеток микроокружения, в частности клеток трофобласта, на процессы ангиогенеза и роли цитокинов в этом процессе. Было исследовано влияние цитокинов на формирование трубок сосудов эндотелиальными клетками в присутствии клеток трофобласта. Установлено, что клетки трофобласта подавляют ангиогенный потенциал эндотелиальных клеток. В присутствии клеток трофобласта антиангиогенные цитокины IFN-
g, IL-10, TNF-a и TGFb оказывают опосредованное через трофобласт стимулирующее влияние на формирование трубок сосудов эндотелиальными клетками. При этом эффекты цитокинов в условиях совместного культивирования эндотелия и трофобласта изменяются, цитокины могут приобретать дополнительные регуляторные функции.
Ключевые слова: эндотелий, трофобласт, цитокины, ангиогенез, плацента
Адрес для корреспонденции:
falcojugger@yandex.ru. Соколов Д.И.
Литература
1.             Айламазян Э.К., Степанова О.И., Сельков С.А., Соколов Д.И. Клетки иммунной системы матери и клетки трофобласта: “конструктивное сотрудничество” ради достижения совместной цели // Вестн. РАМН. 2013. № 11. С. 12-21.
2.             Амчиславский Е.И., Соколов Д.И., Сельков С.А., Фрейдлин И.С. Пролиферативная активность эндотелиальных клеток человека линии EA.hy926 и ее модуляция // Цитология. 2005. Т. 47, № 5. С. 393-403.
3.             Амчиславский Е.И., Соколов Д.И., Старикова Э.А., Фрейдлин И.С. Цитокиновый контроль процесса ангиогенеза // Мед. иммунол. 2003. Т. 5, № 5-6. С. 493-506.
4.             Сельков С.А., Павлов О.В., Соколов Д.И. Механизмы иммунорегуляции развития плаценты // Журн. акуш. и жен. болезней. 2011. Т. 60, № 3. С. 136-140.
5.             Соколов Д.И., Сельков С.А. Иммунологический контроль формирования сосудистой сети плаценты. СПб
., 2012.
6.             Ahmed A., Li X.F., Dunk C., Whittle M.J., Rushton D.I., Rollason T. Colocalisation of vascular endothelial growth factor and its Flt-1 receptor inhuman placenta // Growth Factors. 1995. Vol. 12, N 3. P. 235-243.
7.             Aldo P.B., Krikun G., Visintin I., Lockwood C., Romero R., Mor G. A novel three-dimensional in vitro system to study trophoblast-endothelium cell interactions // Am. J. Reprod. Immunol. 2007. Vol. 58, N 2. P. 98-110.
8.            
Arnaoutova I., George J., Kleinman H.K., Benton G. The endothelial cell tube formation assay on basement membrane turns 20: state of the science and the art // Angiogenesis. 2009. Vol. 12, N 3. P. 267-274.
9.             Auerbach R., Lewis R., Shinners B., Kubai L., Akhtar N. Angiogenesis assays: a critical overview // Clin. Chem. 2003. Vol. 49, N 1. P. 32-40.
10.           Bauer S., Pollheimer J., Hartmann J., Husslein P., Aplin J.D, Knöfler M. Tumor necrosis factor-alpha inhibits trophoblast migration through elevation of plasminogen activator inhibitor-1 in first-trimester villous explant cultures // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. Vol. 89, N 2. P. 812-822.
11.           Benirschke K., Kaufmann
Р., Baergen R. Pathology of the human placenta. N.Y., 2006.
12.           Berkowitz R.S., Faris H.M., Hill J.A.,
Anderson D.J. Localization of leukocytes and cytokines in chorionic villi of normal placentas and complete hydatidiform moles // Gynecol. Oncol. 1990. Vol. 37, N 3. P. 396-400.
13.           Cartwright J.E., Balarajah G. Trophoblast interactions with endothelial cells are increased by interleukin-1beta and tumour necrosis factor alpha and involve vascular cell adhesion molecule-1 and alpha4beta1 // Exp. Cell Res. 2005. Vol. 304, N 1. P. 328-336.
14.           Cartwright J.E., Fraser R., Leslie K., Wallace A.E., James J.L. Remodelling at the maternal-fetal interface: relevance to human pregnancy disorders // Reproduction. 2010. Vol. 140, N 6. P. 803-813.
15.           Chen Q., Stone P.R., McCowan L.M., Chamley L.W. Activated endothelial cells resist displacement by trophoblast in vitro // Placenta. 2007. Vol. 28, N 7. P. 743-747.
16.           Chen Q., Stone P.R., McCowan L.M., Chamley L.W. Interaction of Jar choriocarcinoma cells with endothelial cell monolayers // Placenta. 2005. Vol. 26, N 8-9. P. 617-625.
17.           Chung I.B., Yelian F.D., Zaher F.M., Gonik B., Evans M.I., Diamond M.P., Svinarich D.M. Expression and regulation of vascular endothelial growth factor in a first trimester trophoblast cell line // Placenta. 2000. Vol. 21, N 4. P. 320-324.
18.           Chung J.Y., Song Y., Wang Y., Magness R.R., Zheng J. Differential expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), endocrine gland derived-VEGF, and VEGF receptors in human placentas from normal andpreeclamptic pregnancies // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. Vol. 89, N 5. P. 2484-2490.
19.           Cines D.B., Pollak E.S., Buck C.A., Loscalzo J., Zimmerman G.A., McEver R.P., Pober J.S., Wick T.M., Konkle B.A., Schwartz B.S., Barnathan E.S., McCrae K.R., Hug B.A., Schmidt A.M., Stern D.M. Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vasculardisorders // Blood. 1998. Vol. 91, N 10. P. 3527-3561.
20.           Cooper J.C., Sharkey A.M., McLaren J., Charnock-Jones D.S., Smith S.K. Localization of vascular endothelial growth factor and its receptor, flt, in human placenta and decidua by immunohistochemistry // J. Reprod. Fertil. 1995. Vol. 105, N 2. P. 205-213.
21.           Crocker I.P., Wareing M., Ferris G.R., Jones C.J., Cartwright J.E., Baker P.N., Aplin J.D. The effect of vascular origin, oxygen, and tumour necrosis factor alpha ontrophoblast invasion of maternal arteries in vitro // J. Pathol. 2005. Vol. 206, N 4. P. 476-485.
22.           De Oliveira L.G., Lash G.E., Murray-Dunning C., Bulmer J.N., Innes B.A., Searle R.F., Sass N., Robson S.C. Role of interleukin 8 in uterine natural killer cell regulation of extravillous trophoblast cell invasion // Placenta. 2010. Vol. 31, N 7. P. 595-601.
23.           Di Blasio A.M., Carniti C., Vigano P., Florio P., Petraglia F., Vignali M. Basic fibroblast growth factor messenger ribonucleic acid levels in human placentas from normal and pathological pregnancies // Mol. Hum. Reprod. 1997. Vol. 3, N 12. P. 1119-1123.
24.           Dickson M.C., Martin J.S., Cousins F.M., Kulkarni A.B., Karlsson S., Akhurst R.J. Defective haematopoiesis and vasculogenesis in transforming growth factor-beta 1 knock out mice // Development. 1995. Vol. 121, N 6. P. 1845-1854.
25.           Distler J.H., Hirth A., Kurowska-Stolarska M., Gay R.E., Gay S., Distler O. Angiogenic and angiostatic factors in the molecular control of angiogenesis // Q. J. Nucl. Med. 2003. Vol. 47, N 3. P. 149-161.
26.           Dunk C., Petkovic L., Baczyk D., Rossant J., Winterhager E., Lye S. A novel in vitro model of trophoblast-mediated decidual blood vessel remodeling // Lab. Invest. 2003. Vol. 83, N 12. P. 1821-1828.
27.           Edgell C.J., McDonald C.C., Graham J.B. Permanent cell line expressing human factor VIII-related antigen established by hybridization // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1983. Vol. 80, N 12. P. 3734-3737.
28.           Fajardo L.F., Kwan H.H., Kowalski J., Prionas S.D., Allison A.C. Dual role of tumor necrosis factor-alpha in angiogenesis // Am. J. Pathol. 1992. Vol. 140, N 3. P. 539-544.
29.           Fukushi J., Morisaki T., Shono T., Nishie A., Torisu H., Ono M., Kuwano M. Novel biological functions of interleukin-4: formation of tube-like structures by vascular endothelial cells in vitro and angiogenesis in vivo // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. Vol. 250, N 2. P. 444-448.
30.           Fukushima K., Miyamoto S., Komatsu H., Tsukimori K., Kobayashi H., Seki H., Takeda S., Nakano H. TNFalpha-induced apoptosis and integrin switching in human extravillous trophoblast cell line // Biol. Reprod. 2003. Vol. 68, N 5. P. 1771‑1778.
31.           Grant D.S., Kinsella J.L., Kibbey M.C., LaFlamme S., Burbelo P.D., Goldstein A.L., Kleinman H.K. Matrigel induces thymosin beta 4 gene in differentiating endothelial cells // J. Cell Sci. 1995. Vol. 108, Pt 12. P. 3685-3694.
32.           Gude N.M., Roberts C.T., Kalionis B., King R.G. Growth and function of the normal human placenta // Thromb. Res. 2004. Vol. 114, N 5-6. P. 397-407.
33.           Hanna N., Bonifacio L., Reddy P., Hanna I., Weinberger B., Murphy S., Laskin D., Sharma S. IFN-gamma-mediated inhibition of COX-2 expression in the placenta from termand preterm labor pregnancies // Am. J. Reprod. Immunol. 2004. Vol. 51, N 4. P. 311-318.
34.           Hanna N., Bonifacio L., Weinberger B., Reddy P., Murphy S., Romero R., Sharma S. Evidence for interleukin-10-mediated inhibition of cyclo- oxygenase-2 expression and prostaglandin production in preterm human placenta // Am. J. Reprod. Immunol. 2006. Vol. 55, N 1. P. 19-27.
35.           Heikkinen J., Möttönen M., Komi J., Alanen A., Lassila O. Phenotypic characterization of human decidual macrophages // Clin. Exp. Immunol. 2003. Vol. 131, N 3. P. 498‑505.
36.           Huang H., Lavoie-Lamoureux A., Moran K., Lavoie J.P. IL-4 stimulates the expression of CXCL-8, E-selectin, VEGF, and inducible nitricoxide synthase mRNA by equine pulmonary artery endothelial cells // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2007. Vol. 292, N 5. P. L1147-L1154.
37.           Hughes C.S., Postovit L.M., Lajoie G.A. Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture // Proteomics. 2010. Vol. 10, N 9. P. 1886-1890.
38.           Jackson C.J., Nguyen M. Human microvascular endothelial cells differ from macrovascular endothelial cells in their expression of matrix metalloproteinases // Int. J. Biochem. Cell Biol. 1997. Vol. 29, N 10. P. 1167-1177.
39.           Jovanovic M., Stefanoska I., Radojcic L., Vicovac L. Interleukin-8 (CXCL8) stimulates trophoblast cell migration and invasion by increasing levels of matrix metalloproteinase (MMP) 2 and MMP9 and integrins alpha5 and beta1 // Reproduction. 2010. Vol. 139, N 4. P. 789-798.
40.           Jovanovic M., Vicovac L. Interleukin-6 stimulates cell migration, invasion and integrin expression in HTR-8/Svneo cell line // Placenta. 2009. Vol. 30, N 4. P. 320-328.
41.           Kalkunte S., Lai Z., Tewari N.,
Chichester C., Romero R., Padbury J., Sharma S. In vitro and in vivo evidence for lack of endovascular remodeling by third trimester trophoblasts // Placenta. 2008. Vol. 29, N 10. P. 871-878.
42.           Kalkunte S.S., Mselle T.F., Norris W.E., Wira C.R., Sentman C.L., Sharma S. Vascular endothelial growth factor C facilitates immune tolerance and endovascular activity of human uterine NK cells at the maternal-fetal interface // J. Immunol. 2009. Vol. 182, N 7. P. 4085-4092.
43.           Karmakar S., Dhar R., Das C. Inhibition of cytotrophoblastic (JEG-3) cell invasion by interleukin 12 involves an interferon gamma-mediated pathway // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279, N 53. P. 55 297-55 307.
44.           Kaufmann P., Black S., Huppertz B. Endovascular trophoblast invasion: implications for the pathogenesis of intrauterine growth retardation and preeclampsia // Biol. Reprod. 2003. Vol. 69, N 1. P. 1-7.
45.           Keogh R.J., Harris L.K., Freeman A., Baker P.N., Aplin J.D., Whitley G.S., Cartwright J.E. Fetal-derived trophoblast use the apoptotic cytokine tumor necrosis factor-alpha-related apoptosis-inducing ligand to induce smooth muscle cell death // Circ. Res. 2007. Vol. 100, N 6. P. 834-841.
46.           Kharfi A., Giguere Y., Sapin V., Masse J., Dastugue B., Forest J.C. Trophoblastic remodeling in normal and preeclamptic pregnancies: implicationof cytokines // Clin. Biochem. 2003. Vol. 36, N 5. P. 323-331.
47.           Kingdom J., Huppertz B., Seaward G., Kaufmann P. Development of the placental villous tree and its consequences for fetal growth // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2000. Vol. 92, N 1. P. 35-43.
48.           Kleinman H.K., Martin G.R. Matrigel: basement membrane matrix with biological activity // Semin. Cancer Biol. 2005. Vol. 15, N 5. P. 378-386.
49.           Kohler P.O., Bridson W.E. Isolation of hormone-producing clonal lines of human choriocarcinoma // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1971. Vol. 32, N 5. P. 683-687.
50.           Lash G.E., Otun H.A., Innes B.A., Kirkley M., De Oliveira L., Searle R.F., Robson S.C., Bulmer J.N. Interferon-gamma inhibits extravillous trophoblast cell invasion by amechanism that involves both changes in apoptosis and protease levels // FASEB J. 2006. Vol. 20, N 14. P. 2512-2518.
51.           Li A., Dubey S., Varney M.L., Dave B.J., Singh R.K. IL-8 directly enhanced endothelial cell survival, proliferation, and matrix metalloproteinases production and regulated angiogenesis // J. Immunol. 2003. Vol. 170, N 6. P. 3369-3376.
52.           Li A., Varney M.L., Valasek J., Godfrey M., Dave B.J., Singh R.K. Autocrine role of interleukin-8 in induction of endothelial cell proliferation,survival, migration and MMP-2 production and angiogenesis // Angiogenesis. 2005. Vol. 8, N 1. P. 63-71.
53.           Liu X., Sun J. Potential proinflammatory effects of hydroxyapatite nanoparticles on endothelial cells in a monocyte-endothelial cell coculture model // Int. J. Nanomedicine. 2014. Vol. 9. P. 1261-1273.
54.           Mizuno M., Aoki K., Kimbara T. Functions of macrophages in human decidual tissue in early pregnancy // Am. J. Reprod. Immunol. 1994. Vol. 31, N 4. P. 180-188.
55.           Murphy S.P., Tayade C., Ashkar A.A., Hatta K., Zhang J., Croy B.A. Interferon gamma in successful pregnancies // Biol. Reprod. 2009. Vol. 80, N 5. P. 848-859.
56.           Nagy J.A., Dvorak A.M., Dvorak H.F. VEGF-A(164/165) and PlGF: roles in angiogenesis and arteriogenesis // Trends Cardiovasc. Med. 2003. Vol. 13, N 5. P. 169-175.
57.           Papetti M., Herman I.M. Mechanisms of normal and tumor-derived angiogenesis // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2002. Vol. 282, N 5. P. C947-C970.
58.           Pepper M.S. Transforming growth factor-beta: vasculogenesis, angiogenesis, and vessel wall integrity // Cytokine Growth Factor Rev. 1997. Vol. 8, N 1. P. 21-43.
59.           Perrella M.A., Jain M.K., Lee M.E. Role of TGF-beta in vascular development and vascular reactivity // Miner. Electrolyte Metab. 1998. Vol. 24, N 2-3. P. 136-143.
60.           Pongcharoen S., Somran J., Sritippayawan S., Niumsup P., Chanchan P., Butkhamchot P., Tatiwat P., Kunngurn S., Searle R.F. Interleukin-17 expression in the human placenta // Placenta. 2007. Vol. 28, N 1. P. 59-63.
61.           Pontillo A., Girardelli M., Agostinis C., Masat E., Bulla R., Crovella S. Bacterial LPS differently modulates inflammasome gene expression and IL-1bsecretion in trophoblast cells, decidual stromal cells, and decidual endothelialcells // Reprod. Sci. 2013. Vol. 20, N 5. P. 563-566.
62.           Saito S., Kasahara T., Sakakura S., Umekage H., Harada N., Ichijo M. Detection and localization of interleukin-8 mRNA and protein in human placenta and decidual tissues // J. Reprod. Immunol. 1994. Vol. 27, N 3. P. 161-172.
63.           Shimoya K., Matsuzaki N., Taniguchi T., Kameda T., Koyama M., Neki R., Saji F., Tanizawa O. Human placenta constitutively produces interleukin-8 during pregnancy andenhances its production in intrauterine infection // Biol. Reprod. 1992. Vol. 47, N 2. P. 220-226.
64.           Sica A., Matsushima K., Van Damme J., Wang J.M., Polentarutti N., Dejana E., Colotta F., Mantovani A. IL-1 transcriptionally activates the neutrophil chemotactic factor/IL-8 gene in endothelial cells // Immunology. 1990. Vol. 69, N 4. P. 548-553.
65.           Silvestre J.S., Mallat Z., Tamarat R., Duriez M., Tedgui A., Levy B.I. Regulation of matrix metalloproteinase activity in ischemic tissue by interleukin-10: role in ischemia-induced angiogenesis // Circ. Res. 2001. Vol. 89, N 3. P. 259-264.
66.           Stallmach T., Hebisch G., Joller-Jemelka H.I., Orban P., Schwaller J., Engelmann M. Cytokine production and visualized effects in the feto-maternal unit. Quantitative and topographic data on cytokines during intrauterine disease // Lab. Invest. 1995. Vol. 73, N 3. P. 384-392.
67.           Staun-Ram E., Shalev E. Human trophoblast function during the implantation process // Reprod. Biol. Endocrinol. 2005. Vol. 3. P. 56.
68.           Suzuki Y., Tada-Oikawa S.,
Ichihara G., Yabata M., Izuoka K., Suzuki M., Sakai K., Ichihara S. Zinc oxide nanoparticles induce migration and adhesion of monocytes toendothelial cells and accelerate foam cell formation // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2014. Vol. 278, N 1. P. 16-25.
69.           Thaxton J.E., Sharma S. Interleukin-10: a multi-faceted agent of pregnancy // Am. J. Reprod. Immunol. 2010. Vol. 63, N 6. P. 482-491.
70.           Todt J.C., Yang Y., Lei J., Lauria M.R., Sorokin Y., Cotton D.B., Yelian F.D. Effects of tumor necrosis factor-alpha on human trophoblast cell adhesion andmotility // Am. J. Reprod. Immunol. 1996. Vol. 36, N 2. P. 65-71.
71.           Vailhe B., Vittet D., Feige J.J. In vitro models of vasculogenesis and angiogenesis // Lab. Invest. 2001. Vol. 81, N 4. P. 439-452.
72.           Voronov E., Carmi Y., Apte R.N. The role IL-1 in tumor-mediated angiogenesis // Front. Physiol. 2014. Vol. 5. P. 114. doi: 10.3389/fphys.2014.00114.
73.           Wallace A.E., Fraser R., Cartwright J.E. Extravillous trophoblast and decidual natural killer cells: a remodelling partnership // Hum. Reprod. Update. 2012. Vol. 18, N 4. P. 458-471.
74.           Wu X., Jin L.P., Yuan M.M., Zhu Y., Wang M.Y., Li D.J. Human first-trimester trophoblast cells recruit CD56brightCD16- NK cells into decidua by way of expressing and secreting of CXCL12/stromal cell-derived factor 1 // J. Immunol. 2005. Vol. 175, N 1. P. 61-68.
75.           Xu B., Charlton F., Makris A., Hennessy A. Nitric oxide (NO) reversed TNF-a inhibition of trophoblast interaction with endothelial cellular networks // Placenta. 2014. Vol. 35, N 6. P. 417-421.
76.           Xu B., Nakhla S., Makris A., Hennessy A. TNF-
a inhibits trophoblast integration into endothelial cellular networks // Placenta. 2011. Vol. 32, N 3. P. 241-246.
77.           Zhao M.R., Qiu W., Li Y.X., Zhang Z.B., Li D., Wang Y.L. Dual effect of transforming growth factor beta1 on cell adhesion and invasion in human placenta trophoblast cells // Reproduction.
2006. Vol. 132, N 2. P. 333-341.

Токсическое влияние наноструктурированных частиц диоксида кремния на мультипотентные мезенхимные стволовые клетки
А.П.Лыков*,***, Ю.А.Лыкова**, О.В.Повещенко*,***, Н.А.Бондаренко*,***, М.А.Суровцева*,***, Н.П.Бгатова*, В.И.Коненков* – 51
*ФГБНУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии, Новосибирск, РФ; **ФГБОУ ВО Новосибирский государственный технический университет, Новосибирск, РФ; ***ФГБУ Новосибирский НИИ патологии кровообращения им. акад. Е.Н.Мешалкина, Новосибирск, РФ
Исследовано влияние наноструктурированных частиц диоксида кремния на функциональную активность и ультраструктуру мультипотентных мезенхимных стволовых клеток крысы. Показано дозозависимое снижение адгезии клеток к пластику, уменьшение пролиферативного потенциала клеток, увеличение апоптотических клеток, снижение электронной плотности цитоплазмы клеток за счет их набухания и дистрофических изменений органелл, а также увеличение внутриклеточного содержания наноструктурированных частиц диоксида кремния.
Ключевые слова: наночастицы диоксида кремния, мезенхимные стволовые клетки, адгезия, токсический эффект
Адрес для корреспонденции:
aplykov2@mail.ru. Лыков А.П.
Литература
1.             Душкин А.В., Лыков А.П., Ларина О.Н., Гольдина И.А., Сафронова И.В., Гуськов С.А., Евсеенко В.И., Гайдуль К.В., Ляхов Н.З., Козлов В.А. Сравнительная характеристика антимикробной активности механохимически модифицированных и сорбированных на наноструктурированных частицах диоксида кремния форм цефтазидима на примере экспериментального сепсиса у мышей (CBA*C57BL/6)F1, индуцированного Pseudomonas aeruginosa // Фундаментальные исследования. 2012. № 4-1. С. 47-52.
2.             Лыков А.П., Гайдуль К.В., Коненков В.И. Комплекс антибактериальных препаратов с наночастицами диоксида кремния для направленной доставки лекарственных веществ (обзор) // Биофарм. журнал. 2012. Т. 4, № 6. С. 3-12.
3.             Лыков А.П., Коненков В.И., Гайдуль К.В., Повещенко О.В., Гольдина И.А., Душкин А.В., Козлов В.А. Антимикробная активность механомодифицированных иммобилизованных на наноструктурированных частицах диоксида кремния антибиотиков // Биофарм. журнал.
2013. Т. 5, № 1. С. 13-20.
4.             Cao B., Yang M., Zhu Y., Qu X., Mao C. Stem cells loaded with nanoparticles as a drug carrier for in vivo breast cancer therapy // Adv. Mater. 2014. Vol. 26, N 27. P. 4627-4631.
5.             Ha S.W., Sikorski J.A., Weitzmann M.N., Beck G.R. Jr. Bio-active engineered 50 nm silica nanoparticles with bone anabolic activity: therapeutic index, effective concentration, and cytotoxicity profile in vitro // Toxicol. In Vitro. 2014. Vol. 28, N 3. P. 354-364.
6.             Kim K.J., Joe Y.A., Kim M.K., Lee S.J., Ryu Y.H., Cho D.W., Rhie J.W. Silica nanoparticles increase human adipose tissue-derived stem cell proliferation through ERK1/2 activation // Int. J. Nanomedicine. 2015. Vol. 10. P. 2261-2272.
7.             Li L., Guan Y., Liu H., Hao N., Liu T., Meng X., Fu C., Li Y., Qu Q., Zhang Y., Ji S., Chen L., Chen D., Tang F. Silica nanorattle-doxorubicin-anchored mesenchymal stem cells for tumor-tropic therapy // ACS Nano. 2011. Vol. 5, N 9. P. 7462-7470.
8.             Seleem M.N., Munusamy P., Ranjan A., Alqublan H., Pickrell G., Sriranganathan N. Silica-antibiotic hybrid nanoparticles for targeting intracellular pathogens // Antimicrob. Agents Chemother. 2009. Vol. 53, N 10. P. 4270-4274.
9.             Periasamy V.S., Athinarayanan J., Akbarsha M.A., Alshatwi A.A. Silica nanoparticles induced metabolic stress through EGR1, CCND, and E2F1 genes in human mesenchymal stem cells // Appl. Biochem. Biotechnol. 2015. Vol. 175, N 2. P. 1181-1192.
10.           Liu X., Sun J. Endothelial cells dysfunction induced by silica nanoparticles through oxidative stress via JNK/P53 and NF‑kappaB pathways // Biomaterials.
2010. Vol. 31, N 32. P. 8198-8209.

высокий калий: норма или экстремальная ситуация при культивировании ранних эмбрионов млекопитающих
А.Г.Погорелов*, А.А.Смирнов, В.Н.Погорелова – 55
ФГБУН Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино, РФ
Приводятся данные анализа элементного состава жидкости в просвете яйцевода и матки млекопитающих, которые показывают наличие высокого содержания ионов калия в среде, окружающей ранний эмбрион in vivo. Рассматриваются результаты раннего эмбриогенеза млекопитающих in vitro на фоне высокого уровня ка­лия. Материал систематизирован в соответствии с условиями экспериментального моделирования предимплантационного развития. Сравнительная оценка качества развития эмбриона до стадии бластоцисты in vitro свидетельствует о более успешном развитии в среде, содержащей калий в концентрации, близкой к регистрируемой в жидкости просвета яйцевода.
Ключевые слова: доимплантационный эмбриогенез, калий, ранний эмбрион млекопитающих, культивирование клетки in vitro
Адрес для корреспонденции:
agpogorelov@rambler.ru. Погорелов А.Г.
Литература
1.             Гольдштейн Д.В., Погорелов А.Г., Чайлахян Т.А., Смирнов А.А. Изменение внутриклеточной концентрации калия в одноклеточном эмбрионе мыши после энуклеа­ции // Бюл. экспер. биол. 2004. Т. 138, № 9. С. 275-276.
2.             Гольдштейн Д.В., Смольянинова Е.И., Погорелов А.Г. Анализ калия в бластомере двухклеточного эмбриона мыши после эквилибрации и отмывки криопротектора // Бюл. экспер. биол. 2004. Т. 137, № 7. С. 48-49.
3.             Погорелова М.А., Голиченков В.А., Погорелова В.Н., Панаит А.И., Смирнов А.А., Погорелов А.Г. Аминокислотная коррекция компенсаторного ответа на гипотонический стресс у ооцита мыши in vitro // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 1. С. 43-45.
4.             Погорелов А.Г., Смирнов А.А., Погорелова В.Н. Гипоксия в условиях доимплантационного эмбриогенеза млекопитающих: экстремальная ситуация или норма // Онтогенез.
2016. Т. 47, № 2. С. 117-121.
5.             Appel S.H., Autilio L., Festoff B.W., Escueta A.V. Biochemical studies of synapses in vitro. 3. Ionic activation of protein synthesis // J. Biol. Chem. 1969. Vol. 244, N 12 P. 3166-3172.
6.             Baltz J.M., Smith S.S., Biggers J.D., Lechene C. Intracellular ion concentrations and their maintenance by Na+/K(+)-ATPase in preimplantation mouse embryos // Zygote. 1997. Vol. 5, N 1. P. 1-9.
7.             Biggers J.D. Pioneering mammalian embryo culture // Mammalian Preimplantaion Embryo / Ed. B.D.Bavister. N.Y., 1987. P. 1-22.
8.             Biggers J.D. Reflections on the culture of the preimplantation embryo // Int. J. Dev. Biol. 1998. Vol. 42, N 7. P. 879-884.
9.             Biggers J.D. Brinster R.L. Biometrical problems in the study of early mammalian embryos in vitro // J. Exp. Zool. 1965. Vol. 158. P. 39-47.
10.           Biggers J.D., Gwatkin R.B., Brinster R.L. Development of mouse embryos in organ cultures of fallopian tubes on a chemically defined medium // Nature. 1962. Vol. 194. P. 747-749.
11.           Borland R.M., Biggers J.D., Lechene C.P., Taymor M.L. Elemental composition of fluid in the human Fallopian tube // J. Reprod. Fertil. 1980. Vol. 58, N 2. P. 479-482
12.           Borland R.M., Hazra S., Biggers J.D., Lechene C.P. The elemental composition of the environments of the gametes and preimplantation embryo during the initiation of pregnancy // Biol. Reprod. 1977. Vol. 16, N 2. P. 147-157.
13.           Bowman P., McLaren A. Cleavage rate of mouse embryos in vivo and in vitro // J. Embryol. Exp. Morphol. 1970. Vol. 24, N 1. P. 203-207.
14.           Brinster R.L. A method for in vitro cultivation of mouse ova from two-cell to blastocyst // Exp. Cell Res. 1963. Vol. 32. P. 205-208.
15.           Brinster R.L. Cultivation of the mammalian embryo // Growth, Nutrition and Metabolism of Cells in Culture / Eds. G.Rothblat, V.Cristofalo. N.Y., 1972. Vol. II. P. 251-286.
16.           Brinster R.L., Thomson J.L. Development of eight-cell mouse embryos in vitro // Exp. Cell Res. 1966. Vol. 42, N 2. P. 308-315.
17.           Busa W.B., Nuccitelli R. Metabolic regulation via intracellular pH // Am. J. Physiol. 1984. Vol. 246, N4, Pt 2. P. R409-R438.
18.           Chang M.C. Development and fate of transferred rabbit ova or blastocyst in relation to the ovulation time of recipients // J. Exp. Zool. 1950. Vol. 114, N 1. P. 197-225.
19.           Chang M.C. Fertilization of rabbit ova in vitro // Nature. 1959. Vol. 184, Suppl. 7. P. 466-467.
20.           Chatot C.L., Ziomek
C.A., Bavister B.D., Lewis J.L., Torres I. An improved culture medium supports development of random-bred 1-cell mouse embryos in vitro // J. Reprod. Fertil. 1989. Vol. 86, N 2. P. 679-688.
21.           Cohen
I., Daut J., Noble D. An analysis of the actions of low concentrations of ouabain on membrane currents in Purkinje fibres // J. Physiol. 1976. Vol. 260, N 1. P. 75-103.
22.           David A., Brackett B.G., Garcia C.R., Mastroianni L.Jr. Composition of rabbit oviduct fluid in ligated segments of the Fallopian tube // J. Reprod. Fertil. 1969. Vol. 19, N 2. P. 285-289.
23.           David A., Serr D.M., Czernobilsky B. Chemical composition of human oviduct fluid // Fertil. Steril. 1973. Vol. 24, N 6. P. 435‑439.
24.           Dott H.M., White I.G. Effect of potassium on ram spermatozoa studied by a flow dialysis technique // J. Reprod. Fertil. 1964. Vol. 7. P. 127-138.
25.           Dumoulin J.C., Evers J.L., Bras M., Pieters M.H., Geraedts J.P. Positive effect of taurine on preimplantation development of mouse embryos in vitro // J. Reprod. Fertil. 1992. Vol. 94, N 2. P. 373-380.
26.           Dumoulin J.C., Evers J.L., Michiels A.H., Pieters M.H., Bras M., Land J.A., Geraedts J.P. Modulation of embryonic Na(+)-K(+)-ATPase activity and mouse preimplantation development in vitro in media containing high concentrations of potassium // Mol. Reprod. Dev. 1993. Vol. 36, N 3. P. 320-327.
27.           Eagle H. Amino acid metabolism in mammalian cell cultures // Science. 1959. Vol. 130. P. 432-437.
28.           Elsheikh A.S., Takahashi Y.,
Nagano M., Kanagawa H. Manipulated mouse embryos as bioassay system for water quality control // Reprod. Domest. Anim. 2003. Vol. 38, N 3. P. 204-208.
29.           Fleetham J., Mahadevan M.M. Purification of water for in vitro fertilization and embryo transfer // J. In Vitro Fert. Embryo Transf. 1988. Vol. 5, N 3. P. 171-174.
30.           Fukuda A., Noda Y., Tsukui S., Matsumoto H., Yano J., Mori T. Influence of water quality on in vitro fertilization and embryo development for the mouse // J. In Vitro Fert. Embryo Transf. 1987. Vol. 4, N 1. P. 40-45.
31.           Heap R.B. Some chemical constituents of uterine washings: a method of analysis with results from various species // J. Endocrinol. 1962. Vol. 24. P. 367-378.
32.           Ho Y., Wigglesworth K., Eppig J.J., Schultz R.M. Preimplantation development of mouse embryos in KSOM: augmentation by amino acids and analysis of gene expression // Mol. Reprod. Dev. 1995. 41, N 2. P. 232-238.
33.           Howard E., De Feo V.J. Potassium and sodium content of uterine and seminal vesicle secretions // Am. J. Physiol. 1959. Vol. 196, N 1. P. 65-68.
34.           Iritani A., Nishikawa Y., Gomes W.R., VanDemark N.L. Secretion rates and chemical composition of oviduct and uterine fluids in rabbits // J. Anim. Sci. 1971. Vol. 33, N 4. P. 829-835.
35.           Kaplan J.D. Membrane cation transport and the control of proliferation of mammalian cells // Annu. Rev. Physiol. 1978. Vol. 40. P. 19-41.
36.           Kim N.H., Menino A.R.Jr. Effect of different concentrations of potassium on pig embryos developing in vitro // J. Reprod. Fertil. 1997. Vol. 111, N 2. P. 229-233.
37.           Lawitts J.A., Biggers J.D. Culture of preimplantation embryos // Methods in Enzimology: Guide to techniques in mouse development / Eds. P.M.Wassarman, M.L.DePamphilis. N.Y., 1993. Vol. 225. P. 153-164.
38.           Lechene C. The use of electron microprobe to analyse very minute amounts of liquor samples // Proc. 5th Nat. Conf. Electron Probe Analysis. N.Y., 1970. P. 32A-32C.
39.           Lechene C. Electron probe microanalysis of picoliter liquid samples // Microprobe analysis as applied to cells and tissues / Eds T.Hall, P.Echlin, R.Kaufmann. N.Y., 1974. P. 351-368.
40.           Lechene C., Morel F., Guinnebault M., De Rouffignac C. Micropuncture study of urine formation. I. In the rat during various diuretic states // Nephron. 1969. Vol. 6, N 4. P. 457-477.
41.           Levin R.J., Edwards F. The transuterine endometrial potential difference, its variation during the oestrous cycle and its relation to uterine secretion // Life Sci. 1968. Vol. 7, N 19. P. 1019-1036.
42.           Lippes J., Enders R.G., Pragay D.A., Bartholomew W.R. The collection and analysis of human fallopian tubal fluid // Contraception. 1972. Vol. 5, N 2. P. 85-103.
43.           Manejwala F.M., Cragoe E.J.Jr, Schultz R.M. Blastocoel expansion in the preimplantation mouse embryo: role of extracellular sodium and chloride and possible apical routes of their entry // Dev. Biol. 1989. Vol. 133, N 1. P. 210-220.
44.           Mastroianni L.Jr.,Wallach R.C. Effect of ovulation and early gestation on ovi-duct secretions in the rabbit // Am. J. Physiol. 1961. Vol. 200. P. 815-818.
45.           McLaren A., Biggers J.D. Successful development and birth of mice cultivated in vitro as early as early embryos // Nature. 1958. Vol. 182. P. 877-878.
46.           Mintz B. Mammalian embryo culture // Methods in Developmental Biology / Eds. F.H.Wilt, N.K.Wessells. N.Y., 1967. P. 379-400.
47.           Nagao Y., Saeki K., Hoshi M., Takahashi Y., Kanagawa H. Effects of water quality on in vitro fertilization and development of bovine oocytes in protein-free medium // Theriogenology. 1995. Vol. 44, N 3. P. 433-444.
48.           Pogorelov A.G., Katkov I.I., Pogorelova V.N. Influence of exposure to vitrification solutions on 2-cell mouse embryos: I. Intracellular potassium and sodium content // Cryo Letters. 2007. Vol. 28, N 6. P. 403-408.
49.           Pogorelov A.G., Katkov I.I., Smolyaninova E.I., Goldshtein D.V. Changes in intracellular potassium and sodium content of 2-cell mouse embryos induced by exposition to vitrification concentrations of ethylene glycol // Cryo Letters. 2006. Vol. 27, N 2. P. 87-98.
50.           Powers R.D., Tupper J.T. Developmental changes in membrane transport and permeability in the early mouse embryo // Dev. Biol. 1977. Vol. 56, N 2. P. 306-315.
51.           Purshottam N., Pincus G. In vitro cultivation of mammalian eggs // Anat. Rec. 1961. Vol. 140. P. 51-55.
52.           Quinn P,. Barros C., Whittingham D.G. Preservation of hamster oocytes to assay the fertilizing capacity of human spermatozoa // J. Reprod. Fertil. 1982. Vol. 66, N 1. P. 161-168.
53.           Ringler I. The composition of rat uterine luminal fluid // Endocrinology. 1961. Vol. 68. P. 281-291.
54.           Roblero L., Biggers J.D., Lechene C.P. Electron probe analysis of the elemental microenvironment of oviducal mouse embryos // J. Reprod. Fertil. 1976. Vol. 46, N 2. P. 431-434.
55.           Roblero L., Riffo M.D. High potassium concentration improves preimplantation development of mouse embryos in vitro // Fertil. Steril. 1986. Vol. 45, N 3. P. 412-416.
56.           Rozengurt E., Heppel L.A. Serum rapidly stimulates ouabain-sensitive 86-RB+ influx in quiescent 3T3 cells // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1975. Vol. 72, N 11. P. 4492-4495.
57.           Scholnick P., Lang D., Racker E. Regulatory mechanisms in carbohydrate metabolism. IX. Stimulation of aerobic glycolysis by energy-linked ion transport and inhibition by dextran sulfate // J. Biol. Chem. 1973. Vol. 248, N 14. P. 5175.
58.           Schwarts A., Lindenmayer G.E., Allen J.C. The Na+-, K+-ATPase membrane transport system. Its importance in cellular function // Current topics in membranes and transport / Eds. F.Bronner, A.Kleinzeller. N.Y., 1972. Vol. 3. P. 1-82.
59.           Summers M.C., Bhatnagar P.R., Lawitts J.A., Biggers J.D. Fertilization in vitro of mouse ova from inbred and outbred strains: complete preimplantation embryo development in glucose-supplemented KSOM // Biol. Reprod. 1995. Vol. 53, N 2. P. 431-437.
60.           Summers M.C., McGinnis L.K., Lawitts J.A., Raffin M., Biggers J.D. IVF of mouse ova in a simplex optimized medium supplemented with amino acids // Hum. Reprod. 2000. Vol. 15, N 8. P. 1791-1801.
61.           Toyoda Y., Chang M.C. Capacitation of epididymal spermatozoa in a medium with high K-Na ratio and cyclic AMP for the fertilization of rat eggs in vitro // J. Reprod. Fertil. 1974. Vol. 36, N 1. P. 125-134.
62.           Van Winkle L.J., Campione A.L. Ouabain-sensitive Rb+ uptake in mouse eggs and preimplantation conceptuses // Dev. Biol. 1991. Vol. 146, N 1. P. 158-166.
63.           Wales R.G., O’Shea T. The oxidative utilization of fructose and acetate by washed ram spermatozoa in the presence or absence of potassium and magnesium // Aust. J. Biol. Sci. 1966. Vol. 19, N 1. P. 167-180.
64.           Wallace J.C.,
Wales R.G. Effect of ions on the metabolism of ejaculated and epididymal ram spermatozoa // J. Reprod. Fertil. 1964. Vol. 8. P. 187-203.
65.           Watson A.J., Kidder G.M. Immunofluorescence assessment of the timing of appearance and cellular distribution of Na/K-ATPase during mouse embryogenesis // Dev. Biol. 1988. Vol. 126, N 1. P. 80-90.
66.           Whitten W.K. Culture of tubal mouse ova // Nature. 1956. Vol. 177. P. 96.
67.           Whittingham D.G. Culture of mouse ova // J. Reprod. Fertil. Suppl. 1971. Vol. 14. P. 7-21.
68.           Wiley L.M. Cavitation in the mouse preimplantation embryo: Na/K-ATPase and the origin of nascent blastocoele fluid // Dev. Biol. 1984. Vol. 105, N 2. P. 330-342.
69.           Wiley L.M., Yamami S., Van Muyden D. Effect of potassium concentration, type of protein supplement, and embryo density on mouse preimplantation development in vitro // Fertil.
Steril. 1986. Vol. 45, N 1. P. 111-119.

Продукция цитокинов в смешанных культурах мезенхимных стромальных клеток вартонова студня и лимфоцитов периферической крови
А.М.Полтавцев, Р.А.Полтавцева*, М.Н.Юшина*, Н.Е.Волгина, Е.В.Свирщевская** – 61
ФГБУН Институт прикладной механики РАН, Москва, РФ; *ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва; **ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ
Проведено сравнительное исследование продукции 19 гуморальных факторов в смешанных культурах мезенхимных стромальных клеток из вартонова студня и лимфоцитов периферической крови, полученных от гетерологичного донора. Для оценки специфичности иммуносупрессорной активности мезенхимных стромальных клеток проводили сравнение продукции гуморальных факторов в смешанных культурах лимфоцитов и эпителиальных клеток линии BxPC-3. Как в моно-, так и в смешанных культурах продукция факторов значительно коррелировала (p<0.05). Основными продуцируемыми факторами были провоспалительный хемокин IP-10 и цитокин ИФН-
g, а также противовоспалительный ИЛ-10. Основным отличием мезенхимных стромальных клеток от эпителиальных клеток линии BxPC-3 являлась повышенная в 7 раз продукция ИЛ-10, что может объяснить супрессорный эффект мезенхимных стромальных клеток.
Ключевые слова: мезенхимные стромальные клетки, смешанные культуры, лимфоциты периферической крови, цитокины
Адрес для корреспонденции:
esvir@mx.ibch.ru. Свирщевская Е.В.
Литература
1.             Свирщевская Е.В., Полтавцева Р.А., Белецкий И.П., Селезнева И.И., Савилова А.М., Сухих Г.Т. Взаимодействие лимфоцитов с мезенхимными стволовыми клетками // Клет. технол. в биол. и мед. 2016. № 2. С. 91-100.
2.             Свирщевская Е.В., Полтавцева Р.А., Белецкий И.П., Селезнёва И.И., Сухих Г.Т. Антипролиферативное действие мезенхимных стволовых клеток и эпителиальных клеток на лимфоциты // Бюл. экспер. биол.
2016. Т. 161, № 4. С. 508-512.
3.             Abe M., Kondo T., Xu H., Fairchild R.L. Interferon-gamma inducible protein (IP-10) expression is mediated by CD8+ T cells and is regulated by CD4+ T cells during the elicitation of contact hypersensitivity // J. Invest. Dermatol. 1996. Vol. 107, N 3. P. 360-366.
4.             Ciccocioppo R., Cangemi G.C., Kruzliak P., Gallia A., Betti E., Badulli C., Martinetti M., Cervio M., Pecci A., Bozzi V., Dionigi P., Visai L., Gurrado A., Alvisi C., Picone C., Monti M., Bernardo M.E., Gobbi P., Corazza G.R. Ex vivo immunosuppressive effects of mesenchymal stem cells on Crohn’s disease mucosal T cells are largely dependent on indoleamine 2,3-dioxygenase activity and cell-cell contact // Stem Cell Res. Ther. 2015. Vol. 6. P. 137. doi: 10.1186/s13287-015-0122-1.
5.             DelaRosa O., Lombardo E., Beraza A., Mancheño-Corvo P., Ramirez C., Menta R., Rico L., Camarillo E., García L., Abad J.L., Trigueros C., Delgado M., Büscher D. Requirement of IFN-gamma-mediated indoleamine 2,3-dioxygenase expression in the modulation of lymphocyte proliferation by human adipose-derived stem cells // Tissue Eng. Part A. 2009. Vol. 15, N 10. P. 2795-2806.
6.             De Veirman K., Wang J., Xu S., Leleu X., Himpe E., Maes K., De Bruyne E., Van Valckenborgh E., Vanderkerken K., Menu E., Van Riet I. Induction of miR-146a by multiple myeloma cells in mesenchymal stromal cells stimulates their pro-tumoral activity // Cancer Lett. 2016. Vol. 377, N 1. P. 17-24.
7.             Donnelly R.P., Dickensheets H., Finbloom D.S. The interleukin-10 signal transduction pathway and regulation of gene expression in mononuclear phagocytes // J. Interferon Cytokine Res. 1999. Vol. 19, N 6. P. 563-573.
8.             Gaba A., Grivennikov S.I., Do M.V., Stumpo D.J., Blackshear P.J., Karin M. Cutting edge: IL-10-mediated tristetraprolin induction is part of a feedback loopthat controls macrophage STAT3 activation and cytokine production // J. Immunol. 2012. Vol. 189, N 5. P. 2089-2093.
9.             He H., Nagamura-Inoue T., Takahashi A., Mori Y., Yamamoto Y., Shimazu T., Tsunoda H., Tojo A. Immunosuppressive properties of Wharton's jelly-derived mesenchymal stromal cells in vitro // Int. J. Hematol. 2015. Vol. 102, N 3. P. 368-378.
10.           King A., Balaji S., Le L.D., Crombleholme T.M., Keswani S.G. Regenerative wound healing: the role of interleukin-10 // Adv. Wound Care (New Rochelle). 2014. Vol. 3, N 4. P. 315-323.
11.           Krampera M., Cosmi L., Angeli R., Pasini A., Liotta F., Andreini A., Santarlasci V., Mazzinghi B., Pizzolo G., Vinante F., Romagnani P., Maggi E., Romagnani S., Annunziato F. Role for interferon-gamma in the immunomodulatory activity of human bone marrow mesenchymal stem cells // Stem Cells. 2006. Vol. 24, N 2. P. 386-398.
12.           Liu S., Yuan M., Hou K., Zhang L., Zheng X., Zhao B., Sui X., Xu W., Lu S., Guo Q. Immune characterization of mesenchymal stem cells in human umbilical cord Wharton’s jelly and derived cartilage cells // Cell. Immunol. 2012. Vol. 278, N 1-2. P.35-44.
13.           MacKenzie K.F., Pattison M.J., Arthur J.S. Transcriptional regulation of IL-10 and its cell-specific role in vivo // Crit. Rev. Immunol. 2014. Vol. 34, N 4. P. 315-345.
14.           Mao F., Xu W.R., Qian H., Zhu W., Yan Y.M., Shao Q.X., Xu H.X. Immunosuppressive effects of mesenchymal stem cells in collagen-induced mouse arthritis // Inflamm. Res. 2010. Vol. 59, N 3. P. 219-225.
15.           Mareschi K., Castiglia S., Sanavio F., Rustichelli D., Muraro M., Defedele D., Bergallo M., Fagioli F. Immunoregulatory effects on T lymphocytes by human mesenchymal stromal cells isolated from bone marrow, amniotic fluid, and placenta // Exp. Hematol. 2016. Vol. 44, N 2. P. 138-150.e1.
16.           Najar M., Raicevic G., Fayyad-Kazan H., De Bruyn C., Bron D., Toungouz M., Lagneaux L. Immune-related antigens, surface molecules and regulatory factors in human-derived mesenchymal stromal cells: the expression and impact of inflammatory priming // Stem Cell Rev. 2012. Vol. 8, N 4. P. 1188-1198.
17.           Rasmusson I., Ringden O., Sundberg B., Le Blanc K. Mesenchymal stem cells inhibit the formation of cytotoxic T lymphocytes, but not activated cytotoxic T lymphocytes or natural killer cells // Transplantation. 2003. Vol. 76, N 8. P. 1208-1213.
18.           Ren G., Zhang L., Zhao X., Xu G., Zhang Y., Roberts A.I., Zhao R.C., Shi Y. Mesenchymal stem cell-mediated immunosuppression occurs via concertedaction of chemokines and nitric oxide // Cell Stem Cell. 2008. Vol. 2, N 2. P. 141-150.
19.          
Ruffilli I., Ferrari S.M., Colaci M., Ferri C., Fallahi P., Antonelli A.
IP-10 in autoimmune thyroiditis // Horm. Metab. Res. 2014. Vol. 46, N 9. P. 597-602.
20.           Shawki S., Gaafar T., Erfan H., El Khateeb E., El Sheikhah A., El Hawary R. Immunomodulatory effects of umbilical cord-derived mesenchymal stem cells // Microbiol. Immunol. 2015. Vol. 59, N 6. P. 348-356.
21.           Soleymaninejadian E., Pramanik K., Samadian E. Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells: cytokines andfactors // Am. J. Reprod. Immunol. 2012. Vol. 67, N 1. P. 1-8.
22.           Wang Z., Zhou Q., Duan H., Wang Y., Dong M., Shi W. Immunological properties of corneal epithelial-like cells derived from human embryonic stem cells // PLoS One. 2016. Vol. 11, N 3. P. e0150731.
23.           Yang H., Sun J., Li Y., Duan W.M., Bi J., Qu T. Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells suppress proliferation of PHA-activated lymphocytes in vitro by inducing CD4(+)CD25(high)CD45RA(+) regulatory T cell production and modulating cytokine secretion // Cell. Immunol. 2016. Vol. 302. P. 26-31.