info@iramn.ru
com@iramn.ru
bbm.ktbm@gmail.com



БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ

2018 г., Том 165, № 1 ЯНВАРЬ

 

СОДЕРЖАНИЕ

Физиология
Внеклеточный НАД+ подавляет адренергические эффекты в предсердном миокарде крыс на раннем этапе постнатального онтогенеза
К.Б.Пустовит*,**, А.Д.Иванова*, В.С.Кузьмин*,** – 4
*Кафедра физиологии человека и животных МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ; **Кафедра физиологии ФГБОУ ВО РНИМУ им. Н.И.Пирогова, Москва, РФ
         
Эффекты комедиатора симпатической системы НАД+ (10 мкМ) на биоэлектрическую активность сердца в условиях адренергической стимуляции исследовали на изолированных препаратах правого предсердия 2-7-дневных крыс, работающих в собственном ритме (без стимуляции). Потенциалы действия регистрировали в рабочем миокарде при помощи стандартной микроэлектродной техники. Перфузия препарата правого предсердия норадреналином (1 мкМ) изменяет конфигурацию потенциалов действия и приводит к существенному увеличению длительности потенциалов действия. НАД+ на фоне предварительной стимуляции норадреналином достоверно снижает длительность потенциалов действия, в особенности длительность потенциалов действия на уровне реполяризации 25%. Изучена роль таких пуриновых соединений, как НАД+, АТФ и аденозин, на биоэлектрическую активность в базальных условиях (без введения норадреналина) в сердце новорожденных крыс. Эффект НАД+ оказался более выраженным на фоне адренергической стимуляции, чем в базальных условиях. Эффект НАД+ может быть обусловлен подавлением ICaL, что потенциально является главным механизмом действия НАД+ в сердце крысы.
Ключевые слова: потенциалы действия, предсердный миокард крысы, адренергическая стимуляция, НАД+, онтогенез
Адрес для корреспонденции: k_pustovit@mail.ru. Пустовит К.Б.
Литература
1.            Пустовит К.Б., Кузьмин В.С., Сухова Г.С. Влияние внеклеточного никотинамидадениндинуклеотида (НАД+) на сократительную и биоэлектрическую активность сердца крысы // Рос. физиол. журн. 2014. Т. 100, № 4. С. 445-457.
2.            Пустовит К.Б., Кузьмин В.С., Сухова Г.С. Влияние внеклеточного никотинамидадениндинуклеотида (NAD+) на биоэлектрическую активность пейсмекера и проводящей системы сердца // Бюл. экспер. биол.
2015. Т. 159, № 2. С. 144-147.
3.            Burnstock G. Physiology and pathophysiology of purinergic neurotransmission // Physiol. Rev. 2007. Vol. 87, N 2. P. 659-797.
4.            Burnstock G. Purines and Purinoceptors: Molecular Biology Overview // Encyclopedia of Neuroscience / Ed. L.R.Squire. Oxford, 2009. Vol. 7. P. 1253-1262.
5.            Headrick J.P., Peart J.N., Reichelt M.E., Haseler L.J. Adenosine and its receptors in the heart: regulation, retaliation and adaptation // Biochim. Biophys. Acta. 2011. Vol. 1808, N 5. P. 1413-1428.
6.            Hildreth V., Anderson R.H., Henderson D.J. Autonomic innervation of the developing heart: origins and function // Clin. Anat. 2009. Vol. 22, N 1. P. 36-46.
7.            Loria A.S., Brands M.W., Pollock D.M., Pollock J.S.Early life stress sensitizes the renal and systemic sympathetic system in rats // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2013. Vol. 305, N 3. P. F390-F395.        8
8.            Maltsev V.A., Ji G.J., Wobus A.M., Fleischmann B.K., Hescheler J. Establishment of beta-adrenergic modulation of L-type Ca2+ current in the early stages of cardiomyocyte development // Circ. Res. 1999. Vol. 84, N 2. P. 136-145.
9.            Pustovit K.B., Kuzmin V.S., Abramochkin D.V. Diadenosine tetra- and pentaphosphates affect contractility and bioelectrical activity in the rat heart via P2 purinergic receptors // Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 2016. Vol. 389, N 3. P. 303-313.
10.          Ralevic V. Modulation by nicotinamide adenine dinucleotide of sympathetic and sensory-motor neurotransmission via P1-purinoceptors in the rat mesenteric arterial bed // Br. J. Pharmacol. 1995. Vol. 114, N 8. P. 1541-1548.
11.          Smyth L.M., Bobalova J., Mendoza M.G., Lew C., Mutafova-Yambolieva V.N. Release of beta-nicotinamide adenine dinucleotide upon stimulation of postganglionic nerve terminals in blood vessels and urinary bladder // J. Biol. Chem. 2004. Vol. 279, N 47. P. 48 893-48 903.
12.          Smyth L.M., Breen L.T., Mutafova-Yambolieva V.N. Nicotinamide adenine dinucleotide is released from sympathetic nerve terminals via a botulinum neurotoxin A-mediated mechanism in canine mesenteric artery // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2006. Vol. 290, N 5. P. H1818-H18125.
13.          Vassort G. Adenosine 5'-triphosphate: a P2-purinergic agonist in the myocardium // Physiol.
Rev. 2001. Vol. 81, N 2. P. 767-806.

Межвидовые различия поведенческих реакций и нейромоторики лабораторных грызунов, получающих рационы с легкоусвояемыми углеводами
С.А.Апрятин, В.А.Шипелин, Ю.С.Сидорова, Н.А.Петров, И.В.Гмошинский, Д.Б.Никитюк – 9
ФГБУН ФИЦ питания и биотехнологии, Москва, РФ
         
Исследовали влияние потребления легкоусвояемых углеводов в течение 133 сут на количественные показатели нейромоторики и когнитивной функции у крыс Вистар и мышей линии C57Bl/6J. Нейромоторику (мышечный тонус) крыс и мышей оценивали по мышечной силе сжатия (силы хватки) передних лап в течение 4 мес. Уровень тревожности определяли в тесте “приподнятый крестообразный лабиринт”, а когнитивную функцию (краткосрочная и долгосрочная память) изучали по выработке УРПИ в течение 3 мес. У мышей, в отличие от крыс, выявлены признаки угнетения функции нейромоторики в ходе приема рационов с легкоусвояемыми сахарами. Уровень тревожности у самок мышей, но не крыс, с возрастом достоверно повышался на всех рационах. Состояние когнитивной функции крыс, получавших опытные рационы, по сравнению с контролем достоверно не изменялось. Однако у мышей потребление эквимолярной смеси фруктозы и глюкозы ухудшало состояние краткосрочной, но не долгосрочной памяти по сравнению с группой, получавшей только глюкозу. Выявлено небольшое (на 14-17%), но статистически достоверное увеличение массы головного мозга мышей, получавших фруктозу и сахарозу. Проведенные исследования выявили существенные межвидовые различия во влиянии углеводных рационов на показатели нейромоторики и поведенческие реакции на in vivo модели метаболического синдрома.
Ключевые слова: метаболический синдром, крысы, мыши, in vivo модели, поведенческие реакции
Адрес для корреспонденции: v.shipelin@yandex.ru. Шипелин В.
Литература
1.            Апрятин С.А., Сидорова Ю.С., Шипелин В.А., Балакина А.С., Трусов Н.В., Мазо В.К. Характеристика показателей нейромоторики, тревожности и когнитивной функции на in vivo модели алиментарной гиперлипидемии и ожирения // Бюл. экспер. биол. 2017. Т. 163, № 1. С. 46-51.
2.            Каркищенко В.Н., Фокин Ю.В., Казакова Л.Х., Алимкина О.В., Касинская Н.В. Методики изучения физиологических функций лабораторных животных для доклинических исследований в спортивной медицине // Биомедицина. 2012. № 4. С. 15-21.
3.            Кравченко Л.В., Аксенов И.В., Трусов Н.В., Гусева Г.В., Авреньева Л.И. Влияние количества жира в рационе на активность ферментов метаболизма ксенобиотиков и антиоксидантной защиты у крыс // Вопр. пит. 2012. Т. 81, № 1. С. 24-29.
4.            Метаболический синдром / Под ред. Г.Е.Ройтберга. М., 2007.
5.            Редькина А.В., Лоскутова Л.В., Замощина Т.А. Влияние агонистов и антагонистов ГАМКа-рецепторов на формирование латентного торможения у крыс с разными уровнями тревожности // Бюл. сиб. мед. 2012. Т. 11, № 1. С. 66-70.
6.            Сашков В.А., Сельверова Н.Б., Моренков Э.Д., Ермакова И.В. Уровень неироактивных стероидов в мозге и половые особенности формирования и угашения условного рефлекса у крыс // Рос. физиол. журн. 2012. Т. 98, № 2. С. 212-220.
7.            Фефелова Ю.А., Сергеева Е.Ю., Новикова Л.В., Климина Г.М. Влияние характера питания на Sirtuin1-опосредованное изменение метаболических процессов // Вопр. пит. 2016. Т. 85, № 4. С. 5-13.
8.            Фоломкина А.А., Орлова Н.В., Базян А.С. Влияние однократного введения мелипрамина на двигательную активность и оборонительные условные рефлексы пассивного и активного избегания у крыс // Журн. высш. нервн. деят.
2004. Т. 54, № 6. С. 829-834.
9.            Brothers S.P., Wahlestedt C. Therapeutic potential of neuropeptide Y (NPY) receptor ligands // EMBO Mol. Med. 2010. Vol. 2, N 11. P. 429-439.
10.          Chen X., Margolis K.J., Gershon M.D., Schwartz G.J., Sze J.Y. Reduced serotonin reuptake transporter (SERT) function causes insulin resistance and hepatic steatosis independent of food intake // PLoS One. 2012. Vol. 7, N 3. P. e32511. doi: 10.1371/journal.pone.0032511.
11.          Davidson E.P., Coppey L.J., Dake B., Yorek M.A. Effect of Treatment of Sprague Dawley Rats with AVE7688, Enalapril, or Candoxatril on Diet-Induced Obesity // J. Obes. 2011. Vol. 2011. doi: 10.1155/2011/686952.
12.          Rask-Madsen C., Kahn C.R. Tissue-specific insulin signaling, metabolic syndrome, and cardiovascular disease // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2012. Vol. 32, N 9. P. 2052-2059.
13.          Nagayach A., Patro N., Patro I. Experimentally induced diabetes causes glial activation, glutamate toxicity and cellular damage leading to changes in motor function // Front. Cell. Neurosci. 2014. Vol. 8. P. 355.
14.          Wong S.K., Chin K.Y., Suhaimi F.H., Fairus A., Ima-Nirwana S. Animal models of metabolic syndrome: a review // Nutr. Metab. (Lond.). 2016. Vol. 13. P. 65. doi: 10.1186/s12986-016-0123-9.
15.          Zubenko G.S., Jones M.L., Estevez A.O., Hughes H.B. 3rd, Estevez M. Identification of a CREB-dependent serotonergic pathway and neuronal circuit regulating foraging behavior in Caenorhabditis elegans: a useful model for mental disorders and their treatments? // Am. J. Med. Genet. B Neuropsychiatr. Genet. 2009. Vol. 150B, N 1. P. 12-23.

Общая патология и патологическая физиология
Коррекция холинергических нарушений мнестических процессов дитерпеновым алкалоидом зонгорином
Ю.В.Нестерова, Т.Н.Поветьева, Н.И.Суслов, Г.Н.Зюзьков, В.В.Жданов, Ю.С.Федорова*, П.В.Кульпин, К.В.Шапошников15
НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга, Томский НИМЦ, Томск, РФ; *Кемеровский государственный медицинский университет, Кемерово, РФ
         
Курсовое введение зонгорина восстанавливало мнестические процессы при их нарушениях, вызываемых скополамином, что проявлялось в улучшении выработки УРПИ и нормализации поведенческой активности мышей на протяжении всего периода наблюдений. Данный эффект превосходил таковой препарата сравнения пирацетама.
Ключевые слова: дитерпеновые алкалоиды, зонгорин, холинергические нарушения, скополаминовая амнезия
Адрес для корреспонденции: nes-yuliya@yandex.ru. Нестерова Ю.В.
Литература
1.            Абдулина О.В. Пирацетам: от механизма действия к лечению когнитивных расстройств // РМЖ. 2010. Т. 18, № 26. С. 1596-1600.
2.            Зюзьков Г.Н., Суслов Н.И., Лосев Е.А., Ермолаева Л.А., Жданов В.В., Удут Е.В., Мирошниченко Л.А., Симанина Е.В., Демкин В.П., Поветьева Т.Н., Нестерова Ю.В., Удут В.В., Минакова М.Ю., Дыгай А.М. Церебропротективные и регенеративные эффекты алкалоида Z77 в условиях ишемии головного мозга // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 158, № 9. С. 339-343.
3.            Нестерова Ю.В., Поветьева Т.Н., Суслов Н.И., Пушкарский С.В., Нагорняк Ю.Г., Попова Е.В., Андреева Т.И., Пашинский В.Г. Создание новых лекарственных препаратов на основе алкалоидов и флавоноидов из растений сибири // Бюл. экспер. биол. 2008. Прил. 2. С. 30-36.
4.            Погодаева Н.Н., Жапова Ц., Верещагин А.Л., Горшков А.Г., Семенов А.А. Алкалоидный состав некоторых видов Aconitum L. флоры Сибири // Раст. ресурсы. 2000. № 2. С. 79-84.
5.            Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1 / Под ред. А.Н.Миронова. М., 2012.
6.            Суслов Н.И., Ратахина Л.В., Першина О.В., Поветьева Т.Н., Литвиненко В.И., Попова Т.П. Влияние сухого экстракта из корней Scutellaria Baicalensis Georgi на формирование и воспроизведение условно-рефлекторного навыка при действии скополамина у мышей // Раст. ресурсы. 1994. № 4. С. 66-70.
7.            Успенская О., Захаров В. Патогенетические и нейрохимические основы развития болезни Альцгеймера // Врач. 2010. № 4. C. 72-74.
8.            Шабанов П.Д., Бородкин Ю.С. Нарушения памяти и их коррекция. Л
., 1989.
9.            Adams M., Gmünder F., Hamburger M. Plants traditionally used in age related brain disorders — a survey of ethnobotanical literature // J. Ethnopharmacol. 2007. Vol. 113, N 3.
Р. 363-381.
10.          Katz S., Peters K.R. Enhancing the mind? Memory medicine, dementia, and the aging brain // J. Aging Studies. 2008. Vol. 22, N 4.
Р. 348-355.
11.          Liu C., Li C., Gui L., Zhao L., Evans A.C., Xie B., Zhang J., Wei L., Zhou D., Wang J., Yin X. The pattern of brain gray matter impairments in patients with subcortical vascular dementia // J. Neurol. Sci. 2014. Vol. 341, N 1-2.
Р. 110-118.
12.          Nesterova Y.V., Povetieva T.N., Suslov N.I., Semenov A.A., Pushkarskiy S.V. Antidepressant activity of diterpene alkaloids of Aconitum baicalense Turcz // Bull. Exp. Biol. Med. 2011. Vol. 151, N 4. P. 425-428.
13.          Nesterova Y.V., Povet’eva T.N., Suslov N.I., Shults E.E., Ziuz'kov G.N., Aksinenko S.G., Afanas'eva O.G., Krapivin A.V., Kharina T.G. Anxiolytic activity of diterpene alkaloid songorine // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 159, N 5. P. 620-622.
14.          Nesterova Y.V., Povetieva T.N., Suslov N.I., Zyuz'kov G.N., Aksinenko S.G., Pushkarskii S.V., Krapivin A.V. Anti-inflammatory activity of diterpene alkaloids from Aconitum baikalense // Bull. Exp. Biol. Med. 2014. Vol. 156, N 5. P. 665-668.
15.          Nesterova Y.V., Povet'yeva T.N., Suslov N.I., Zyuz'kov G.N., Pushkarskii S.V., Aksinenko S.G., Schultz E.E., Kravtsova S.S., Krapivin A.V. Analgesic activity of diterpene alkaloids from Aconitum baikalensis // Bull. Exp.
Biol. Med. 2014. Vol. 157, N 4. P. 488-491.

Инсулин повышает жизнеспособность нейронов коры мозга крыс и нормализует отношение Bax/Bcl-2 при окислительном стрессе
Л.В.Баюнова, И.И.Зорина, И.О.Захарова, Н.Ф.Аврова – 20
Лаборатория молекулярной эндокринологии и нейрохимии (зав. — докт. биол. наук А.О.Шпаков) ФГБУН Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН, Санкт-Петербург, РФ
         
Изучали защитное действие инсулина в разных концентрациях и его влияние на отношение Bax/Bcl-2 в нейронах коры мозга крыс при окислительном стрессе. Защитный эффект инсулина имеет дозозависимый характер в наномолярном диапазоне (1 нМ<10 нМ<100 нМ). Преинкубация с инсулином в концентрации 100 нМ и 1 мкМ значительно увеличивает уровень Bcl-2 в нейронах через 5, 30 и 45 мин и через 1, 2 и 4 ч после начала действия H2O2 на клетки. Этот прооксидант повышает отношение Bax/Bcl-2 в нейронах до 141-164% по сравнению с контролем (100%), а преинкубация нейронов с инсулином нормализует это отношение.
Ключевые слова: нейроны коры мозга, окислительный стресс, инсулин, защитный эффект, Bax/Bcl-2
Адрес для корреспонденции: avrova@iephb.ru. Аврова Н.Ф.
Литература
1.            Сухов И.Б., Шипилов В.Н., Чистякова О.В., Трост А.М., Шпаков А.О. Длительное интраназальное введение инсулина улучшает пространственную память у крыс-самцов с пролонгированным сахарным диабетом 1-го типа и у здоровых крыс // ДАН. 2013. Т
. 453, № 5. C. 577.
2.            Cheng Y., Loh Y.P., Birch N.P. Neuroserpin attenuates H2O2-induced oxidative stress in hippocampal neurons via AKT and BCL-2 signaling pathways // J. Mol. Neurosci. 2017. Vol. 61, N 1. P. 123-131.
3.            Claxton A., Baker L.D., Hanson A., Trittschuh E.H., Cholerton B., Morgan A., Callaghan M., Arbuckle M,. Behl C., Craft S. Long-acting intranasal insulin detemir improves cognition for adults with mild cognitive impairment or early-stage Alzheimer's disease dementia // J. Alzheimers Dis. 2015. Vol. 44, N 3. P. 897-906.
4.            Duarte A.I., Santos M.S., Oliveira C.R., Rego A.C. Insulin neuroprotection against oxidative stress in cortical neurons — involvement of uric acid and glutathione antioxidant defenses // Free Radic. Biol. Med. 2005. Vol. 39, N 7. P. 876-889.
5.            Duarte A.I., Santos P., Oliveira C.R., Santos M.S., Rego A.C. Insulin neuroprotection against oxidative stress is mediated by Akt and GSK-3beta signaling pathways and changes in protein expression // Biochim. Biophys. Acta. 2008. Vol. 1783, N 6. P. 994-1002.
6.            Kim B., Sullivan K.A., Backus C., Feldman E.L. Cortical neurons develop insulin resistance and blunted Akt signaling: a potential mechanism contributing to enhanced ischemic injury indiabetes // Antioxid. Redox Sign. 2011. Vol. 14, N 10. P. 1829-1839.
7.            Pugazhenthi S., Miller E., Sable C., Young P., Heidenreich K.A., Boxer L.M., Reusch J.E. Insulin-like growth factor-I induces bcl-2 promoter through the transcription factor cAMP-response element-binding protein // J. Biol. Chem. 1999. Vol. 274, N 39. P. 27 529-27 535.
8.            Pugazhenthi S., Nesterova A., Sable C., Heidenreich K.A., Boxer L.M., Heasley L.E., Reusch J.E. Akt/protein kinase B up-regulates Bcl-2 expression through cAMP-response element-binding protein // J. Biol. Chem. 2000. Vol. 275, N 15. P. 10 761-10 766.
9.            Shah A.K., Gupta A., Dey C.S. AICAR induced AMPK activation potentiates neuronal insulin signaling and glucose uptake// Arch. Biochem. Biophys. 2011. Vol. 509, N 2. P. 142-146.
10.          Shpakov A.O., Derkach K.V., Berstein L.M. Brain signaling systems in the Type 2 diabetes and metabolic syndrome: promising target to treat and prevent these diseases // Future Sci. OA. 2015. Vol. 1, N 3. FSO25. doi: 10.4155/fso.15.23.
11.          Sieuwerts A.M., Klijn J.G., Peters H.A., Foekens J.A. The MTT tetrazolium salt assay scrutinized: how to use this assay reliably to measure metabolic activity of cell cultures in vitro for the assessment of growth characteristics, IC50-values and cell survival // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1995. Vol. 33, N 11. P. 813-823.
12.          Zakharova I.O., Sokolova T.V., Avrova N.F. Alpha-tocopherol prevents a dramatic oxidative stress-induced decline of the BCL-2 concentration in cortical neurons // Neurochem. J. 2016. Vol. 10, N 3. P. 226-231.
13.          Zakharova I.O., Sokolova T.V., Vlasova Y.A., Bayunova L.V., Rychkova M.P., Avrova N.F.
a-Tocopherol at nanomolar concentration protects cortical neurons against oxidative stress // Int. J. Mol. Sci. 2017. Vol. 18, N 1. pii: E216. doi: 10.3390/ijms18010216.   24
14.          Zhang L., Zhao H., Zhang X., Chen L., Zhao X., Bai X., Zhang J. Nobiletin protects against cerebral ischemia via activating the p-Akt, p-CREB, BDNF and Bcl-2 pathway and ameliorating BBB permeability in rat // Brain Res. Bull. 2013. Vol. 96. P. 45-53.

Роль JAK/STAT3-сигналинга в стимуляции функций мезенхимных клеток-предшественников фактором роста фибробластов
Г.Н.Зюзьков*,**, Е.В.Удут*, Л.А.Мирошниченко*, Т.Ю.Полякова*, Е.В.Симанина*, Л.А.Ставрова*, Г.А.Просекин*, М.Ю.Минакова*, Е.В.Бородулина*, И.В.Мареев*, Р.В.Гурто*, В.В.Жданов*, В.В.Удут*,** – 25
*
НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга, Томский НИМЦ, Томск, РФ; **ФГБОУ ВПО Национальный исследовательский Томский государственный университет, Томск, РФ
         
Изучали JAK/STAT-сигнальный путь при стимуляции функций мезенхимных клеток-предшественников фактором роста фибробластов. Выявлены различия в реализации пролиферативно-дифференцировочного потенциала фибробластных КОЕ при блокаде JAKs по сравнению с селективной инактивацией STAT3. Показана стимулирующая роль JAKs и STAT3 в отношении митотической активности прогениторных клеток и их разное значение в регуляции процессов созревания данных элементов. Имело место снижение уровня фибробластного колониеобразования и количества пролиферативно-активных фибробластных КОЕ на фоне увеличения скорости дифференцировки клеток-предшественников при блокаде JAKs. При этом ингибитор STAT3 приводил к сопряженному снижению величин всех исследуемых параметров.
Ключевые слова: сигнальная трансдукция, JAK/STAT-сигналинг, фактор роста фибробластов, прогениторные клетки, регенеративная медицина
Адрес для корреспонденции: zgn@pharmso.ru. Зюзьков Г.Н.
Литература
1.            Дыгай А.М., Зюзьков Г.Н. Клеточная терапия: новые подходы // Наука в России. 2009. № 1. С. 4-8.
2.            Дыгай А.М., Зюзьков Г.Н., Жданов В.В., Удут Е.В., Хричкова Т.Ю., Мирошниченко Л.А., Симанина Е.В., Ставрова Л.А. Методические рекомендации по изучению специфической активности средств для регенеративной медицины // Руководство по проведению доклинических исследований новых лекарственных средств / Под ред. А.Н.Миронова. М., 2013. С. 776-787.
3.            Зюзьков Г.Н., Удут Е.В., Мирошниченко Л.А., Полякова Т.Ю., Симанина Е.В., Ставрова Л.А., Чайковский А.В., Агафонов В.И., Бородулина Е.В., Тимофеев М.С., Зюзькова Ю.Г., Данилец М.Г., Жданов В.В., Удут В.В. Специфическая роль JAK/STAT3-сигналинга в регуляции функций мезенхимных прогениторных клеток // Бюл. экспер. биол. 2017. Т. 164, № 9. С. 294-297.
4.            Патент РФ № 2599289. Средства, стимулирующие регенерацию тканей / Г.Н.Зюзьков, В.В.Жданов, М.Г.Данилец, Л.А.Мирошниченко, Е.В.Удут, А.М.Дыгай // Бюл. № 28. Опубликовано 10.10.2016.
5.            Шапошников А.В., Комарьков И.Ф., Лебедева Л.А., Шидловский Ю.В. Строение сигнального пути JAK/STAT и его взаимосвязь с аппаратом транскрипции // Мол. биол.
2013. Т. 47, № 3. С. 388-397.
6.            Briscoe J., Kohlhuber F., Müller M. JAKs and STATs branch out // Trends Cell Biol. 1996. Vol. 6, N 9.
Р. 336-340.
7.            Leonard W.J., O’Shea J.J. JAKs and STATs: biological implications // Annu. Rev. Immunol. 1998. Vol. 16. P. 293-322.
8.            Mao X., Gavara N., Song G. Nuclear mechanics and stem cell differentiation // Stem Cell Rev. 2015. Vol. 11, N 6. P. 804-812.
9.            Mu Y., Lee S.W., Gage F.H. Signaling in adult neurogenesis // Curr. Opin. Neurobiol. 2010. Vol. 20, N 4. P. 416-423.
10.          Zyuz'kov G.N., Krapivin A.V., Nesterova Y.V., Povetieva T.N., Zhdanov V.V., Suslov N.I., Fomina T.I., Udut E.V., Miroshnichenko L.A., Simanina E.V., Semenov A.A., Kravtsova S.S., Dygai A.M. Mechanisms of regeneratory effects of Baikal Aconite diterpene alkaloids // Bull. Exp. Biol. Med. 2012, Vol. 153, N 6. P. 846-850.
11.          Zyuz'kov G.N., Suslov N.I., Losev E.A., Zhdanov V.V., Udut E.V., Miroshnichenko L.A., Simanina E.V., Povet'eva T.N., Nesterova Y.V., Udut V.V., Minakova M.Y., Zamoshchina T.A., Dygai A.M. Mechanisms of psychopharmacological effects of alkaloid Z77 under conditions of brain ischemia // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 158, N 6. P. 762-765. 
12.          Zyuz'kov G.N., Suslov N.I., Povet'eva T.N., Nesterova Y.V., Afanas'eva O.G., Udut E.V., Miroshnichenko L.A., Simanina E.V., Polyakova T.Y., Stavrova L.A., Chaikovskii A.V., Kul'pin P.V., Udut V.V., Dygai A.M., Zhdanov V.V. Psychopharmacological effects of JNK inhibitor in posthypoxic encephalopathy and mechanisms of their development // Bull. Exp. Biol. Med. 2017. Vol. 163, N 1. P. 18-21.
13.          Zyuz'kov G.N., Zhdanov V.V., Miroshnichenko L.A., Udut E.V., Chaikovskii A.V., Simanina E.V., Danilets M.G., Minakova M.Y., Udut V.V., Tolstikova T.G., Shults E.E., Stavrova L.A., Burmina Y.V., Dygai A.M. Involvement of PI3K, MAPK ERK1/2 and p38 in functional stimulation of mesenchymal progenitor cells by alkaloid songorine // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 159, N 1. P. 58-61.
14.          Zyuz'kov G.N., Zhdanov V.V., Udut E.V., Miroshnichenko L.A., Khrichkova T.Y., Danilets M.G., Simanina E.V., Chaikovskii A.V., Agafonov V.I., Sherstoboev E.Y., Minakova M.Y., Burmina Y.V., Udut V.V., Dygai A.M. Role of JNK and contribution of p53 to the realization of the growth potential of mesenchymal precursor cells under the effect of fibroblast growth factor // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 159, N 4. P. 479-481.
15.          Zyuz'kov G.N., Zhdanov V.V., Udut E.V., Miroshnichenko L.A., Simanina E.V., Polyakova T.Y., Stavrova L.A., Udut V.V., Minakova M.Y., Dygai A.M. Involvement of JAK1, JAK2, and JAK3 in stimulation of functional activity of mesenchymal progenitor cells by fibroblast growth factor // Bull. Exp. Biol. Med. 2016. Vol. 162, N 2. P. 240-243.

Анализ белкового состава плазмы крови больных церебральной ишемией
Ю.С.Кисриева, Н.А.Петушкова, Н.Ф.Саменкова, Г.П.Кузнецова, О.В.Ларина, Н.Б.Теряева*, В.Г.Згода, И.И.Карузина, Д.Ю.Усачев*, А.Ю.Беляев* – 29
ФГБНУ Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича, Москва, РФ; *ФГАУ Национальный научно-практический центр нейрохирургии им. акад. Н.Н.Бурденко Минздрава России, Москва
         
Исследован протеом плазмы крови больных церебральной ишемией и здоровых людей методом сравнительного протеомного анализа на базе технологии тандемной ВЭЖХ-МС/МС. Анализ масс-спектрометрических данных проводили в автоматизированном режиме с использованием программного обеспечения “Progenesis LS-MS”. Всего идентифицировано 256 белков. Выявлены значительные количественные различия по 20 белкам. Установлено, что протеомные изменения плазмы крови при ишемии затрагивают широкий спектр белков, относящихся к молекулярным шаперонам, системе фибринолиза и ангиогенеза, иммунной системе, системе поддержания гомеостаза, клеточной дифференциации и пролиферации, регуляции апоптоза и цитоскелету.
Ключевые слова: ишемия мозга, протеом плазмы крови, жидкостная хромато-масс-спектрометрия
Адрес для корреспонденции: juliaks@bk.ru. Кисриева Ю.С.
Литература
1.            Кисриева Ю.С., Петушкова Н.А., Саменкова Н.Ф., Кузнецова Г.П., Ларина О.В., Завьялова М.Г., Теряева Н.Б., Беляев А.Ю., Карузина И.И. Сравнительный анализ протеома плазмы крови больных на ранней стадии хронической церебральной ишемии // Биомед. химия. 2016. Т. 62, № 5. С. 599-602.
2.            Родченкова М., Новикова С. Оптимизация условий хромато-масс-спектрометрического метода для качественного и полуколичественного протеомного анализа // Аналитика.
2013. Т. 3, № 10. С. 40-47.
3.            Becker M., Kuhse J., Kirsch J. Effects of two elongation factor 1A isoforms on the formation of gephyrin clusters at inhibitory synapses in hippocampal neurons // Histochem. Cell Biol. 2013. Vol. 140, N 6. P. 603-609.
4.            Camins A., Sureda F.X., Junyent F., Verdaguer E., Folch J., Beas-Zarate C., Pallas M. An overview of investigational antiapoptotic drugs with potential application for the treatment of neurodegenerative disorders // Expert Opin. Investig. Drugs. 2010. Vol. 19, N 5. P. 587-604.
5.            He H., Chen M., Scheffler N.K., Gibson B.W., Spremulli L.L., Gottlieb R.A. Phosphorylation of mitochondrial elongation factor Tu in ischemic myocardium: basis for chloramphenicol-mediated cardioprotection // Circ. Res. 2001. Vol. 89, N 5. P. 461-467.
6.            Hossain M.N., Fuji M., Miki K., Endoh M., Ayusawa D. Downregulation of hnRNP C1/C2 by siRNA sensitizes HeLa cells to various stresses // Mol. Cell. Biochem. 2007. Vol. 296, N 1-2. P. 151-157.
7.            Hüttemann M., Lee I., Grossman L.I., Doan J.W., Sanderson T.H. Phosphorylation of mammalian cytochrome c and cytochrome c oxidase in the regulation of cell destiny: respiration, apoptosis, and human disease // Adv. Exp. Med. Biol. 2012. Vol. 748. P. 237-264.
8.            Kuo C.C., Liang C.M., Lai C.Y., Liang S.M. Involvement of heat shock protein (Hsp)90 beta but not Hsp90 alpha in antiapoptotic effect of CpG-B oligodeoxynucleotide // J. Immunol. 2007. Vol. 178, N 10. P. 6100-6108.
9.            Liebelt B., Papapetrou P., Ali A., Guo M., Ji X., Peng C., Rogers R., Curry A., Jimenez D., Ding Y. Exercise preconditioning reduces neuronal apoptosis in stroke by up-regulating heat shock protein-70 (heat shock protein-72) and extracellular-signal-regulated-kinase 1/2 // Neuroscience. 2010. Vol. 166, N 4. P. 1091-1100.
10.          Ling Q., Jacovina A.T., Deora A., Febbraio M., Simantov R., Silverstein R.L., Hempstead B., Mark W.H., Hajjar K.A. Annexin II regulates fibrin homeostasis and neoangiogenesis in vivo // J. Clin. Invest. 2004. Vol. 113, N 1. P. 38-48.
11.          Liu Y., Jiang S., Yang P.Y., Zhang Y.F., Li T.J., Rui Y.C. EF1A1/HSC70 cooperatively suppress brain endothelial cell apoptosis via regulating JNK activity // CNS Neurosci. Ther. 2016. Vol. 22, N 10. P. 836-844.
12.          Miniño A.M., Arias E., Kochanek K.D., Murphy S.L., Smith B.L. Deaths: final data for 2000 // Natl Vital Stat. Rep. 2002. Vol. 50, N 15. P. 1-119.
13.          Sharp F.R., Zhan X., Liu D.Z. Heat shock proteins in the brain: role of Hsp70, Hsp 27, and HO-1 (Hsp32) and their therapeutic potential // Transl. Stroke Res. 2013. Vol. 4, N 6. P. 685-692.
14.          Stapels M., Piper C., Yang T., Li M., Stowell C., Xiong Z.G., Saugstad J., Simon R.P., Geromanos S., Langridge J., Lan J.Q., Zhou A. Polycomb group proteins as epigenetic mediators of neuroprotection in ischemic tolerance // Sci. Signal. 2010. Vol. 3, N 111. P. ra15. doi: 10.1126/scisignal.2000502.

Биофизика и биохимия
Кальциевая соль N-(5-гидроксиникотиноил)-L-глутаминовой кислоты изменяет реакцию пирамидных нейронов СА1 области гиппокампа при ортодромной стимуляции у крыс
В.Г.Мотин, А.В.Киселев*, И.С.Стовбун*,***, В.И.Сергиенко**, Т.С.Калинина*** – 34
ФГБНУ Научно-исследовательский институт нормальной физиологии им. П.К.Анохина, Москва, РФ; *ФГБУН Институт химической физики им. Н.Н.Семенова РАН, Москва, РФ; **ФГБУ Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины ФМБА России, Москва; ***ФГБНУ Научно-исследовательский институт фармакологии им. В.В.Закусова, Москва, РФ
         
Изучено влияние кальциевой соли N-(5-гидроксиникотиноил)-L-глутаминовой кислоты (соединение ампассе) на нейрональную активность в СА1 области гиппокампа в ответ на стимуляцию коллатералей Шаффера с частотой 1 Гц (30 импульсов в течение 30 с) на переживающих срезах гиппокампа крыс Вистар. При регистрации ортодромных популяционных спайков (1-го и 30-го) установлено, что ампассе (500 мкМ, 1, 2 и 10 мМ) облегчает синаптическую передачу в системе коллатерали Шаффера—пирамидные нейроны поля СА1 гиппокампа, оказывая максимальное действие в концентрации 2 мМ. В концентрации 10 мМ ампассе вызывает эпилептиформную активность, которая ингибируется специфическим неконкурентным антагонистом NМDА-рецепторного комплекса МK-801.
Ключевые слова: поле СА1 гиппокампа, ампассе, NМDА-рецепторный комплекс, эпилептиформная активность
Адрес для корреспонденции: vmotin@hotmail.com. Мотин В.Г.
Литература
1.            Мотин В.Г. Холин — предшественник ацетилхолина — вызывает NMDA-зависимую эпилептиформную активность в СА1 области гиппокампа крыс // Бюл. экспер. биол. 2011. Т. 152, № 7. С. 32-35.
2.            Стовбун С.В., Киселев А.В., Сергиенко В.И. Экспериментальное изучение ноотропных и нейропротективных свойств кальциевой соли N-(5-гидроксиникотиноил)-L-глутаминовой кислоты // Вестн. МГОУ
. Сер. Естеств. науки. 2011. № 2. С. 83-93.
3.            Arrigo A., Mormina E., Anastasi G.P., Gaeta M., Calamuneri A., Quartarone A., De Salvo S., Bruschetta D., Rizzo G., Trimarchi F., Milardi D. Constrained spherical deconvolution analysis of the limbic network in human, with emphasis on a direct cerebello-limbic pathway // Front. Hum. Neurosci. 2014. Vol. 8. P. 987. doi: 10.3389/fnhum.2014.00987.
4.            Black S.A., Stys P.K., Zamponi G.W., Tsutsui S. Cellular prion protein and NMDA receptor modulation: protecting against excitotoxicity // Front. Cell Dev. Biol. 2014. Vol. 2. P. 45. doi: 10.3389/fcell.2014.00045.
5.            Bonaccorso C., Micale N., Ettari R., Grasso S., Zappalà M. Glutamate binding-site ligands of NMDA receptors // Curr. Med. Chem. 2011. Vol. 18, N 36. P. 5483-5506.
6.            Coras R., Pauli E., Li J., Schwarz M., Rössler K., Buchfelder M., Hamer H., Stefan H., Blumcke I. Differential influence of hippocampal subfields to memory formation: insights from patients with temporal lobe epilepsy // Brain. 2014. Vol. 137, Pt 7. P. 1945-1957.
7.            Jalili C., Salahshoor M.R., Pourmotabbed A., Moradi S., Roshankhah Sh., Darehdori A.S., Motaghi M. The effects of aqueous extract of Boswellia Serrata on hippocampal region CA1 and learning deficit in kindled rats // Res. Pharm. Sci. 2014. Vol. 9, N 5. P. 351-358.
8.            Khodorov B. Glutamate-induced deregulation of calcium homeostasis and mitochondrial dysfunction in mammalian central neurones // Prog. Biophys. Mol. Biol. 2004. Vol. 86, N 2. P. 279-351.
9.            Nyitrai G., Lasztóczi B., Kardos J. Glutamate uptake shapes low-[Mg2+] induced epileptiform activity in juvenile rat hippocampal slices // Brain Res. 2010. Vol. 1309. P. 172-178.
10.          Tanaka K.Z., Pevzner A., Hamidi A.B., Nakazawa Y., Graham J., Wiltgen B.J. Cortical representations are reinstated by the hippocampus during memory retrieval // Neuron. 2014. Vol. 84, N 2. P. 347-354.
11.          Vyklicky V., Korinek M., Smejkalova T., Balik A., Krausova B., Kaniakova M., Lichnerova K., Cerny J., Krusek J., Dittert I, Horak M., Vyklicky L. Structure, function, and pharmacology of NMDA receptor channels // Physiol. Res. 2014. Vol. 63, Suppl. 1. P. S191-S203.
12.          Wlodarczyk A.I., Xu C., Song I., Doronin M., Wu Y.W., Walker M.C., Semyanov A. Tonic GABAA conductance decreases membrane time constant and increases EPSP-spike precision in hippocampal pyramidal neurons // Front. Neural
Circuits. 2013. Vol. 7. P. 205. doi: 10.3389/fncir.2013.00205.

Протективная роль нитрат/нитрит-редуктазной системы во время неполной глобальной ишемии мозга
В.С.Кузенков – 38
Биологический факультет МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
         
На модели экспериментального ишемического инсульта, вызванного окклюзией двух сонных артерий, изучали влияние неселективного блокатора NO-синтаз LNNA в дозе 25 мг/кг и нитратов — KNO3, NaNO3, Mg(NO3)2, Ca(NO3)2 в дозах 5 и 50 мг/кг. Крысы Вистар были разделены на 40 опытных (n=960) и 8 контрольных (n=192) групп. Опытным группам вводили только один из нитратов или ингибитор LNNA совместно с одним из нитратов, или только один LNNA. Все препараты вводили внутрибрюшинно за 1 ч до ишемии мозга или через 5 с после окклюзии общих сонных артерий. Контрольным крысам вводили 0.9% раствор NaCl в те же сроки и в эквивалентном объеме. Неспецифический ингибитор NO-синтаз LNNA на фоне ишемии мозга увеличивает неврологический дефицит и смертность. Нитрат/нитрит-редуктазная система в зависимости от катиона, входящего в состав нитрата, и концентрации нитрата при ингибировании NO-синтазной системы в условиях ишемии/гипоксии мозга оказывает протективное действие.
Ключевые слова: нитрат/нитрит-редуктазная система, NO-синтаза, LNNA, ишемия мозга, неврологические нарушения
Адрес для корреспонденции: kouzenkov@mail.ru. Кузенков В.С.
Литература
1.            Громова О.А., Торшин И.Ю., Калачева А.Г., Курамшина Д.Б. Молекулярно-биологические основы нейропротекторных эффектов магния // Журн. неврол. и психиатр. 2011. Т. 111, № 12. С. 90-101.
2.            Саркисова К.Ю., Опиц Б., Оеме П. Влияние фрагмента субстанции Р (3-4) на течение ишемии мозга у крыс с разным типом поведения // Бюл. экспер. биол. 1996. Т. 121, № 4. C. 399-403.
3.            Храмов В.А., Комарова В.И., Темкин Э.С. Антибиотики как ингибиторы нитратредуктазы ротовой жидкости человека // Стоматология 2000. Т
. 79, № 2. C. 4-5.
4.            Ascherio A., Rimm E.B., Hernan M.A., Giovannucci E.L., Kawachi I., Stampfer M.J., Willett W.C. Intake of potassium, magnesium, calcium, and fiber and risk of stroke among US men // Circulation. 1998. Vol. 98, N 12. P. 1198-1204.
5.            Bryan N.S., Ivy J.L. Inorganic nitrite and nitrate: evidence to support consideration as dietary nutrients // Nutr. Res. 2015. Vol. 35, N 8. P. 643-654.
6.            Ducluzeau A.L., Schoepp-Cothenet B., van Lis R., Baymann F., Russell M.J., Nitschke W. The evolution of respiratory O2/NO reductases: an out-of-the-phylogenetic-box perspective // J. R. Soc. Interface. 2014. Vol. 11, N 98. ID 20140196. doi: 10.1098/rsif.2014.0196.
7.            Fernandez N., Garcia J.L., Garcia-Villalon A.L., Monge L., Gomez B., Dieguez G. Cerebral blood flow and cerebrovascular reactivity after inhibition of nitric oxide synthesis in conscious goats // Br. J. Pharmacol. 1993. Vol. 110, N 1. P. 428-434.
8.            Kim-Shapiro D.B., Gladwin M.T. Mechanisms of nitrite bioactivation // Nitric Oxide. 2014. Vol. 38. P. 58-68.
9.            Kuzenkov V.S., Krushinski- A.L., Reutov V.P. The effect of nitrates on the outcome of acute experimental ischemic stroke // Zh. Nevrol. Psikhiatr. Im. S.S.Korsakova. 2012. Vol. 112, N 12, Pt 2. P. 35-39.
10.          L'hirondel J., L'hirondel J.L. Nitrate and Man: Toxic, Harmless or Beneficial? N.Y., 2001.
11.          Madigan M., Zuckerbraun B. Therapeutic potential of the nitrite-generated NO pathway in vascular dysfunction // Front. Immunol. 2013. Vol. 4. P. 174. doi: 10.3389/fimmu.2013.00174.
12.          Mikula I., Durocher S., Martasek P., Mutus B., Slama-Schwok A. Isoform-specific differences in the nitrite reductase activity of nitric oxide synthases under hypoxia // Biochem. J. 2009. Vol. 418, N 3. P. 673-682.
13.          Toda N., Ayajiki K., Okamura T. Cerebral blood flow regulation by nitric oxide: recent advances // Pharmacol.
Rev. 2009. Vol. 61, N 1. P. 62-97.

In vitro-эффекты нитропруссида натрия и L-Nw-нитроаргинина метилового эфира (L-NAME) на активность лизосомальных цистеиновых протеиназ и проницаемость мембраны лизосом
М.А.Фомина, А.М.Кудлаева, С.А.Исаков, В.В.Давыдов – 43
ФГБОУ ВО Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П.Павлова Минздрава России, Рязань
         
Изучено прямое влияние 5 мМ L-NAME и 0.1 мМ нитропруссида натрия на активность лизосомальных цистеиновых протеиназ и проницаемость лизосомальной мембраны in vitro в течение 1, 2 и 4 ч инкубации. Объектом исследования служили выделенные из печени интактных крыс-самок суспензии лизосом. Оба вещества снижают общую активность катепсина Н и не влияют на активность катепсина В при всех исследуемых временных интервалах. L-NAME повышает активность катепсина L в течение всего времени инкубации, а нитропруссид натрия повышает активность данного фермента при 2-часовой инкубации и снижает активность при увеличении времени инкубации до 4 ч. L-NAME in vitro демонстрирует мембранодестабилизирующий эффект в отношении лизосом, а нитропруссид натрия, напротив, оказывает стабилизирующее воздействие.
Ключевые слова: катепсины B, L, H; нитропруссид натрия; L-NAME; стабильность лизосомальной мембраны
Адрес для корреспонденции: anyakudlaeva@mail.ru. Кудлаева А.М.
Литература
1.            Абаленихина Ю.В., Фомина М.А. Влияние модуляторов синтеза оксида азота на активность и аутопроцессинг катепсина в иммуно-компетентных органов крыс в условиях in vitro // Наука молодых — Eruditio Juvenium. 2014. № 1. С. 53-59.
2.            Абаленихина Ю.В., Фомина М.А., Исаков С.А. Окислительная модификация белков и изменение активности катепсина L селезенки крыс в условиях моделирования дефицита синтеза оксида азота // Рос. мед.-биол. вестник. 2013. № 1. С. 44-48.
3.            Арапова А.И., Фомина М.А. Влияние L-аргинина и L-NAME на активность лизосомальных цистеиновых протеиназ и проницаемость лизосомальной мембраны в аорте крыс // Казанский мед. журн. 2016. Т. 97, № 2. С. 250-255.
4.            Лига А.Б., Ухина Т.В., Шимановский Н.Л. Активность лизосомальных ферментов фибробластов кожи крыс при воздействии прогестерона и нового гестагена АБМП // Бюл. экспер. биол. 2008. Т. 145, № 1. С. 50-52.
5.            Метельская В.А., Гуманова Н.Г. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови // Клин. лаб. диагност. 2005. № 6. С. 15-18.
6.            Покровский А.А., Тутельян В.А. Лизосомы. М., 1976.
7.            Пупышев А.Б. Пермеабилизация лизосомных мембран как апоптогенный фактор // Цитология.
2011. Т. 53, № 4. С. 313-324.
8.            Barrett A.J., Kirschke H. Cathepsin B, Cathepsin H, Cathepsin L // Methods Enzymol. 1981. Vol. 80, Pt C. P. 535-561.
9.            Fan H., Guo S., Jiao Y., Zhang R., Li J. Effects of exogenous nitric oxide on growth, active oxygen species metabolism, and photosynthetic characteristics in cucumber seedlings under NaCl stress // Front. Agric. China. 2007. Vol. 1, N 3. P. 308-314. doi: 10.1007/s11703-007-0052-5.
10.          Felbor U., Dreier L., Bryant R.A., Ploegh H.L., Olsen B.R., Mothes W. Secreted cathepsin L generates endostatin from collagen XVIII // EMBO J. 2000. Vol. 19, N 6. P. 1187-1194.
11.          Fujishima A., Imai Y., Nomura T., Fujisawa Y., Yamamoto Y., Sugawara T. The crystal structure of human cathepsin L complexed with E-64 // FEBS Lett. 1997. Vol. 407, N 1. P. 47-50.
12.          Hottinger D.G., Beebe D.S., Kozhimannil T., Prielipp R.C., Belani K.G. Sodium nitroprusside in 2014: A clinical concepts review // J. Anaesthesiol. Clin. Pharmacol. 2014. Vol. 30, N 4. P. 462-471.
13.          Kaur G., Singh H.P., Batish D.R., Mahajan P., Kohli R.K., Rishi V. Exogenous nitric oxide (NO) interferes with lead (Pb)-induced toxicity by detoxifying reactive oxygen species in hydroponically grown wheat (triticum aestivum) roots // PLoS One. 2015. Vol. 10, N 9. e0138713. doi: 10.1371/journal.pone.0138713.
14.          Terman A., Kurz T., Gustafsson B., Brunk U.T. Lysosomal labilization // IUBMB Life. 2006. Vol. 58, N 9. P. 531-539.
15.          Turk V., Stoka V., Vasiljeva O., Renko M., Sun T., Turk B., Turk D. Cystein catepsines: from structure, function and regulation to new frontiers // Biochim.
Biophys. Acta. 2012. Vol. 1824, N 1. P. 68-88.

Фармакология и токсикология
Радиопротективные свойства неомитилана при экспериментальной лучевой пневмонии
В.И.Апанасевич, Н.Г.Плехова, А.В.Лагурева, А.В.Гончаров, Е.А.Коцюрбий, О.С.Плотникова, Д.А.Сиворакша, О.В.Таракова*, В.И.Молчанова**, П.А.Лукьянов** – 47
ФГБОУ ВО Тихоокеанский медицинский университет Минздрава России, Владивосток; *ФГАОУ ВО Дальневосточный федеральный университет Министерства образования и науки РФ, Владивосток; **ФГБНУ Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б.Елякова ДВО РАН, Владивосток, РФ
         
В эксперименте на модели лучевой пневмонии (облучение зоны легких животных суммарной дозой 14 и 28 Гр) исследовалось воздействие полисахарида неомитилана, полученного из мидий Сrenomytilus grayаnus. При гистологическом исследовании показано, что количество ядросодержащих компонентов в легких животных, ингалированных неомитиланом до облучения, возрастало. У этих животных отмечалась пролиферация эпителиоцитов бронхов и формирование дополнительных лимфоидных структур. Отсутствие тенденции к восстановлению клеток легочной ткани у животных, облученных 28 Гр, связано с запредельной лучевой токсичностью.
Ключевые слова: радиопротекторы, лучевой пульмонит, биогликаны, неомитилан
Адрес для корреспонденции: sandy767@mail.ru. Лагурева А.В.
Литература
1.            Лукашевич М.М., Старовойтов В.В. Методика подсчета числа ядер клеток на медицинских гистологических изображениях // Системный анализ и прикладная информатика. 2016. № 2. C. 37-42.
2.            Молчанова В.И., Чикаловец И.В., Черников О.В., Попов А.М., Кривошапко О.Н., Лукьянов П.А. Сравнительное изучение биологичекой активности биогликанов из дальневосточной мидии Crenomytilus Grayanus // Тихоокеанск. мед. журн. 2012. № 1. С. 47-50.
3.            Пасов В.В., Зубова Н.Д., Иволгин Е.М., Курпешева А.К. Поздние лучевые повреждения органов грудной клетки // Сиб. онкол. журн. 2009. № 6. С. 58-61.
4.            Патент РФ № 2379044. Средство, обладающее иммуномодулирующим, противовоспалительным и ранозаживляющим действием / В.И.Молчанова, И.В.Чикаловец, О.В.Черников, Д.Л.Аминин, О.Н.Кривошапко, П.А.Лукьянов // Бюл. № 2. Опубликовано 20.01.2010.
5.            Патент РФ № 2469731. Способ профилактики лучевого пневмонита / А.В.Гончаров, В.И.Апанасевич, В.И.Молчанова, П.А.Лукьянов // Бюл. № 35. Опубликовано 20.12.2012.
6.            Семищева Н.Л., Карапетян Е.И., Мальцева Т.А., Авдеева Н.В., Одиреев А.Н. Постлучевой пневмонит в практике пульмонолога // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2014. № 53. С. 137-142.
7.            Турмова Е.П., Маркелова Е.В., Красников В.Е., Бычков Е.А., Лукьянов П.А., Чикаловец И.В., Григорюк А.А. Влияние 1,6-a-D-глюкана из дальневосточной мидии “Crenomytilus Grayanus” (митилана) на липидный спектр и цитокиновый профиль сыворотки крови при экспериментальном атеросклерозе // Фундаментальные исследования. 2012. № 11-1. С. 46-50.
8.            Чикаловец И.В., Молчанова В.И., Аминин Д.Л., Черников О.В., Пислягин Е.А., Лукьянов П.А. Неомитилан — новый иммуномодулятор из мидии Crenomytilus Grayanus // Тихоокеанск. мед. журн. 2009. № 3. С. 32-35.
9.            Chernikov O.V., Molchanova V.I., Chikalovets I.V., Kondrashina A.S., Li W., Lukyanov P.A. Lectins of marine hydrobionts // Biochemistry (Mosc). 2013. Vol.78, N 7. Р. 760-770.
10.          Khalil A.A., Hoffmann L., Moeller D.S., Farr K.P., Knap M.M. New dose constraint reduces radiation-induced fatal pneumonitis in locally advanced non-small cell lung cancer patients treated with intensity-modulated radiotherapy // Acta Oncol. 2015. Vol. 54, N 9. P. 1343-1349.
11.          Kuznetsova T.A., Besednova N.N., Somova L.M., Plekhova N.G. Fucoidan extracted from Fucus evanescens prevents endotoxin-induced damage in a mouse model of endotoxemia // Mar. Drugs. 2014. Vol. 12, N 2. P. 886-898.
12.          Matsumoto R., Fujii Y., Kawsar S.M., Kanaly R.A., Yasumitsu H., Koide Y., Hasan I., Iwahara C., Ogawa Y., Im C.H., Sugawara S., Hosono M., Nitta K., Hamako J., Matsui T., Ozeki Y. Cytotoxicity and glycan-binding properties of an 18 kDa lectin isolated from the marine sponge Halichondria okadai // Toxins (Basel). 2012. Vol. 4, N 5. P. 323-338.
13.          Smith V.J., Desbois A.P., Dyrynda E.A. Conventional and unconventional antimicrobials from fish, marine invertebrates and micro-algae // Mar. Drugs. 2010. Vol. 8, N 4. P. 1213-1262.
14.          Wei M., Cai J., Tong T., Yu S., Yang Y., Zhang W., Yang J. Radiation pneumonitis after radiotherapy of neck lymphoma // Case Rep. Pulmonol.
2014. Vol. 2014. ID 614984. doi: 10.1155/2014/614984.

Нарушения ритма сердца, вызванные инъекцией ингибитора холинэстеразы эзерина в раннем онтогенезе крыс
В.А.Сизонов, Л.Е.Дмитриева – 52
ФГБУН Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН, Санкт-Петербург, РФ
         
У новорожденных однодневных крысят и на 16-й день постнатального развития исследовали параметры сердечной активности после применения ингибитора холинэстеразы эзерина. Новорожденные и 16-дневные животные имеют аналогичный тип реакции сердечно-сосудистой системы на избыток ацетилхолина. Вместе с тем значительные различия в выраженности этих нарушений свидетельствуют о том, что в ранний период постнатального онтогенеза заканчивается созревание холинергических структур, участвующих в регуляции сердечной деятельности.
Ключевые слова: ранний онтогенез, сердечный ритм, эзерин
Адрес для корреспонденции: sizonvladimir@yandex.ru. Сизонов В.А.
Литература
1.            Бурсиан А.В. Структура авторитмической активности сократительных систем // Журн. эволюц. биохим. и физиол. 2012. Т. 48, № 2. С. 186-199.
2.            Кузнецов С.В., Гончаров Н.В., Глашкина Л.М. Изменение параметров функционирования сердечно-сосудистой и дыхательной систем у крыс разного возраста под воздействием малых доз ингибитора холинэстераз фосфакола // Журн. эволюц. биохим. и физиол. 2005. Т. 41, № 2. С. 160-167.
3.            Прозоровский В.Б., Саватеев Н.В. Неантихолинэстеразные механизмы действия антихолинэстеразных средств. М., 1976. С. 26-37.
4.            Тимофеева О.П., Вдовиченко Н.Д., Кузнецов С.В. Динамика становления ритмической активности сердца у плодов и новорожденных крыс // Бюл. экспер. биол. 2011. Т. 152, № 10. С. 373-378.
5.            Хаютин В.М., Лукошкова Е.В. Колебания частоты сердцебиений: спектральный анализ // Вестн. аритмол. 2002. № 26. С. 10-21.

Иммунология и Микробиология
Исследование механизмов клеточной гибели и формирования фибротических изменений в гранулемах легких мышей BALB/c при хроническом БЦЖ-индуцированном гранулематозе
Л.А.Черданцева, О.В.Потапова*, Т.В.Шаркова*, А.М.Аникина, А.В.Ковнер, А.В.Троицкий, В.А.Шкурупий** – 57
ФГБНУ Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, РФ; *Научно-образовательный центр ООО “Медицинская лаборатория “ОПТИМУМ”, Краснодарский край, Сочи, РФ; **ФГБОУ ВО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России, Новосибирск
         
Методами световой микроскопии, иммуногистохимического и морфометрического анализа установлено, что гибель клеток БЦЖ-гранулем в легких происходит преимущественно через рецепторноопосредованный механизм апоптоза, что не предотвращает персистенцию возбудителя в макрофагах гранулем и способствует формированию выраженного фиброза в гранулемах и интерстиции легких.
Ключевые слова: БЦЖ-гранулематоз, макрофаги, апоптоз, иммуногистохимия, фиброз
Адрес для корреспонденции: cherdanceff@yandex.ru. Черданцева Л.А.
Литература
1.            Варга О.Ю., Рябков В.А. Апоптоз: понятие, механизмы реализации, значение // Экол. чел. 2006.
№ 7. С. 28-32.
2.            Abebe M., Kim L., Rook G., Aseffa A., Wassie L., Zewdie M., Zumla A., Engers H., Andersen P., Doherty T.M. Modulation of cell death by M. tuberculosis as a strategy for pathogen survival // Clin. Dev. Immunol. 2011. Vol. 2011. ID 678570. doi: 10.1155/2011/678570.
3.            Behar S.M., Divangahi M., Remold H.G. Evasion of innate immunity by Mycobacterium tuberculosis: is death an exit strategy? // Nat. Rev. Microbiol. 2010. Vol. 8, N 9. P. 668-674.
4.            Granulomatous infection and inflammations: cellular and molecular mechanisms / Ed. D.L.Boros. Washington, 2003.
5.            Itoh K., Hase H., Kojima H., Saotome K., Nishioka K., Kobata T. Central role of mitochondria and p53 in Fas-mediated apoptosis of rheumatoid synovial fibroblasts // Rheumatology (Oxford). 2004. Vol. 43, N 3. P. 277-285.
6.            Jordao L., Vieira O.V. Tuberculosis: new aspects of an old disease // Int. J. Cell. Biol. 2011. Vol. 2011. ID 403623. doi: 10.1155/2011/403623.
7.            Mgode G.F., Weetjens B.J., Nawrath T., Lazar D., Cox C., Jubitana M., Mahoney A., Kuipers D., Machang'u R.S., Weiner J., Schulz S., Kaufmann S.H. Mycobacterium tuberculosis volatiles for diagnosis of tuberculosis by Cricetomys rats // Tuberculosis. 2012. Vol. 92, N 6. P. 535-542.
8.            Kirschner D.E., Young D., Flynn J.L. Tuberculosis: global approaches to a global disease // Curr. Opin. Biotechnol. 2010. Vol. 21, N 4. P. 524-531.
9.            Kovner A.V., Potapova O.V., Shkurupy V.A., Shestopalov A.M. Morphofunctional status and the role of mononuclear phagocyte system lung compartment in the pathogenesis of influenza A (H5N1) in mammals // Adv. Biosci. Biotechnol. 2013. N 4. P. 979-985.
10.          Lee J., Hartman M., Kornfeld H. Macrophage apoptosis in tuberculosis // Yonsei Med. J. 2009. Vol. 50, N 1. P. 1-11.
11.          Marino S., Myers A., Flynn J.L., Kirschner D.E. TNF and IL-10 are major factors in modulation of the phagocytic cell environment in lung and lymph node in tuberculosis: a next-generation two-compartmental model // J. Theor. Biol. 2010. Vol. 265, N 4. P. 586-598.
12.          Thannickal V.J., Horowitz J.C. Evolving concepts of apoptosis in idiopathic pulmonary fibrosis // Proc. Am. Thorac. Soc. 2006. Vol.3, N 4. P. 350-356.
13.          Weibel E.L. Stereological methods.
London, 1979.

Вирусология
Состав стабилизатора и условия сублимационной сушки для сохранения инфекционной активности вируса гриппа
И.А.Дубровина, И.В.Киселева, Е.В.Киреева, Л.Г.Руденко – 62
ФГБНУ Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, РФ
         
Для стабилизации вакцинных препаратов их высушивают с использованием технологии сублимации. Одним из важных параметров, влияющих на качество вакцины после сушки, является состав защитной среды. В связи с возможностью распространения прионных заболеваний использование веществ, содержащих животные белки, не рекомендовано. Были подобраны защитные среды, не содержащие белков животного происхождения, и режим лиофилизации. Оптимальный режим лиофилизации состоит из этапа замораживания при -70°С, основного этапа при -35°С и этапа досушивания при 24°С. Защитные среды, содержащие в своем составе 4% трегалозу или 10% сахарозу и 5% соевый пептон, поддерживали наиболее высокую стабильность лиофилизированного вакцинного препарата при температурах в диапазоне 4-24°С. Это позволит преодолеть возможный разрыв холодовой цепи, что важно при транспортировке или хранении вакцинных препаратов.
Ключевые слова: вирусы гриппа, стабилизаторы, живая гриппозная вакцина, лиофилизация
Адрес для корреспонденции: irina.v.kiseleva@gmail.com. Киселева И.В.
Литература
1.            Аршинова О.Ю., Санарова Е.В., Ланцова А.В., Оборотова Н.А. Особенности лиофилизации липосомальных лекарственных препаратов (обзор) // Хим.-фарм. журн. 2011. Т. 46, №. 4. С. 29-34.
2.            Мазуркова Н.А., Скарнович М.О., Трошкова Г.П., Шишкина Л.Н. Оптимизация процесса сублимационного высушивания культуральных холодоадаптированных вакцинных образцов вируса гриппа A/H5N2 // Междунар. журн. прикл. и фундамент. исслед. 2011. №. 5. С. 98-100.
3.            Патент РФ № 2290205. Способ получения живой вакцины для профилактики гриппа / А.С.Гельфанд, С.И.Брызгалова, С.Я.Мельников // Бюл. № 36. Опубликовано
27.12.2006.
4.            EMEA 2001. Questions and answers on bovine spongiform encephalopathies and vaccine. URL: http://www. ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Other/2009/09/WC500003715.pdf (
дата обращения: 01.09.2017)
5.            Heikal A., Box K., Rothnie A., Storm J., Callaghan R., Allen M. The stabilisation of purified, reconstituted P-glycoprotein by freeze drying with disaccharides // Cryobiology. 2009. Vol. 58, N 1. P. 37-44.
6.            Taubenberger J.K., Morens D.M. Influenza: the once and future pandemic // Public Health Rep. 2010. Vol. 125, Suppl. 3. P. 15-26.
7.            WHO. Expert committee on biological standardization. Geneva, 19 to 23 October 2009. WHO recommendations to assure the quality, safety, and efficacy of influenza vaccines (human, live attenuated) for intranasal administration.
URL: http://www.who.int/biologicals/areas/vaccines/influenza/Influenza_vaccines_final_ 14MAY_2010.pdf. (дата обращения: 01.09.2017).
8.            WHO. Recommended composition of influenza virus vaccines for use in the 2015-2016 northern hemisphere influenza season, 26 February 2015. URL: http://www.who.int/influenza/vaccines/virus/recommendations/2015_16_north/en/
(дата обращения 01.09.2017).

Профилактические эффекты окисленного декстрана на активность легочных макрофагов мышей, инфицированных вирусом гриппа A
О.В.Потапова, Л.А.Черданцева*, А.В.Ковнер*, Т.В.Шаркова, А.В.Троицкий*, А.М.Шестопалов*, В.А.Шкурупий* – 67
Научно-образовательный центр ООО “Медицинская лаборатория “ОПТИМУМ”, Сочи, РФ; *ФГБНУ Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, РФ
         
Исследовали цитокиновый профиль легочных макрофагов мышей, инфицированных высокопатогенным штаммом вируса гриппа A/H5N1 после профилактических инъекций окисленного декстрана. Методами световой микроскопии, иммуногистохимического и морфометрического анализа было показано, что профилактические инъекции окисленного декстрана способствуют более эффективному устранению вируса, модуляции провоспалительного цитокинового ответа, реализации противовирусного ответа хозяина, снижая летальность инфицированных мышей. Полученные данные позволяют рекомендовать окисленный декстран для дальнейших исследований, направленных на создание вакцины, обладающей противовирусными и адъювантными свойствами.
Ключевые слова: окисленный декстран, легочные макрофаги, провоспалительные цитокины, iNOS, лизосомальные ферменты
Адрес для корреспонденции: cherdanceff@yandex.ru. Черданцева Л.А.
Литература
1.            Евразийский патент EA200801377. Способ получения диальдегиддекстрана / В.А.Шкурупий, А.В.Троицкий, О.В.Потапова, Н.Г.Лузгина. Дата публикации 28.04.2009.

2.            Gushchin V., Stegalkina S., Alam H.B., Kirkpatrick J.R., Rhee P.M., Koustova E. Cytokine expression profiling in human leukocytes after exposure to hypertonic and isotonic fluids // J. Trauma. 2002. Vol. 52, N 2. P. 867-871.
3.            Ilyushina N.A., Seiler J.P., Rehg J.E., Webster R.G., Govorkova E.A. Effect of neuraminidase inhibitor-resistant mutations on pathogenicity of clade 2.2 A/Turkey/15/06 (H5N1) influenza virus in ferrets // PLoS Pathog. 2010. Vol 6, N 5. P. e1000933. doi: 10.1371/journal. ppat.1000933.
4.            Ju X., Yan Y., Liu Q., Li N., Sheng M., Zhang L., Li X., Liang Z., Huang F., Liu K., Zhao Y., Zhang Y., Zou Z., Du J., Zhong Y., Zhou H., Yang P., Lu H., Tian M., Li D., Zhang J., Jin N., Jiang C. Neuraminidase of influenza A virus binds lysosome-associated membrane proteins directly and induces lysosome rupture // J. Virol. 2015. Vol. 89, N 20. P. 10 347-10 358.
5.            Kovner A.V., Potapova O.V., Shkurupy V.A., Shestopalov A.M. Morphofunctional status and the role of mononuclear phagocyte system lung compartment in the pathogenesis of influenza A (H5N1) in mammals // Adv. Biosci. Biotechnol. 2013. Vol 4, N 11. P. 979-985.
6.            Kozhin P.M., Chechushkov A.V., Zaitseva N.S., Lemza A.E., Men'shchikova E.B., Troitskii A.V., Shkurupy V.A. Effects of liposomal compositions with oxidized dextrans on functional activity of U937 macrophage-like cells in vitro // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 160, N 1. P. 57-60.
7.            Petrie A., Sabin C. Basic techniques for analyzing data: Numerical data. Medical statistics at a glance, 3rd edition. Oxford, 2009.
8.            Russell R.J., Kerry P.S., Stevens D.J., Steinhauer D.A., Martin S.R., Gamblin S.J., Skehel J.J. Structure of influenza hemagglutinin in complex with an inhibitor of membrane fusion // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2008. Vol. 105, N 46. P. 17 736-17 741.
9.            Shanley T.P., Warner R.L., Ward P.A. The role of cytokines and adhesion molecules in the development of inflammatory injury // Mol. Med. Today. 1995. Vol. 1, N 1. P. 40-45.
10.          Xu W., Chen M., Ge N., Xu J. Hemagglutinin from the H5N1 virus activates Janus kinase 3 to dysregulate innate immunity // PLoS One. 2012.
Vol. 7, N 2. P. e31721. doi: 10.1371/journal.pone.0031721.

Механизмы противовирусной активности полифенольного комплекса из морских трав семейства Zosteraceae по отношению к вирусу клещевого энцефалита
Н.В.Крылова, Г.Н.Леонова, О.С.Майстровская, А.М.Попов*, А.А.Артюков* – 71
ФГБНУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.П.Сомова, Владивосток, РФ; *ФГБНУ Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б.Елякова ДВО РАН, Владивосток, РФ
         
На перевиваемой культуре клеток почек эмбриона свиньи изучено противовирусное действие полифенольного комплекса из морских трав семейства Zosteraceae по отношению к высокопатогенному штамму вируса клещевого энцефалита. Противовирусная активность исследуемого соединения, характеризующаяся снижением инфекционного титра вируса, зависит от концентрации и схем его применения. Воздействие 100 мкг/мл полифенольного комплекса уменьшало накопление возбудителя в культуре клеток: при предварительной обработке вируса — на 4 lg, при предварительной обработке клеток — на 1.4 lg, при внесении соединения через 1 ч после инфицирования клеток — на 2.8 lg. Механизмы противовирусного действия исследуемого соединения обусловлены прямой инактивацией вируса и ингибированием его на ранней стадии репликации, что свидетельствует о перспективности этого соединения в терапии клещевого энцефалита.
Ключевые слова: полифенольный комплекс, противовирусная активность
Адрес для корреспонденции: krylovanatalya@gmail.com. Крылова Н.В.
Литература
1.            Мейхи Б. Вирусология. Методы. М., 1988.
2.            Патент РФ № 2432959. Средство, обладающее антиоксидантным, кардиопротекторным, противодиабетическим, противовоспалительным, гепатопротекторным, противоопухолевым и противовирусным действием / А.М.Попов, А.А.Артюков, О.Н.Кривошапко, Н.В.Крылова, Г.Н.Леонова, Э.П.Козловская // Бюл. № 31. Опубликовано 10.11.2011.
3.            Попов А.М., Кривошапко О.Н., Климович А.А., Артюков А.А. Биологическая активность и механизмы лечебного действия розмариновой кислоты, лютеолина и его сульфатированных производных // Биомед. химия.
2016. Т. 62, № 1. С. 22-30.
4.            Francisco V., Figueirinha A., Costa G., Liberal J., Lopes M.C., Garc
нa-Rodrнguez C., Geraldes C., Cruz M.T., Batista M.T. Chemical characterization and anti-inflammatory activity of luteolin glycosides isolated from lemongrass // J. Funct. Foods. 2014. Vol. 10. P. 436-443.
5.            Liu A.L., Liu B., Qin H.L., Lee S.M., Wang Y.T., Du G.H. Anti-influenza virus activities of flavonoids from the medicinal plant Elsholtzia rugulosa // Planta Med. 2008. Vol. 74, N 8. P. 847-851.
6.            Liu M.M., Zhou L., He P.L., Zhang Y.N., Zhou J.Y., Shen Q., Chen X.W., Zuo J.P., Li W., Ye D.Y. Discovery of flavonoid derivatives as anti-HCV agents via pharmacophore search combining molecular docking strategy // Eur. J. Med. Chem. 2012. Vol. 52. P. 33-43.
7.            L
уpez-Lбzaro M. Distribution and biological activities of the flavonoid luteolin // Mini Rev. Med. Chem. 2009. Vol. 9, N 1. P. 31-59.
8.            Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immunol. Methods. 1983. Vol. 65, N 1-2. P. 55-63.
9.            Swarup V., Ghosh J., Ghosh S., Saxena A., Basu A. Antiviral and anti-inflammatory effects of rosmarinic acid in an experimental murine model of Japanese encephalitis // Antimicrob. Agents Chemother. 2007. Vol. 51, N. 9. P. 3367-3370.
10.          Xu Z.S., Chou G.X., Wang Z.T. A new luteolin triglycoside from Ficus ischnopoda leaves // Nat. Prod. Res. 2014. Vol. 28, N 14. P. 1052-1057.
11.          Zhang Y., Chen X., Yang L., Zu Y., Lu Q. Effects of rosmarinic acid on liver and kidney antioxidant enzymes, lipid peroxidation and tissue ultrastructure in aging mice // Food Funct.
2015. Vol. 6, N. 3. P. 927-931.

Генетика
Полиморфный вариант rs2228145 (С>A) гена IL6R как маркер генетической предрасположенности у русского населения Карелии к развитию неалкогольного стеатогепатита
Л.В.Топчиева, И.В.Курбатова, О.П.Дуданова*, А.А.Соколовская*, А.А.Шиповская* – 75
ФГБУН Институт биологии Карельского научного центра РАН, Петрозаводск, Республика Карелия, РФ; *ФГБУ ВО Петрозаводский государственный университет, Петрозаводск, Республика Карелия, РФ
         
Обнаружена ассоциация полиморфного варианта rs2228145 (С>A) гена IL6R с развитием неалкогольного стеатогепатита у жителей Карелии. У носителей СС генотипа по полиморфному маркеру rs2228145 риск развития неалкогольного стеатогепатита более, чем в 2 раза выше, по сравнению с носителями других генотипов. Показано повышение уровня ИЛ-6 в плазме крови и содержания транскриптов гена IL6R в лейкоцитах периферической крови пациентов с неалкогольным стеатогепатитом по сравнению со здоровыми людьми. Влияние носительства генотипа по полиморфному маркеру rs2228145 на уровень ИЛ-6, содержание мРНК генов IL6 и IL6R не обнаружено. Полиморфный вариант гена IL6R rs2228145 (C>A), возможно, вовлечен в генетическую предрасположенность населения Карелии к неалкогольному стеатогепатиту. Однако биохимические и молекулярные механизмы влияния rs2228145 на развитие неалкогольного стеатогепатита предстоит еще выяснить.
Ключевые слова: неалкогольный стеатогепатит, интерлейкин 6, рецепторы цитокинов, ген IL6R, полиморфные варианты гена
Адрес для корреспонденции: topchieva67@mail.ru. Топчиева Л.В.
Литература
1.            Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология: Основы доказательной медицины. М
., 1998.
2.            Braunersreuther V., Viviani G.L., Mach F., Montecucco F. Role of cytokines and chemokines in non-alcoholic fatty liver disease // World J. Gastroenterol. 2012. Vol. 18, N 8. P. 727-735.
3.            Ferreira R.C., Freitag D.F., Cutler A.J., Howson J.M., Rainbow D.B., Smyth D.J., Kaptoge S., Clarke P., Boreham C., Coulson R.M., Pekalski M.L., Chen W.M., Onengut-Gumuscu S., Rich S.S., Butterworth A.S., Malarstig A., Danesh J., Todd J.A. Functional IL6R 358Ala allele impairs classical IL-6 receptor signaling and influences risk of diverse inflammatory diseases // PLoS Genet. 2013. Vol. 9, N 4. P. e1003444. doi: 10.1371/journal.pgen.1003444.
4.            Kopp H.P., Kopp C.W., Festa A., Krzyzanowska K., Kriwanek S., Minar E., Roka R., Schernthaner G. Impact of weight loss on inflammatory proteins and their association with the insulin resistance syndrome in morbidly obese patients // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2003. Vol. 23, N 6. P. 1042-1047.
5.            Krook A. IL-6 and metabolism-new evidence and new questions // Diabetologia. 2008. Vol. 51, N 7. P. 1097-1099.
6.            Livak K.J., Schmittgen T.D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method // Methods. 2001. Vol. 25, N 4. P. 402-408.
7.            Matsusaka T., Fujikawa K., Nishio Y., Mukaida N., Matsushima K., Kishimoto T., Akira S. Transcription factors NF-IL6 and NF-kappa B synergistically activate transcription of the inflammatory cytokines, interleukin 6 and interleukin 8 // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1993. Vol. 90, N 21. P. 10 193-10 197.
8.            Pinto Lde F., Compri C.M., Fornari J.V., Bartchewsky W., Cintra D.E., Trevisan M., Carvalho Pde O., Ribeiro M.L., Velloso L.A., Saad M.J., Pedrazzoli J. Jr, Gambero A. The immunosuppressant drug, thalidomide, improves hepatic alterations induced by a high-fat diet in mice // Liver Int. 2010. Vol. 30, N 4. P. 603-610.
9.            Polgár A., Brózik M., Tóth S., Holub M., Hegyi K., Kádár A., Hodinka L., Falus A. Soluble interleukin-6 receptor in plasma and in lymphocyte culture supernatants of healthy individuals and patients with systemic lupus erythematosus and rheumatoid arthritis // Med. Sci. Monit. 2000. Vol. 6, N 1. P. 13-18.
10.          Rafiq S., Frayling T.M., Murray A., Hurst A., Stevens K., Weedon M.N., Henley W., Ferrucci L., Bandinelli S., Corsi A.M., Guralnik J.M., Melzer D. A common variant of the interleukin 6 receptor (IL-6r) gene increases IL-6r and IL-6 levels, without other inflammatory effects // Genes Immun. 2007. Vol. 8, N 7. P. 552-559.
11.          Scheller J., Chalaris A., Schmidt-Arras D., Rose-John S. The pro- and anti-inflammatory properties of the cytokine interleukin-6 // Biochim. Biophys. Acta. 2011. Vol. 1813, N 5. P. 878-888.
12.          Streetz K.L., Tacke F., Leifeld L., Wüstefeld T., Graw A., Klein C., Kamino K., Spengler U., Kreipe H., Kubicka S., M
ьller W., Manns M.P., Trautwein C. Interleukin 6/gp130-dependent pathways are protective during chronic liver diseases // Hepatology. 2003. Vol. 38, N 1. P. 218-229.
13.          van Dongen J., Jansen R., Smit D., Hottenga J.J., Mbarek H., Willemsen G., Kluft C.; AAGC Collaborators, Penninx B.W., Ferreira M.A., Boomsma D.I., de Geus E.J. The contribution of the functional IL6R polymorphism rs2228145, eQTLs and other genome-wide SNPs to the heritability of plasma sIL-6R levels // Behav. Genet. 2014. Vol. 44, N 4. P. 368-382.
14.          Wang F., Xu L., Feng X., Guo D., Tan W., Zhang M. Interleukin-29 modulates proinflammatory cytokine production in synovial inflammation of rheumatoid arthritis // Arthritis Res. Ther. 2012. Vol. 14, N 5. R228. doi: 10.1186/ar4067.
15.          Wieckowska A., Papouchado B.G., Li Z., Lopez R., Zein N.N., Feldstein A.E. Increased hepatic and circulating interleukin-6 levels in human nonalcoholic steatohepatitis // Am. J. Gastroenterol.
2008. Vol. 103, N 6. P. 1372-1379.

Влияние коэнзима Q10 на экcпрессию гена UbiAd1 на модели локальной ишемии головного мозга у крыс
О.В.Поварова, А.В.Балацкий*, В.С.Гусаков, О.С.Медведев – 80
Факультет фундаментальной медицины, *Медицинский научно-образовательный центр МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
         
Исследовали влияние коэнзима Q10 на экспрессию гена UbiA пренилтрансферазного доменсодержащего белка-1 (UbiAd1), участвующего в синтезе витамина K2 и, возможно, коэнзима Q10, на модели ишемического инсульта у крыс. Установлено, что ишемия приводит к статистически значимому повышению уровня экспрессии мРНК UbiAd1 в контралатеральном полушарии головного мозга животных. Внутрибрюшинное введение коэнзима Q10 (30 мг/кг) приводило к достоверному увеличению мРНК UbiAd1 в коре ипсилатерального полушария крыс с ишемией по сравнению с контролем, что подтверждает нейропротективное действие антиоксиданта.
Ключевые слова: нейропротекция, локальная ишемия головного мозга, экспрессия гена UbiAd1, коэнзим Q10
Адрес для корреспонденции: oxpovarova@gmail.com. Поварова О.В.
Литература
1.            Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М., 2001.
2.            Поварова О.В., Медведев О.С. Нейропротекторное действие витамина К // Экспер. и клин. фармакол.
2015. Т. 78, № 10. С. 40-44.
3.            Chen S.T., Hsu C.Y., Hogan E.L., Maricq H., Balentine J.D. A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction // Stroke. 1986. Vol. 17, N 4. P. 738-743.
4.            Feigin V.L., Norrving B., George M.G., Foltz J.L., Roth G.A., Mensah G.A. Prevention of stroke: a strategic global imperative // Nat. Rev. Neurol. 2016. Vol. 12, N 9. P. 501-512.
5.            Groneberg D.A., Kindermann B., Althammer M., Klapper M., Vormann J., Littarru G.P., Döring F. Coenzyme Q10 affects expression of genes involved in cell signalling, metabolism and transport in human CaCo-2 cells // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2005. Vol. 37, N 6. P. 1208-1218.
6.            Jickling G.C., Sharp F.R. Blood biomarkers of ischemic stroke // Neurotherapeutics. 2011. Vol. 8, N 3. P. 349-360.
7.            Kalayci M., Unal M.M., Gul S., Acikgoz S., Kandemir N., Hanci V., Edebali N., Acikgoz B. Effect of coenzyme Q10 on ischemia and neuronal damage in an experimental traumatic brain-injury model in rats // BMC Neurosci. 2011. Vol. 12. P. 75. doi: 10.1186/1471-2202-12-75.
8.            Linnane A.W., Kopsidas G., Zhang C., Yarovaya N., Kovalenko S., Papakostopoulos P., Eastwood H., Graves S., Richardson M. Cellular redox activity of coenzyme Q10: effect of CoQ10 supplementation on human skeletal muscle // Free Radic. Res. 2002. Vol. 36, N 4. P. 445-453.
9.            Medvedeva E.V., Dmitrieva V.G., Povarova O.V., Limborska S.A., Skvortsova V.I., Myasoedov N.F., Dergunova L.V. The peptide semax affects the expression of genes related to the immune and vascular systems in rat brain focal ischemia: genome-wide transcriptional analysis // BMC Genomics. 2014. Vol. 15. P. 228. doi: 10.1186/1471-2164-15-228.
10.          Mugoni V., Postel R., Catanzaro V., De Luca E., Turco E., Digilio G., Silengo L., Murphy M.P., Medana C., Stainier D.Y., Bakkers J., Santoro M.M. Ubiad1 is an antioxidant enzyme that regulates eNOS activity by CoQ10 synthesis // Cell. 2013. Vol. 152, N 3. P. 504-518.
11.          Schmelzer C., Kitano M., Hosoe K., Döring F. Ubiquinol affects the expression of genes involved in PPAR
a signalling and lipid metabolism without changes in methylation of CpG promoter islands in the liver of mice // J. Clin. Biochem. Nutr. 2012. Vol. 50, N 2. P. 119-126.
12.          Schmelzer C., Lindner I., Rimbach G., Niklowitz P., Menke T., Döring F. Functions of coenzyme Q10 in inflammation and gene expression // Biofactors. 2008. Vol. 32, N 1-4. P. 179-183.
13.          Sharp F.R., Jickling G.C., Stamova B., Tian Y., Zhan X., Liu D., Kuczynski B., Cox C.D., Ander B.P. Molecular markers and mechanisms of stroke: RNA studies of blood in animals and humans // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2011. Vol. 31, N 7. P. 1513-1531.
14.          Shearer M.J., Newman P. Recent trends in the metabolism and cell biology of vitamin K with special reference to vitamin K cycling and MK-4 biosynthesis // J. Lipid Res. 2014. Vol. 55, N 3. P. 345-362.
15.          Zhan X., Jickling G.C., Tian Y., Stamova B., Xu H., Ander B.P., Turner R.J., Mesias M., Verro P., Bushnell C., Johnston S.C., Sharp F.R. Transient ischemic attacks characterized by RNA profiles in blood // Neurology. Vol. 77, N 19. P. 1718-1724.

Полиморфизм гена Oprm1 и его ассоциация с признаками интоксикации крыс N-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропионанилидом
О.В.Варламова, А.В.Бабкин, И.С.Бердинских, Г.В.Назаров, А.С.Никифоров, В.Н.Быков, М.Б.Иванов* – 84
ФГБУ Государственный научно-исследовательский испытательный институт военной медицины Министерства обороны РФ, Санкт-Петербург; *ФГБУН Институт токсикологии ФМБА России, Санкт-Петербург
         
Исследована ассоциация полиморфизмов гена Oprm1 с признаками интоксикации крыс при воздействии N-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропионанилида. Установлено, что время наступления признаков интоксикации лабораторных животных зависит от их генетических особенностей. Одним из возможных маркеров восприимчивости животных к действию агонистов опиоидных рецепторов является полиморфный вариант rs105312806 гена Oprm1. Это подтверждается различиями в проявлении таких признаков интоксикации, как время наступления бокового положения и продолжительность сна, у крыс-носителей различных аллельных вариантов гена в гомозиготном состоянии. У крыс с генотипом АА время наступления бокового положения меньше в 1.3 раза, а длительность сна больше в 3.5 раза по сравнению с животными-носителями генотипа GG.
Ключевые слова: генетический полиморфизм, ген Oprm1, боковое положение, продолжительность сна, N-(1-фенэтил-4-пиперидил)-пропионанилид
Адрес для корреспонденции: nikiforov2004@mail.ru. Никифоров А.С.
Литература
1.            Гланц С. Медико-биологическая статистика. М., 1999.
2.            Зотова И.В., Никитин А.Г., Фаттахова Э.Н., Бровкин А.Н., Ходырев Д.С., Лаврикова Е.Ю., Исаева М.Ю., Косухина А.С., Носиков В.В., Затейщиков Д.А. Влияние полиморфизма генов CYP2C9 и VKORC1 на безопасность терапии варфарином // Клиническая практика. 2013. № 4. С. 3-10.
3.            Иванец Н.Н., Анохина И.П., Винникова М.А. Наркология: национальное руководство. М., 2008.
4.            Коваленко В.Н., Кучменко Е.Б., Мхитарян Л.С. Роль одиночных нуклеотидных полиморфизмов и микроРНК в патогенезе заболеваний сердечно-сосудистой системы (обзор литературы) // Журнал НАМН Украины. 2014. Т. 20, № 1. С. 62-73.
5.            Кукес В.Г. Клиническая фармакокинетика: теоретические, прикладные и аналитические аспекты: руководство. М., 2009.
6.            Сычев Д.А., Игнатьев И.В., Гасанов Н.А., Кукес В.Г. Клиническая фармакогенетика системы биотрансформации и транспортеров лекарственных средств: дань моде или прикладное направление? // ТМЖ. 2006.
№ 4. С. 21-26.
7.            Ginosar Y., Davidson E.M., Meroz Y., Blotnick S., Shacham M., Caraco Y. Mu-opioid receptor (A118G) single-nucleotide polymorphism affects alfentanil requirements for extracorporeal shock wave lithotripsy: a pharmacokinetic-pharmacodynamic study // Br. J. Anaesth. 2009. Vol. 103, N 3. P. 420-427.
8.            Kasai S., Ikeda K. Pharmacogenomics of the human µ-opioid receptor // Pharmacogenomics. 2011. Vol. 12, N 9. P. 1305-1320.
9.            Matthes H.W., Maldonado R., Simonin F., Valverde O., Slowe S., Kitchen I., Befort K., Dierich A., Le Meur M., Dollé P., Tzavara E., Hanoune J., Roques B.P., Kieffer B.L. Loss of morphine-induced analgesia, reward effect and withdrawal symptoms in mice lacking the mu-opioid-receptor gene // Nature. 1996. Vol. 383. P. 819-823.
10.          Sia A.T., Lim Y., Lim E.C., Goh R.W., Law H.Y., Landau R., Teo Y.Y., Tan E.C. A118G single nucleotide polymorphism of human mu-opioid receptor gene influences pain perception and patient-controlled intravenous morphine consumption after intrathecal morphine for postcesarean analgesia // Anesthesiology. 2008. Vol. 109, N 3. P. 520-526.
11.          The Opiate Receptors / Ed. G.W.Pasternak. N.Y., 2011.
12.          Uhl G.R., Sora I., Wang Z. The mu opiate receptor as a candidate gene for pain: polymorphisms, variations in expression, nociception, and opiate responses // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1999. Vol. 96, N 14. P. 7752-7755.
13.          Walter C., Lötsch J. Meta-analysis of the relevance of the OPRM1 118A>G genetic variant for pain treatment // Pain. 2009.
Vol. 146, N 3. P. 270-275.

Онкология
Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы в сыворотке крови больных раком эндометрия: клинико-морфологические корреляции
Е.С.Герштейн, С.В.Муштенко, В.Д.Ермилова, Н.Е.Левченко, Н.Е.Кушлинский – 88
ФГБУ НМИЦ онкологии им. Н.Н.Блохина Минздрава России, Москва
         
Иммуноферментными методами определено содержание ММП-2, ММП-7 и ММП-9 и ТИМП-1, ТИМП-2 в сыворотке крови 94 больных раком эндометрия, 28 пациенток с полипами, 25 — с гиперплазией эндометрия и 77 здоровых женщин. Продемонстрировано значимое увеличение уровней ММП-7 и ТИМП-2 как при раке, так и при доброкачественных изменениях. Наиболее значительным по отношению к контролю было увеличение уровня ММП-7, однако сывороточные концентрации этого маркера были практически одинаковыми у больных раком и доброкачественными заболеваниями. Уровни ММП-2, ММП-9 и ТИМП-1, напротив, были снижены у больных раком по сравнению с контролем; уровни ММП-9 и ТИМП-1 были также ниже у больных раком, чем у пациенток с полипами и гиперплазией эндометрия. Значимой взаимосвязи уровней исследованных маркеров с показателями распространенности, гистологическим строением и степенью дифференцировки рака эндометрия не обнаружено. Не выявлено также различий между содержанием маркеров в сыворотке крови пациенток с полипами и гиперплазией эндометрия различной степени тяжести. Исследованные ММП и ТИМП нельзя рассматривать в качестве потенциальных диагностических маркеров рака эндометрия, но они могут быть полезны для мониторинга и прогноза заболевания и оценки чувствительности к таргетной терапии.
Ключевые слова: матриксные металлопротеиназы, тканевые ингибиторы ММП, сыворотка крови, рак эндометрия
Адрес для корреспонденции: esgershtein@gmail.com. Герштейн Е.С.
Литература
1.            Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Клинические перспективы исследования ассоциированных с опухолью протеаз и их тканевых ингибиторов у онкологических больных // Вестн. РАМН
. 2013. № 5. C. 16-27.
2.            Adamiak A., Postawski K., Semczuk A., Rechberger T., Jakowicki J.A. Prognostic value of serum MMP-2 level in uterine cancer affected women // Ginekol. Pol. 2000. Vol. 71, N 9. P. 1198-1201.
3.            Erdemoglu E., Güney M., Karahan N., Mungan T. Immunohistochemical expression of MMP-2, MMP-9 and COX-2 in Stage IA malignant polyps of the endometrium // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2008. Vol. 29, N 5. P. 444-449.
4.            Graesslin O., Cortez A., Fauvet R., Lorenzato M., Birembaut P., Daraï E. Metalloproteinase-2, -7 and -9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 and -2 expression in normal, hyperplastic and neoplastic endometrium: a clinical-pathological correlation study // Ann. Oncol. 2006. Vol. 17, N 4. P. 637-645.
5.            Grybos A., Bar J. The relationships between the immunoexpression of KAI1, MMP-2, MMP-9 and steroid receptors expression in endometrial cancer // Folia Histochem. Cytobiol. 2014. Vol. 52, N 3. P. 187-194.
6.            Honkavuori M., Talvensaari-Mattila A., Puistola U., Turpeenniemi-Hujanen T., Santala M. High serum TIMP-1 is associated with adverse prognosis in endometrial carcinoma // Anticancer Res. 2008. Vol. 28, N 5A. P. 2715-2719.
7.            Honkavuori-Toivola M., Santala M., Soini Y., Turpeenniemi-Hujanen T., Talvensaari-Mattila A. Combination of strong MMP-2 and weak TIMP-2 immunostainings is a significant prognostic factor in endometrial carcinoma // Dis. Markers. 2013. Vol. 35, N 4. P. 261-266.
8.            Määttä M., Soini Y., Liakka A., Autio-Harmainen H. Localization of MT1-MMP, TIMP-1, TIMP-2, and TIMP-3 messenger RNA in normal, hyperplastic, and neoplastic endometrium. Enhanced expression by endometrial adenocarcinomas is associated with low differentiation // Am. J. Clin. Pathol. 2000. Vol. 114, N 3. P. 402-411.
9.            Moser P.L., Hefler L., Tempfer C., Neunteufel W., Kieback D.G., Gitsch G. Immunohistochemical detection of matrix metalloproteinases (MMP) 1 and 2, and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2) in stage I and II endometrial cancer // Anticancer Res. 1999. Vol. 19, N 3B. P. 2365-2367.
10.          Pilka R., Norata G.D., Domanski H., Andersson C., Hansson S., Eriksson P., Casslén B. Matrix metalloproteinase-26 (matrilysin-2) expression is high in endometrial hyperplasia and decreases with loss of histological differentiation in endometrial cancer // Gynecol. Oncol. 2004. Vol. 94, N 3. P. 661-670.
11.          Puljiz M., Puljiz Z., Vucemilo T., Ramić S., Knezević F., Culo B., Alvir I., Tomica D., Danolić D. Prognostic significance of matrix metalloproteinases 2 and 9 in endometrial cancer // Coll. Antropol. 2012. Vol. 36, N 4. P. 1367-1372.
12.          Shaco-Levy R., Sharabi S., Piura B., Sion-Vardy N. MMP-2, TIMP-1, E-cadherin, and beta-catenin expression in endometrial serous carcinoma compared with low-grade endometrial endometrioid carcinoma and proliferative endometrium // Acta Obstet. Gynecol. Scand. 2008. Vol. 7, N 8. P. 868-874.
13.          Ueno H., Yamashita K., Azumano I., Inoue M., Okada Y. Enhanced production and activation of matrix metalloproteinase-7 (matrilysin) in human endometrial carcinomas // Int. J. Cancer. 1999. Vol. 84, N 5. P. 470-477.
14.          Weigel M.T., Krämer J., Schem C., Wenners A., Alkatout I., Jonat W., Maass N., Mundhenke C. Differential expression of MMP-2, MMP-9 and PCNA in endometriosis and endometrial carcinoma // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2012. Vol. 160, N 1. P. 74-78.
15.          Yuan Y., Shen N., Yang S.Y., Zhao L., Guan Y.M. Extracellular matrix metalloproteinase inducer and matrix metalloproteinase-2 overexpression is associated with loss of hormone receptor expression and poor prognosis in endometrial cancer // Oncol.
Lett. 2015. Vol. 10, N 1. P. 342-348.

Эффективное действие тималина на опухоль и состояние тимуса в эксперименте in vivo при использовании режима активационной терапии
Г.В.Жукова, А.И.Шихлярова, Т.А.Бартенева, А.Н.Шевченко, Ф.М.Захарюта – 94
ФГБУ Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Минздрава России, Ростов-на-Дону
         
В экспериментах на белых беспородных крысах-самцах с перевивной саркомой-45 было показано выраженное противоопухолевое действие тималина в дозах, более низких по сравнению с терапевтическими. Остановка роста опухоли и ее регрессия наблюдалась более чем у половины животных, торможение ее роста на 78% — в остальных случаях. Были изучены микроструктурные изменения в тимусе. Отмечено значительное увеличение лимфопролиферативной активности, а также повышение числа тканевых базофилов и плазмоцитов в дольках тимуса. При регрессии опухоли отмечено развитие стойких антистрессорных адаптационных реакций спокойной и повышенной активации. Высокую эффективность тималина связывают с использованием сниженной дозы препарата и целенаправленным изменением ее величины в течение курса воздействий в соответствии с режимами активационной терапии.
Ключевые слова: тималин, перевивные опухоли, антистрессорные адаптационные реакции, тимус, клетки иммунной системы
Адрес для корреспонденции: galya_57@mail.ru. Жукова Г.В.
Литература
1.            Анисимов В.Н, Хавинсон В.Х. Применение пептидных биорегуляторов для профилактики рака: результаты 35-летних исследований и перспективы // Вопр. онкол. 2009. Т. 55, № 3. С. 291-304.
2.            Арион В.Я., Зимина И.В., Москвина С.М. Иммунобиологические свойства и клиническое применение тимозинов и других препаратов тимуса // Иммунопатол., аллергол., инфектол. 2008. № 1. С. 26-40.
3.            Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Кузьменко Т.С., Шихлярова А.И. Антистрессорные реакции и активационная терапия. Часть I. Екатеринбург, 2002.
4.            Заморский И.И., Щудрова Т.С., Линькова Н.С., Ничик Т.Е., Хавинсон В.Х. Пептиды восстанавливают функциональное состояние почек при цисплатиновой острой почечной недостаточности // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 6. С. 708-712.
5.            Зинченко С.В. Иммуномодуляторы в комплексной терапии онкологических больных (обзор литературы) // Поволжск. онкол. вестник. 2014. № 1. С. 57-64.
6.            Красовский Г.Н., Рахманин Ю.А., Егорова Н.А. Экстраполяция токсикологических данных с животных на человека. М., 2009.
7.            Новоселецкая А.В., Киселева Н.М., Зимина И.В., Белова О.В., Иноземцев А.Н., Арион В.Я., Сергиенко В.И. Стресспротективный эффект пептидов тимуса // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 158, № 12. С. 715-718.
8.            Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Ванюшин Б.Ф. Роль пептидов в эпигенетической регуляции активности генов в онкогенезе // Бюл. экспер. биол. 2011. Т. 152, № 10. С. 452-457.
9.            Хавинсон В.Х., Рыжак Г.А. Пептидная регуляция основных функций организма // Вест. Росздравнадзора. 2010. № 6. С. 58-62.
10.          Червякова Н.А., Линькова Н.С., Чалисова Н.И., Концевая Е.А., Трофимова С.В., Хавинсон В.Х. Молекулярные аспекты иммунопротекторного действия пептидов в селезенке при ее старении // Успехи геронтол.
2013. Т. 26, № 2. С. 224-228.
11.          He S.H. Key role of mast cells and major secretory products in Inflammatory bowel disease // World. J. Gastroenterol. 2004. Vol. 10, N 3. P. 309-318.
12.          Kit O.I., Shikhlyarova A.I., Zhukova G.V., Maryanovskaya G.Y., Barsukova L.P., Korobeinikova E.P., Sheiko E.A., Protasova T.P., Evstratova O.F., Barteneva T.A., Salatov R.N., Sergostiants G.Z., Atmachidi D.P. Activation therapy: theoretical and applied aspects // Cardiometry. 2015. N 7. P. 22-29. doi: 10.12710/cardiometry.2015.7.2229.
13.          Murray P.R., Rosenthal K.S., Pfaller M.P. Elements of Host Protective Responses // Medical Microbiology. Philadelphia, 2013. P. 33-44.
14.          Wolf E., Milazzo S., Boehm K., Zwahlen M., Horneber M. Thymic peptides for treatment of cancer patients // Cochrane Database Syst. Rev. 2011. N 2. CD003993. doi: 10.1002/14651858.CD003993.pub3.
15.          Zhukova G.V., Shikhliarova A.I., Soldatov A.V., Barteneva T.A., Petrosian V.I., Gudtskova T.N., Bragina M.I., Polozhentsev O.E., Sheiko E.A., Maschenko N.M., Shirnina E.A., Zlatnik E.Y., Kurkina T.A. Some approaches to the activation of antitumor resistance mechanisms and functional analogs in the categories of synergetics // Biofizika.
2016. Vol. 61, N 2. P. 359-373.

Иммунохимическая диагностика множественной миеломы
Н.В.Любимова, Ю.С.Тимофеев, В.М.Абаев, О.М.Вотякова, Н.Е.Кушлинский – 99
ФГБУ НМИЦ онкологии им Н.Н.Блохина Минздрава России, Москва
         
Анализировали диагностические возможности комплексного иммунохимического анализа сыворотки крови и суточной мочи у 118 пациентов с множественной миеломой. У 95 больных выявлена секреция моноклональных интактных иммуноглобулинов с тяжелыми цепями G (N=69), A (N=19), М (N=4), биклональная секреция парапротеинов G и A (N=3). У 16 пациентов выявлен белок Бенс-Джонса в сыворотке крови и суточной моче, у 3 — только протеинурия Бенс-Джонса. Диагностическая чувствительность иммуноэлектрофореза сыворотки крови при множественной миеломе составила 94.1%. Анализ парапротеинурии имеет наибольшее значение при миеломе Бенс-Джонса, при которой возможна экскреция парапротеина при отсутствии парапротеинемии. Комплексное исследование с использованием иммуноэлектрофоретического и иммунотурбидиметрического методов при множественной миеломе повышает диагностическую чувствительность до 99.2%.
Ключевые слова: множественная миелома, моноклональная секреция, парапротеины, белок Бенс-Джонса, диагностика
Адрес для корреспонденции: biochimia@yandex.ru. Любимова Н.В.
Литература
1.            Любимова Н.В. Кадагидзе З.Г. Опухолевые маркеры. Общая характеристика, клиническое значение и рекомендации по использованию // Биологические маркеры опухолей: фундаментальные и клинические исследования / Под ред. Н.Е.Кушлинского, М.А.Красильникова. М., 2017. С. 142-196.
2.            Любимова Н.В, Турко Т.А., Вотякова О.М., Кушлинский Н.Е. Свободные легкие цепи иммуноглобулинов в сыворотке крови больных моноклональными гаммапатиями // Бюл. экспер. биол.
2012. Т. 153, № 2. С. 217-222.
3.            Bradwell A.R. Serum free light chain measurements move to center stage // Clin. Chem. 2005. Vol. 51, N 5. P. 805-807.
4.            Bradwell A.R., Carr-Smith H.D., Mead G.P., Harvey T.C., Drayson M.T. Serum test for assessment of patients with Bence Jones myeloma // Lancet. 2003. Vol. 361. P. 489-491.
5.            Bradwell A.R., Carr-Smith H.D., Mead G.P., Tang L.X., Showell P.J., Drayson M.T., Drew R. Highly sensitive, automated immunoassay for immunoglobulin free light chains in serum and urine // Clin. Chem. 2001. Vol. 47, N 4. P. 673-680.
6.            Katzmann J.A., Clark R.J., Abraham R.S., Bryant S., Lymp J.F., Bradwell A.R., Kyle R.A. Serum reference intervals and diagnostic ranges for free kappa and free lambda immunoglobulin light chains: relative sensitivity for detection of monoclonal light chains // Clin. Chem. 2002. Vol. 48, N 9. P. 1437-1444.
7.            Kyle R.A., Durie B.G., Rajkumar S.V., Landgren O., Blade J., Merlini G., Kröger N., Einsele H., Vesole D.H., Dimopoulos M., San Miguel J., Avet-Loiseau H., Hajek R., Chen W.M., Anderson K.C., Ludwig H., Sonneveld P., Pavlovsky S., Palumbo A., Richardson P.G., Barlogie B., Greipp P., Vescio R., Turesson I., Westin J., Boccadoro M.; International Myeloma Working Group. Monoclonal gammopathy of undetermined signigicance (MGUS) and smoldering (asymptomatic) multiple myeloma: IMWG consensus perspectives risk factors for progression and guidelines for monitoring and management // Leukemia. 2010. Vol. 24, N 6. P. 1121-1127.
8.            Misra A., Mishra J., Chandramohan J., Sharma A., Raina V., Kumar R., Soni S., Chopra A. Old but still relevant: high resolution electrophoresis and Immunofixation in multiple myeloma // Indian J. Hematol. Blood Transfus. 2016. Vol. 32, N 1. P. 10-17.
9.            Murray D.L., Ryu E., Snyder M.R., Katzmann J.A. Quantitation of serum monoclonal proteins: relationship between agarose gel electrophoresis and immunonephelometry // Clin. Chem. 2009. Vol. 55, N 8. P. 1523-1529.
10.          Rajkumar S.V., Dimopoulos M.A., Palumbo A., Blade J., Merlini G., Mateos M.V., Kumar S., Hillengass J., Kastritis E., Richardson P., Landgren O., Paiva B., Dispenzieri A., Weiss B., LeLeu X., Zweegman S., Lonial S., Rosinol L., Zamagni E., Jagannath S., Sezer O., Kristinsson S.Y., Caers J., Usmani S.Z., Lahuerta J.J., Johnsen H.E., Beksac M., Cavo M., Goldschmidt H., Terpos E., Kyle R.A., Anderson K.C., Durie B.G., Miguel J.F. International Myeloma Working Group updated criteria for the diagnosis of multiple myeloma // Lancet Oncol. 2014. Vol. 15. N 12. P. e538-e548
11.          Willrich M.A., Katzmann J.A. Laboratory testing requirements for diagnosis and follow-up of multiple myeloma and related plasma cell dyscrasias // Clin.
Chem. Lab. Med. 2016. Vol. 54, N 6. P. 907-919.

Новые флюоресцентные репортерные системы для оценки экспрессии E- и N-кадгеринов
О.А.Бурмистрова, C.В.Никулин, Г.С.Захарова, К.А.Фомичева*, Б.Я.Алексеев*, М.Ю.Шкурников* – 104
ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ; МНИОИ им. П.А.Герцена — филиал ФГБУ НМИЦ радиологии Минздрава России, Москва
         
В процессе метастазирования клетки солидных опухолей претерпевают фенотипические изменения, связанные с эпителиально-мезенхимальной трансформацией. Эпителиально-мезенхимальная трансформация рассматривается как потенциальная мишень при разработке новых препаратов для лечения онкологических заболеваний. Были получены флюоресцентные репортерные системы для оценки экспрессии генов-маркеров эпителиального и мезенхимального состояния (E- и N-кадгеринов). Описанные подходы могут быть использованы для создания аналогичных репортерных систем.
Ключевые слова: эпителиально-мезенхимальная трансформация, флюоресцентные репортеры, N-кадгерин, E-кадгерин
Адрес для корреспонденции: o.burmistrova@bioclinicum.com. Бурмистрова О.А.
Литература
1.            Cardamone M.D., Bardella C., Gutierrez A., Di Croce L., Rosenfeld M.G., Di Renzo M.F., De Bortoli M. ERalpha as ligand-independent activator of CDH-1 regulates determination and maintenance of epithelial morphology in breast cancer cells // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2009. Vol. 106, N 18. P. 7420-7425.
2.            Hajra K.M., Chen D.Y., Fearon E.R. The SLUG zinc-finger protein represses E-cadherin in breast cancer // Cancer Res. 2002. Vol. 62, N 6. P. 1613-1618.
3.            Jensen M.A., Fukushima M., Davis R.W. DMSO and betaine greatly improve amplification of GC-rich constructs in de novo synthesis // PLoS One. 2010. Vol. 5, N 6. P. e11024. doi: 10.1371/journal.pone.0011024.
4.            Kieleczawa J. Fundamentals of sequencing of difficult templates — an overview // J. Biomol. Tech. 2006. Vol. 17, N 3. P. 207-217.
5.            Le Mée S., Fromigué O., Marie P.J. Sp1/Sp3 and the myeloid zinc finger gene MZF1 regulate the human N-cadherin promoter in osteoblasts // Exp. Cell Res. 2005. Vol. 302, N 1. P. 129-142.
6.            Lotz-Jenne C., Lüthi U., Ackerknecht S., Lehembre F., Fink T., Stritt M., Wirth M., Pavan S., Bill R., Regenass U., Christofori G., Meyer-Schaller N. A high-content EMT screen identifies multiple receptor tyrosine kinase inhibitors with activity on TGF
b receptor // Oncotarget. 2016. Vol. 7, N 18. P. 25 983-26 002.
7.            Marcucci F., Stassi G., De Maria R. Epithelial-mesenchymal transition: a new target in anticancer drug discovery // Nat. Rev. Drug Discov. 2016. Vol. 15, N 5. P. 311-325.
8.            Polireddy K., Dong R., McDonald P.R., Wang T., Luke B., Chen P., Broward M., Roy A., Chen Q. Targeting epithelial-mesenchymal transition for identification of inhibitors for pancreatic cancer cell invasion and tumor spheres formation // PLoS One. 2016. Vol. 11, N 10. P. e0164811. doi: 10.1371/journal.pone.0164811.
9.            Poloznikov A.A., Zakhariants A.A., Nikulin S.V., Smirnova N.A., Hushpulian D.M., Gaisina I.N., Tonevitsky A.G., Tishkov V.I., Gazaryan I.G. Structure-activity relationship for branched oxyquinoline HIF activators: effect of modifications to phenylacetamide “tail” // Biochimie. 2017. Vol. 133. P. 74-79.
10.          Samatov T.R., Galatenko V.V., Block A., Shkurnikov M.Y., Tonevitsky A.G., Schumacher U. Novel biomarkers in cancer: the whole is greater than the sum of its parts // Semin Cancer Biol. 2017. Vol. 45. P. 50-57.
11.          Samatov T.R., Shkurnikov M.U., Tonevitskaya S.A., Tonevitsky A.G. Modelling the metastatic cascade by in vitro microfluidic platforms // Prog. Histochem. Cytochem. 2015. Vol. 49, N 4. P. 21-29.
12.          Strien J., Sanft J., Mall G. Enhancement of PCR amplification of moderate gc-containing and highly GC-rich DNA sequences // Mol. Biotechnol. 2013. Vol. 54, N 3. P. 1048-1054.
13.          Toneff M.J., Sreekumar A., Tinnirello A., Hollander P.D., Habib S., Li S., Ellis M.J., Xin L., Mani S.A., Rosen J.M. The Z-cad dual fluorescent sensor detects dynamic changes between the epithelial and mesenchymal cellular states // BMC Biol. 2016. Vol. 14. P. 47. doi: 10.1186/s12915-016-0269-y.
14.          Yang H., Wang L., Zhao J., Chen Y., Lei Z., Liu X., Xia W., Guo L., Zhang H.T. TGF-
b-activated SMAD3/4 complex transcriptionally upregulates N-cadherin expression in non-small cell lung cancer // Lung Cancer. 2015. Vol. 87, N 3. P. 249-257.
15.          Yang J., Weinberg R.A. Epithelial-mesenchymal transition: at the crossroads of development and tumor metastasis // Dev.
Cell. 2008. Vol. 14, N 6. P. 818-829.

Потеря гетерозиготности в генах BRCA1 и BRCA2 у больных раком яичников и ее применимость для клинической классификации вариаций
А.А.Кечин, У.А.Боярских*, Н.А.Ермоленко*, А.С.Тюляндина**, Д.Г.Лазарева***, А.М.Авдалян***, С.А.Тюляндин**, Н.Е.Кушлинский**, М.Л.Филипенко* – 110
Новосибирский государственный университет, Новосибирск, РФ; *Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, РФ; **ФГБУ НМИЦ онкологии им. Н.Н.Блохина Минздрава России, Москва; ***КГБУЗ Алтайский краевой онкологический диспансер, Барнаул, РФ
         
Изменения (или варианты) в последовательностях генов BRCA1 и BRCA2 могут иметь различную протяженность и клиническое значение: от точечных замен нуклеотидов (SNV) и коротких инсерций/делеций (не более 50 п.о.) до протяженных делеций и дупликаций (так называемые вариации числа копий, или CNV). По клиническому значению все варианты делят на клинически значимые, вероятно клинически значимые, варианты с неизвестным клиническим значением, вероятно нейтральные варианты и нейтральные варианты. Кроме того, варианты могут быть герминальными (унаследованными от родителей) и соматическими (возникшими в процессе развития организма). Одной из разновидностей соматических событий является потеря гетерозиготности — событие, при котором один или множество точечных и коротких вариантов переходят из гетерозиготного состояния в гомозиготное. Такое событие может быть ключевым в развитии канцерогенеза для клеток, несущих клинически значимый вариант, если рассматривать его в рамках двуударной теории канцерогенеза Кнудсона. Исследовали распространенность и природу потери гетерозиготности в образцах опухоли рака яичников, несущих или не несущих вариант, имеющий клиническое значение. Для этого была определена полная кодирующая последовательность генов BRCA1/2 в 30 парах образцов ДНК, выделенных из клеток крови и парафинированных гистологических блоков пациентов на приборе “MiSeq Illumina”. Анализ полученных прочтений выявил 9 клинически значимых точечных и коротких вариантов (30% пациентов): 6 герминальных (20%) и 3 соматических (10%), а также 8 соматических CNV (3 делеции и 5 дупликаций нескольких или всех экзонов гена BRCA1). Потеря гетерозиготности была выявлена у 70% пациентов; у 83% — с клинически значимыми вариантами. Для клинически значимых вариантов процент прочтений с альтернативным аллелем увеличивался чаще, чем для нейтральных вариантов, расположенных в другом гене или обнаруженных у других пациентов (67% против 44%). Однако разница оказалась статистически незначимой, что может быть связано с небольшим размером выборки пациентов. Из 21 случая потери гетерозиготности только для 3 (14%) в качестве механизма формирования можно предположить CNV. Для остальных случаев основным механизмом возникновения потери гетерозиготности, по-видимому, является генная конверсия, однако это предположение требует дальнейших исследований.
Ключевые слова: BRCA1/2, рак яичников, NGS, потеря гетерозиготности, соматические мутации
Адрес для корреспонденции: a.a.kechin@gmail.com. Кечин А.А.
Литература
1.            Beristain E., Guerra I., Vidaurrazaga N., Burgos-Bretones J., Tejada M.I. LOH analysis should not be used as a tool to assess whether UVs of BRCA1/2 are pathogenic or not // Fam. Cancer. 2010. Vol. 9, N 3. P. 289-290.
2.            Chao A., Chang T.C., Lapke N., Jung S.M., Chi P., Chen C.H., Yang L.Y., Lin C.T., Huang H.J., Chou H.H., Liou J.D., Chen S.J., Wang T.H., Lai C.H. Prevalence and clinical significance of BRCA1/2 germline and somatic mutations in Taiwanese patients with ovarian cancer // Oncotarget. 2016. Vol. 7, N 51. P. 85 529-85 541.
3.            Ermolenko N.A., Boyarskikh U.A., Kechin A.A., Mazitova A.M., Khrapov E.A., Petrova V.D., Lazarev A.F., Kushlinskii N.E., Filipenko M.L. Massive parallel sequencing for diagnostic genetic testing of BRCA genes — a single center experience // Asian Pac. J. Cancer Prev. 2015. Vol. 16, N 17. P. 7935-7941.
4.            Iyevleva A.G., Suspitsin E.N., Kroeze K., Gorodnova T.V., Sokolenko A.P., Buslov K.G., Voskresenskiy D.A., Togo A.V., Kovalenko S.P., Stoep Nv., Devilee P., Imyanitov E.N. Non-founder BRCA1 mutations in Russian breast cancer patients // Cancer Lett. 2010. Vol. 298, N 2. P. 258-263.
5.            Kechin A., Boyarskikh U., Kel A., Filipenko M. cutPrimers: a new tool for accurate cutting of primers from reads of targeted next generation sequencing // J. Comput. Biol. 2017. Jul 17. doi: 10.1089/cmb.2017.0096.
6.            Koboldt D.C., Zhang Q., Larson D.E., Shen D., McLellan M.D., Lin L., Miller C.A., Mardis E.R., Ding L., Wilson R.K. VarScan 2: somatic mutation and copy number alteration discovery in cancer by exome sequencing // Genome Res. 2012. Vol. 22, N 3. P. 568-576.
7.            Kuchenbaecker K.B., Hopper J.L., Barnes D.R., Phillips K.A., Mooij T.M., Roos-Blom M.J., Jervis S., van Leeuwen F.E., Milne R.L., Andrieu N., Goldgar D.E., Terry M.B., Rookus M.A., Easton D.F., Antoniou A.C., BRCA1 and BRCA2 Cohort Consortium, McGuffog L., Evans D.G., Barrowdale D., Frost D., Adlard J., Ong K.R., Izatt L., Tischkowitz M., Eeles R., Davidson R., Hodgson S., Ellis S., Nogues C., Lasset C., Stoppa-Lyonnet D., Fricker J.P., Faivre L., Berthet P., Hooning M.J., van der Kolk L.E., Kets C.M., Adank M.A., John E.M., Chung W.K., Andrulis I.L., Southey M., Daly M.B., Buys S.S., Osorio A., Engel C., Kast K., Schmutzler R.K., Caldes T., Jakubowska A., Simard J., Friedlander M.L., McLachlan S.A., Machackova E., Foretova L., Tan Y.Y., Singer C.F., Olah E., Gerdes A.M., Arver B., Olsson H. Risks of breast, ovarian, and contralateral breast cancer for BRCA1 and BRCA2 mutation carriers // JAMA. 2017. Vol. 317, N 23. P. 2402-2416.
8.            Li H., Handsaker B., Wysoker A., Fennell T., Ruan J., Homer N., Marth G., Abecasis G., Durbin R.; 1000 Genome Project Data Processing Subgroup. The Sequence Alignment/Map format and SAMtools // Bioinformatics. 2009. Vol. 25, N 16. P. 2078-2079.
9.            Maxwell K.N., Wubbenhorst B., Wenz B.M., De Sloover D., Pluta J., Emery L., Barrett A., Kraya A.A., Anastopoulos I.N., Yu S., Jiang Y., Chen H., Zhang N.R., Hackman N., D'Andrea K., Daber R., Morrissette J.J.D., Mitra N., Feldman M., Domchek S.M., Nathanson K.L. BRCA locus-specific loss of heterozygosity in germline BRCA1 and BRCA2 carriers // Nat. Commun. 2017. Vol. 8, N 1. P. 319.
10.          Nguyen-Dumont T., Pope B.J., Hammet F., Southey M.C., Park D.J. A high-plex PCR approach for massively parallel sequencing // Biotechniques. 2013. Vol. 55, N 2. P. 69-74.
11.          Richards S., Aziz N., Bale S., Bick D., Das S., Gastier-Foster J., Grody W.W., Hegde M., Lyon E., Spector E., Voelkerding K., Rehm H.L.; ACMG Laboratory Quality Assurance Committee. Standards and guidelines for the interpretation of sequence variants: a joint consensus recommendation of the American College of Medical Genetics and Genomics and the Association for Molecular Pathology // Genet. Med. 2015. Vol. 17, N 5. P. 405-424.
12.          Ryland G.L., Doyle M.A., Goode D., Boyle S.E., Choong D.Y., Rowley S.M., Li J.; Australian Ovarian Cancer Study Group, Bowtell D.D., Tothill R.W., Campbell I.G., Gorringe K.L. Loss of heterozygosity: what is it good for? // BMC. Med. Genomics. 2015. Vol. 8. P. 45. doi: 10.1186/s12920-015-0123-z.
13.          Shi S.R., Cote R.J., Wu L., Liu C., Datar R., Shi Y., Liu D., Lim H., Taylor C.R. DNA extraction from archival formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections based on the antigen retrieval principle: heating under the influence of pH // J. Histochem. Cytochem. 2002. Vol. 50, N 8. P. 1005-1011.
14.          Zhang J., Lindroos A., Ollila S., Russell A., Marra G., Mueller H., Peltomaki P., Plasilova M., Heinimann K. Gene conversion is a frequent mechanism of inactivation of the wild-type allele in cancers from MLH1/MSH2 deletion carriers // Cancer Res. 2006. Vol. 66, N 2. P. 659-664.

Приматология
Использование мезенхимных стволовых клеток для возможной репарации поврежденных доксорубицином органов и тканей в эксперименте на обезьянах
В.З.Агрба, Д.Д.Карал-оглы, Т.Е.Гвоздик, П.А.Капланян, Н.П.Деменкова, И.А.Гварамия, Е.И.Мухаметзянова, О.А.Шамсутдинова, Ю.П.Чугуев, С.Ш.Кальсина, А.Г.Коноплянников, Д.Э.Аравиашвили, И.Н.Клоц, Б.А.Лапин – 118
ФГБНУ НИИ медицинской приматологии, Сочи, РФ
         
Трехкратное введение доксорубицина макакам-резусам вызывает тяжелую интоксикацию, характеризующуюся анемией, кахексией, дистрофией внутренних органов. Срок жизни обезьян, которым вводили препарат и через 24 ч трансплантировали мезенхимные стволовые клетки, колебался в пределах 96-120 сут, а у животных, которым стволовые клетки трансплантировали перед введением доксорубицина, он составлял 50-74 сут. В контрольной группе, получавшей доксорубицин и физиологический раствор, срок жизни первой обезьяны составил 24 сут, второй — 1 год и 8 мес. Показано, что увеличение активности провоспалительного цитокина ИЛ-6 сопровождается повышением уровня С-реактивного белка.
Ключевые слова: стволовые клетки, доксорубицин, обезьяны, В-лимфоциты, цитокины
Адрес для корреспонденции: agrba_vz@mail.ru Агрба В.З.
Литература
1.            Агрба В.З., Порханов В.А., Коноплянников А.Г., Кальсина С.Ш., Караоглы Д.Д., Игнатова И.Е., Гвоздик Т.Е., Агумава А.А., Леонтюк А.В., Лапин Б.А. Возможные аспекты использования культур стволовых клеток лабораторных приматов в экспериментальной медицине // Клет. технол. в биол. и мед. 2012. № 3. С. 139-142.
2.            Демьянов А.В., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление. 2003. Т. 2, № 3. С. 20-35.
3.            Долгов В., Морозова В., Марцишевская Р., Мадрала А., Якубовский З., Кабата И., Калиновский Л., Щепанская-Конкель М., Ангельский С. Клинико-диагностическое значение лабораторных показателей. М., 1995.
4.            Иванов А.А. Перспективы применения стволовых клеток в медицине // Биология стволовых клеток и клеточных технологий. Том I / Под ред. М.А.Пальцева. М., 2009. С. 31-43.
5.            Игнатова И.Е., Агрба В.З. Показатели клеточного звена иммунитета у приматов // Бюл. экспер. биол. 2010. Т. 149, № 1. С. 93-96.
6.            Игнатова И.Е, Агрба В.З, Карал-оглы Д.Д. Нормативные показатели клеточного звена иммунитета у макак яванских (Macaca fascicularis) // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 157, № 2. С. 231-234.
7.            Карал-оглы Д.Д, Игнатова И.Е., Гварамия И.А, Деменкова Н.П., Афанасьев Н.А, Агрба В.З. Картина крови и интерфероновый статус у обезьян, инфицированных латентными вирусами приматов // Бюл. экспер. биол. 2010. Т. 149, № 6. С. 693-694.
8.            Маклакова И.Ю., Гребнев Д.Ю., Ястребов А.П. Влияние экстремальных факторов на хоуминг мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток // Патол. физиол. и экспер. тер. 2015. Т. 59, № 4. С. 82-86.
9.            Романов Ю.А., Смирнов В.Н. Мезенхимальные стволовые клетки: биология и перспективы клинического применения // Биология стволовых клеток и клеточные технологии. / Под ред. М.А.Пальцева. М., Том 1., 2009. С. 193-205.
10.          Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3, № 2. С. 16-22.
11.          Ставровская А.А., Генс Г.П. Новое в изучении множественной лекарственной устойчивости клеток рака молочной железы // Успехи мол. онкол.
2015. № 1. С. 39-51.
12.          Cruet-Hennequart S., Prendergast A.M., Shaw G., Barry F.P., Carty M.P. Doxorubicin induces the DNA damage response in cultured human mesenchymal stem cells // Int. J. Hematol. 2012. Vol. 96, N 5. P. 649-656.
13.          Gillet J.P., Gottesman M.M. Mechanisms of multidrug resistance in cancer // Methods Mol.
Biol. 2010. Vol. 596. P. 47-76.

Морфология и патоморфология
Особенности экспрессии Beclin-1 и LAMP-2 в гиппокампе крыс при гравитационном воздействии в каудо-краниальном векторе
А.В.Смирнов*,***, Д.С.Медников*, М.В.Шмидт*,***, Д.В.Куркин**, Д.А.Бакулин**, Е.В.Волотова**, И.Н.Тюренков** – 122
*Кафедра патологической анатомии, **кафедра фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей ФГБОУ ВО Волгоградского государственного медицинского университета, Волгоград, РФ; ***ГБУ Волгоградский медицинский научный центр, Волгоград, РФ
         
Исследовали структурные изменения гиппокампа крыс при моделировании хронических нарушений мозгового кровообращения методом гравитационных перегрузок в каудо-краниальном векторе. Качественный и количественный морфологический анализ выявил значительные изменения в цитоархитектонике пирамидного слоя: спонгиоз, выраженный перицеллюлярный и периваскулярный отек, а также резкое увеличение числа пирамидных нейронов с признаками повреждения во всех зонах гиппокампа. Наблюдалось снижение относительной плотности перикарионов пирамидного слоя. Иммуногистохимическое исследование в поле СА1 выявило усиление экспрессии Beclin-1. В поле СА4 обнаружено усиление экспрессии LAMP-2. Поле СА2 характеризовалось максимальным числом поврежденных клеток и одновременным усилением экспрессии как Beclin-1, так и LAMP-2.
Ключевые слова: гравитационное воздействие, гиппокамп, аутофагия, LAMP-2, Beclin-1
Адрес для корреспонденции: mednikov1988@gmail.com. Медников Д.С.
Литература
1.            Гомазков О.А. Клеточные и молекулярные принципы старения мозга // Успехи совр. биол. 2012. Т. 132, № 2. С. 141-154.
2.            Долгова И.Н., Стародубцев А.И. О влиянии артериальной гипертензии на развитие дисциркуляторной энцефалопатии // Неврол. вестн. 2010. Т. 42, № 3. С. 51-54.
3.            Захаров В.В. Современные представления о хронической недостаточности мозгового кровообращения // РМЖ. 2014. Т. 22, № 16. С. 1188-1192.
4.            Литвинов А.А., Куркин Д.В., Волотова Е.В. Анализ последствий ишемического поражения головного мозга животных, вызванного воздействием центробежного ускорения в кранио-каудальном векторе на фоне однократного введения производных гамма-амино- и гамма-оксимасляной кислот // Вестн. Рос. военн.-мед. акад. 2012. № 4. С. 179-183.
5.            Смирнов А.В., Спасов А.А., Шмидт М.В., Снигур Г.Л., Евсюков О.Ю., Желтова А.А. Особенности экспрессии TRPM7 в нейронах гипоталамуса и гиппокампа при моделировании алиментарного дефицита магния // Бюл. экспер. биол. 2013. T. 156, № 12. С. 692-696.
6.            Смирнов А.В., Тюренков И.Н., Шмидт М.В., Экова М.Р., Медников Д.С., Бородин Д.Д. Влияние комбинированного стресса на морфологические изменения и экспрессию NO-синтаз в вентральном отделе гиппокампа крыс // Бюл. экспер. биол. 2015. T. 160, № 7. С. 110-114.
7.            Смирнов А.В., Шмидт М.В., Медников Д.С., Экова М.Р., Тюренков И.Н., Куркин Д.В., Волотова Е.В. Структурные изменения гиппокампа крыс при экспериментальном моделировании гипертензивной энцефалопатии с учетом экспрессии белков теплового шока // Вестн. ВолгГМУ
. 2016. № 4. С. 90-95.
8.            Eskelinen E.L., Illert A.L., Tanaka Y., Schwarzmann G., Blanz J., Von Figura K., Saftig P. Role of LAMP-2 in lysosome biogenesis and autophagy. Mol. Biol. Cell. 2002. Vol. 13, N 9. P. 3355-3368.
9.            Jin Y., Lin Y., Feng J.F., Jia F., Gao G.Y., Jiang J.Y. Moderate hypothermia significantly decreases hippocampal cell death involving autophagy pathway after moderate traumatic brain injury // J. Neurotrauma. 2015. Vol. 32, N 14. P. 1090-1100.
10.          Kang R., Zeh H.J., Lotze M.T., Tang D. The Beclin 1 network regulates autophagy and apoptosis // Cell. Death Differ. 2011. Vol. 18, N 4. P. 571-580.
11.          Oberstein A., Jeffrey P.D., Shi Y. Crystal structure of the Bcl-XL-Beclin 1 peptide complex: Beclin 1 is a novel BH3-only protein // J. Biol. Chem. 2007. Vol. 282, N 17. P. 13 123-13 132.
12.          Saftig P., Beertsen W., Eskelinen E.L. LAMP-2: a control step for phagosome and autophagosome maturation // Autophagy. 2008. Vol.4, N 4. P. 510-512.
13.          Santyr B.G., Goubran M., Lau J.C., Kwan B.Y., Salehi F., Lee D.H., Mirsattari S.M., Burneo J.G., Steven D.A., Parrent A.G., de Ribaupierre S., Hammond R.R., Peters T.M., Khan A.R. Investigation of hippocampal substructures in focal temporal lobe epilepsy with and without hippocampal sclerosis at 7T // J. Magn. Reson. Imaging. 2017. Vol. 45, N 5. P. 1359-1370.
14.          Sun X.Q., Xu Z.P., Zhang S., Cao X.S., Liu T.S. Simulated weightlessness aggravates hypergravity-induced impairment of learning and memory and neuronal apoptosis in rats // Behav.
Brain Res. 2009. Vol. 199, N 2. P. 197-202.

Морфологическое и ультраструктурное исследование особенностей биопленок, формируемых Streptococcus pyogenes, методами световой и электронной микроскопии
Т.А.Данилова, Т.А.Смирнова, Г.А.Данилина*, А.А.Аджиева, С.Г.Андреевская, Н.В.Шевлягина, В.Г.Жуховицкий* – 127
Лаборатория индикации и ультраструктурного анализа микроорганизмов ФГБУ Федерального научно-исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи Минздрава России, Москва; *ФБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова Минздрава России, Москва
         
В работе подтверждена способность штаммов S. pyogenes формировать биопленку на абиотических поверхностях. В световом микроскопе при окрашивании алциановым синим препаратов, выращенных на покровных стеклах, видны цепочки стрептококков, окруженные голубоватой пленкой. На ультратонких срезах в трансмиссионном электронном микроскопе биопленочный экзополимерный матрикс (показатель зрелости биопленки) становится видимым после дополнительного окрашивания алциановым синим. На срезах в межклеточных промежутках видны структуры, характерные для биопленки. Данные сканирующей электронной микроскопии также свидетельствуют о наличии биопленки. Важно отметить, что штамм типа 1М, который практически не образовывал пленку при выращивании на пластиковых планшетах (“Costar”), обнаруживал способность к ее формированию на стекле. По-видимому, на планшетах и на стекле создаются разные условия для формирования биопленки, в связи с чем на разных поверхностях может образовываться разный по биохимическому составу экзополиматрикс.
Ключевые слова: биопленка, матрикс, световая микроскопия, электронная микроскопия, S. pyogenes
Адрес для корреспонденции: dansen@inbox.ru. Данилова Т.А.
Литература
1.            Данилова Т.А., Данилина Г.А., Аджиева А.А., Минко А.Г., Алексеева Н.В. Формирование биопленок стрептококками группы А разных типов и изучение влияния антибиотиков на этот процесс // Журн. микробиол. и иммунобиол. 2015. № 2. С. 50-54.
2.            Данилова Т.А., Данилина Г.А., Аджиева А.А., Минко А.Г., Николаева Т.Н., Жуховицкий В.Г., Пронин А.В. Влияние мирамистина и фоспренила на микробные биопленки // Бюл. экспер. биол. 2017. Т. 163, № 4. С. 435-439.
3.            Клейменов Д.А., Брико Н.И., Аксенова А.В. Стрептококковая (группы А) инфекция в Российской Федерации: характеристика эпидемиологических детерминант и оценка современных масштабов проблемы // Эпидемиол. и вакцинопроф. 2011. № 2. С. 4-11.
4.            Романова Ю.М., Гинцбург А.Л. Бактериальные биопленки как естественная форма существования бактерий в окружающей среде и организме хозяина // Журн. микробиол. и иммунобиол. 2011. № 3. С. 99-109.
5.            Смирнова Т.А., Диденко Л.В., Азизбекян Р.Р., Романова Ю.М. Структурно-функциональная характеристика бактериальных биопленок // Микробиология.
2010. Т. 79, № 4. С. 435-446.
6.            Akiyama H., Morizane S., Yamasaki O., Oono T., Iwatsuki K. Assessment of Streptococcus pyogenes microcolony formation in infected skin by confocal laser scanning microscopy // J. Dermatol. Sci. 2003. Vol. 32, N 3. P. 193-199.
7.            Fiedler T., Köller T., Kreikemeyer B. Streptococcus pyogenes biofilms-formation, biology, and clinical relevance // Front. Cell. Infect. Microbiol. 2015. Vol. 5. P. 15.
8.            Hentzer M., Givskov M. Pharmacological inhibition of quorum sensing for the treatment of chronic bacterial infections // J. Clin. Invest. 2003. Vol. 112, N 9. P. 1300-1307.
9.            Herald P.J., Zonolla E.A. The use of transmission electron microscopy to study the composition of Pseudomonas Fragi attachment material. // Food structure. 1988. Vol. 7, N 1. P. 53-58.
10.          Lembke C., Podbielski A., Hidalgo-Grass C., Jonas L., Hanski E., Kreikemeyer B. Characterization of biofilm formation by clinically relevant serotypes of group A streptococci // Appl. Environ. Microbiol. 2006. Vol. 72, N 4. P. 2864-2875.
11.          Marks L.R., Mashburn-Warren L., Federle M.J., Hakansson A.P. Streptococcus pyogenes biofilm growth in vitro and in vivo and its role in colonization, virulence, and genetic exchange // J. Infect. Dis. 2014. Vol. 210, N 1. P. 25-34.
12.          Mater Y., Karaçali S. Fine Structural Demonstration of Anionic Sites on Streptococcal and Staphylococcal Envelopes by Cationic Dyes // Turk. J. Med. Sci. 2001. Vol. 31, N 4. P. 291-295.
13.          Roberts A.L., Connolly K.L., Kirse D.J., Evans A.K., Poehling K.A., Peters T.R., Reid S.D. Detection of group A Streptococcus in tonsils from pediatric patients reveals high rate of asymptomatic streptococcal carriage // BMC Pediatr. 2012, Vol. 12. P. 3. doi: 10.1186/1471-2431-12-3.
14.          Thenmozhi R., Balaji K., Kumar R., Rao T.S., Pandian S.K. Characterization of biofilms in different clinical M serotypes of Streptococcus pyogenes // J. Basic. Microbiol. 2011. Vol. 51, N 2. P. 196-204.