info@iramn.ru
com@iramn.ru
bam.b@g23.relcom.ru



БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ

2017 г., Том 163, № 2 ФЕВРАЛЬ

 

СОДЕРЖАНИЕ

Физиология
Влияние периферических m-, d- и k-опиоидных лигандов на формирование толерантности к анальгетическому действию этанола
С.К.Судаков, Е.В.Алексеева, Г.А.Назарова – 136
НИИ нормальной физиологии им. П.К.Анохина
Изучена скорость формирования толерантности к анальгетическому действию этанола при воздействии на m-, d- и k-опиоидные рецепторы желудка лигандами, не проникающими через гематоэнцефалический барьер и быстро инактивирующимися протеолитическими ферментами желудка и двенадцатиперстной кишки. Установлено, что активация k-опиоидных рецепторов желудка подавляет анальгетическое действие этанола и ускоряет формирование толерантности к нему. Активация m-опиоидных рецепторов желудка, напротив, замедляет формирование толерантности к анальгетическому эффекту этанола. Активация d-опиоидных рецепторов практически не оказывает никакого влияния. Введение антагониста m-опиоидных рецепторов замедляет, а антагониста d-опиоидных рецепторов — ускоряет развитие толерантности к анальгетическому действию этанола. Сделано заключение о том, что состояние опиоидных рецепторов желудка имеет существенное значение в проявлении анальгетического действия этанола и развитии толерантности к нему.
Ключевые слова: этанол, опиоидные рецепторы, горячая пластина, аналгезия, толерантность
Адрес для корреспонденции: s-sudakov@nphys.ru.
Судаков С.К.
Литература
            1.         Бондаренко Д.А., Дьяченко И.А., Скобцов Д.И., Мурашев А.Н. In vivo модели для изучения анальгетической активности // Биомедицина, 2011 Т. 1, № 2. С. 84-94.
            2.         Biala G., Budzynska B. Rimonabant attenuates sensitization, cross-sensitization and cross-reinstatement of place preference induced by nicotine and ethanol // Pharmacol. Rep. 2010. Vol. 62, N 5. P. 797-807.
            3.         Follesa P., Biggio F., Talani G., Murru L., Serra M., Sanna E., Biggio G. Neurosteroids, GABAA receptors, and ethanol dependence // Psychopharmacol. (Berl). 2006. Vol. 186, N 3. P. 267-280.
            4.         He L., Whistler J.L. Chronic ethanol consumption in rats produces opioid antinociceptive tolerance through inhibition of mu opioid receptor endocytosis // PLoS One. 2011. Vol. 6, N 5. P. e19372.
            5.         Hull L.C., Gabra B.H., Bailey C.P.,
Henderson G., Dewey W.L. Reversal of morphine analgesic tolerance by ethanol in the mouse // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2013. Vol. 345, N 3. P. 512-519.
            6.         Llorente J., Withey S., Rivero G., Cunningham M., Cooke A., Saxena K., McPherson J., Oldfield S., Dewey W.L., Bailey C.P., Kelly E., Henderson G. Ethanol reversal of cellular tolerance to morphine in rat locus coeruleus neurons // Mol. Pharmacol. 2013. Vol. 84, N 2. P. 252-260.
            7.         Lindholm S., Rosin A., Dahlin
I., Georgieva J., Franck J. Ethanol alters the effect of kappa receptor ligands on dopamine release in the nucleus accumbens // Physiol. Behav. 2007. Vol. 92, N 1-2. P. 167-171.
            8.         Sudakov S., Bashkatova V., Alexeeva E., Bogdanova N., Nazarova G. Development of tolerance to effects of ethanol depends on its concentration in the stomach // J. Addict. Depend. 2016. Vol. 4, N 2. P. 1-5.
            9.         Sudakov S.K., Bashkatova V.G., Kolpakov A.A., Chernyaeva N.N. Loperamide effects on anxiety level and feeding behavior in rats. Role of vagal afferentation // Bull. Exp. Biol. Med. 2012. Vol. 153, N 5. P. 717-719.
10.       Sudakov S.K., Sotnikov S.V., Chekmareva N.Y., Kolpakov A.A., Chumakova Y.A., Umryukhin A.E. Changes in
b-endorphin level in the cingulate cortex in rats after peripheral loperamide and methylnaloxone administration at rest and during emotional stress // Bull. Exp. Biol. Med. 2010. Vol. 149, N 2. P. 167-169.
11.       Sudakov S.K., Trigub M.M. Hypothesis on reciprocal interactions between the central and peripheral components of the endogenous opioid system // Bull. Exp. Biol. Med. 2008. Vol. 146, N 6. P. 663-666.
12.       Trigub M.M., Bogdanova N.G., Kolpakov A.A., Bashkatova V.G., Sudakov S.K. Effect of peripheral opioid receptor agonists on depressive activity of ethanol // Bull. Exp. Biol. Med. 2014. Vol. 156, N 6. P. 778-780.
13.       Wu P.H., Coultrap S., Browning M.D., Proctor W.R. Correlated changes in NMDA receptor phosphorylation, functional activity, and sedation by chronic ethanol consumption // J. Neurochem.
2010. Vol. 115, N 5. P. 1112-1122.


Общая патология и патологическая физиология
Отдаленные результаты экспериментальной терапии афобазолом у крыс, перенесших острый инфаркт миокарда
С.А.Крыжановский, И.Б.Цорин, В.Н.Столярук, Е.О.Ионова, М.Б.Вититнова – 140
ФГБНУ НИИ фармакологии им. В.В.Закусова, Москва, РФ
С помощью динамических эхокардиографических исследований (на 2, 15, 56 и 98-е сутки от момента воспроизведения инфаркта миокарда), выполненных на модели острой ишемии миокарда у крыс, оценивали отдаленные кардиопротективные эффекты анксиолитика афобазола (15 мг/кг внутрибрюшинно в течение 14 сут), кардиотропная активность которого может быть связана с его агонистическим влиянием на s1-рецепторы кардиомиоцитов. Показано, что у животных, получавших афобазол, к концу наблюдения отсутствовали признаки сердечной недостаточности, о чем свидетельствовала величина фракции выброса левого желудочка.
Ключевые слова: эхокардиография, инфаркт миокарда, фракция выброса, сердечная недостаточность, отдаленные результаты
Адрес для корреспонденции: SAK-538@yandex.ru. Крыжановский С.А.

Литература
            1.         Беневская М.А. Значение психоэмоциональных расстройств у больных инфарктом миокарда // Проблемы женского здоровья. 2010. Т. 5, № 4. С. 68-70.     
            2.         Крыжановский С.А., Сорокина А.В., Столярук В.Н., Вититнова М.Б., Мирошкина И.А., Цорин И.Б., Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Изучение антиишемического действия “Афобазола” в условиях экспериментального инфаркта миокарда // Бюл. экспер. биол. 2010. Т. 150, № 9. С. 284-287.
            3.         Крыжановский С.А., Столярук В.Н., Вититнова М.Б., Цорин И.Б., Середенин С.Б. К механизму противофибрилляторного действия “Афобазола” // Бюл. экспер. биол. 2010. Т. 149, № 3. С. 290-293.
            4.         Медведев В.Э. Терапия тревожных расстройств у пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями (опыт применения афобазола) // Архивъ внутренней медицины. 2013. Т. 11, № 3. С. 70-76.
            5.         Середенин С.Б., Воронин М.В. Нейрорецепторные механизмы действия афобазола // Экспер. и клин. фармакол. 2009. Т. 72, № 1. С. 3-11.
            6.         Середенин С.Б., Цорин И.Б., Вититнова М.Б., Столярук В.Н., Чичканов Г.Г., Крыжановский С.А. К механизму противоишемического действия препарата “Афобазол” // Бюл. экспер. биол. 2013. Т. 156, № 6. С. 723-727.
            7.         Столярук В.Н., Вититнова М.Б., Цорин И.Б., Крыжановский С.А. Изучение противофибрилляторной активности афобазола у животных с интактным и денервированным миокардом // Вестник РАМН. 2010. № 4. С. 45-48.
            8.         Anelli T., Bergamelli L., Margittai E., Rimessi A., Fagioli C., Malgaroli A., Pinton P., Ripamonti M., Rizzuto R., Sitia R. Ero1
a regulates Ca(2+) fluxes at the endoplasmic reticulum-mitochondria interface (MAM) // Antioxid. Redox Signal. 2012. Vol. 16, N 10. P. 1077-1087.
            9.         Bhuiyan M.S., Fukunaga K. Targeting sigma-1 receptor signaling by endogenous ligands for cardioprotection // Expert Opin. Ther. Targets. 2011. Vol. 15, N 2. P. 145-155.
10.       Hayashi T., Su T.P. Cholesterol at the endoplasmic reticulum: roles of the sigma-1 receptor chaperone and implications thereof in human diseases // Subcell. Biochem. 2010. Vol. 51. P. 381-398.
11.       Kourrich S., Su T.P., Fujimoto M., Bonci A. The sigma-1 receptor: roles in neuronal plasticity and disease // Trends Neurosci. 2012. Vol. 35, N 12. P. 762-771.
12.       Mancuso R., Oliván S., Rando A., Casas C., Osta R., Navarro X. Sigma-1R agonist improves motor function and motoneuron survival in ALS mice // Neurotherapeutics. 2012. Vol. 9, N 4. P. 814-826.
13.       Su T.P., Hayashi T., Maurice T., Buch S., Ruoho A.E. The sigma-1 receptor chaperone as an inter-organelle signaling modulator // Trends Pharmacol. Sci. 2010. Vol. 31, N 12. P. 557-566.
14.       Tagashira H., Bhuiyan M.S., Fukunaga K. Diverse regulation of IP3 and ryanodine receptors by pentazocine through
s1-receptor in cardiomyocytes // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2013. Vol. 305, N 8. P. H1201-H1212.
15.       Wu Z., Bowen W.D. Role of sigma-1 receptor C-terminal segment in inositol 1,4,5-trisphosphate receptor activation: constitutive enhancement of calcium signaling in MCF-7 tumor cells // J. Biol.
Chem. 2008. Vol. 283, N 42. P. 28 198-28 215. 


Лечение крыс с метаболическим синдромом интраназальным инсулином восстанавливает метаболические показатели и чувствительность к инсулину
К.В.Деркач, А.О.Иванцов, О.В.Чистякова, И.Б.Сухов,  Д.М.Бузанаков, А.А.Куликова, А.О.Шпаков – 144
Лаборатория молекулярной эндокринологии и нейрохимии (зав. — докт. биол. наук А.О.Шпаков) ФГБУН Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН, Санкт-Петербург, РФ 
Изучено влияние 10-недельного интраназального введения инсулина (0.5 МЕ/сут) крысам с метаболическим синдромом, вызванным кафетерий-диетой, на толерантность к глюкозе, ее утилизацию, показатели липидного обмена, состояние панкреатических b-клеток, инсулиновую систему в печени. Проводимая терапия снижала повышенные при метаболическом синдроме массу тела, уровни инсулина, триглицеридов и атерогенного холестерина, нормализовала толерантность к глюкозе и ее утилизацию, повышала активность инсулиновой сигнальной системы в печени, что способствовало ослаблению инсулиновой резистентности. Лечение не влияло на число панкреатических островков и b-клеток. Полученные данные свидетельствуют о перспективности интраназального применения инсулина для коррекции метаболических показателей и ослабления инсулиновой резистентности при метаболическом синдроме.
Ключевые слова: метаболический синдром, интраназальный инсулин, толерантность к глюкозе, инсулиновая резистентность, b-клетки поджелудочной железы
Адрес для корреспонденции: alex_shpakov@list.ru.
Шпаков А.О.
Литература
            1.         Кузнецова Л.А., Шарова Т.С., Перцева М.Н., Шпаков А.О. Бета-адренергическая регуляция аденилатциклазной системы в миокарде и мозге крыс с ожирением и сахарным диабетом 2-го типа и влияние на нее длительной обработки с помощью интраназально вводимого инсулина // Журн. эволюц. биохим. 2015. T. 51, № 3. С. 170-180.
            2.         Сухов И.Б., Деркач К.В., Чистякова О.В., Бондарева В.М., Шпаков А.О. Функциональное состояние гипоталамических сигнальных систем у крыс с сахарным диабетом 2-го типа, леченных интраназальным инсулином // Журн. эволюц. биохим. 2016. T. 52, № 3. С. 184-194.
            3.         Шпаков А.О. Функциональная активность инсулиновой сигнальной системы мозга в норме и при сахарном диабете 2-го типа // Рос. физиол. журн. 2015. T. 101, № 10. С. 1103-1127.
            4.         Шпаков А.О., Деркач К.В., Чистякова О.В., Мойсеюк И.В., Сухов И.Б., Бондарева В.М. Влияние интраназального инсулина и серотонина на функциональную активность аденилатциклазной системы в миокарде, яичниках и матке крыс с пролонгированной неонатальной моделью сахарного диабета // Журн. эволюц. биохим. 2013. T. 49, № 2. С. 118-127.
            5.         Bedse G., Di Domenico F., Serviddio G., Cassano T. Aberrant insulin signaling in Alzheimer’s disease: current knowledge // Front. Neurosci. 2015. Vol. 9. P. 204. doi: 10.3389/fnins.2015.00204.
            6.         Derkach K.V., Bogush I.V., Berstein L.M., Shpakov A.O. The Influence of intranasal insulin on hypothalamic-pituitary-thyroid axis in normal and diabetic rats // Horm. Metab. Res. 2015. Vol. 47, N 12. P. 916-924.
            7.         Derkach K.V., Bondareva V.M., Chistyakova O.V., Berstein L.M., Shpakov A.O. The effect of long-term intranasal serotonin treatment on metabolic parameters and hormonal signaling in rats with high-fat diet/low-dose streptozotocin-induced type 2 diabetes // Int. J. Endocrinol. 2015. Vol. 2015. ID 245459. doi: 10.1155/2015/245459.
            8.         Dong X., Park S., Lin X., Copps K., Yi X., White M.F. Irs1 and Irs2 signaling is essential for hepatic glucose homeostasis and systemic growth // J. Clin. Invest. 2006. Vol. 116, N 1. P. 101-114.
            9.         Freiherr J., Hallschmid M., Frey W.H. 2nd, Brünner Y.F., Chapman C.D., Hölscher C., Craft S., De Felice F.G., Benedict C. Intranasal insulin as a treatment for Alzheimer’s disease: a review of basic research and clinical evidence // CNS Drugs. 2013. Vol. 27, N 7. P. 505-514.
10.       Gancheva S., Koliaki C., Bierwagen A., Nowotny P., Heni M., Fritsche A., Häring H.U., Szendroedi J., Roden M. Effects of intranasal insulin on hepatic fat accumulation and energy metabolism in humans // Diabetes. 2015. Vol. 64, N 6. P. 1966-1975.
11.       Hallschmid M., Benedict C., Schultes B., Born J., Kern W. Obese men respond to cognitive but not to catabolic brain insulin signaling // Int. J. Obes. (Lond.). 2008. Vol. 32, N 2. P. 275-282.
12.       Lam D.W., LeRoith D. Metabolic syndrome // Endotext [Internet] / Eds. L.J.De Groot, G.Chrousos, K.Dungan, K.R.Feingold, A.Grossman, J.M.Hershman, C.Koch, M.Korbonits, R.McLachlan, M.New, J.Purnell, R.Rebar, F.Singer, A.Vinik. South Dartmouth, 2015. PMID: 25905173. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25905173.       
13.       Ott V., Benedict C., Schultes B., Born J., Hallschmid M. Intranasal administration of insulin to the brain impacts cognitive function and peripheral metabolism // Diabetes Obes. Metab. 2012. Vol. 14, N 3. P. 214-221.
14.       Shpakov A.O., Chistyakova O.V., Derkach K.V., Moiseyuk I.V., Bondareva V.M. Intranasal insulin affects adenylyl cyclase system in rat tissues in neonatal diabetes // Central Eur. J. Biol. 2012. Vol. 7, N 1. P. 33-47. doi: 10.2478/s11535-011-0089-6.
15.       Zhang H., Hao Y., Manor B., Novak P., Milberg W., Zhang J., Fang J., Novak V. Intranasal insulin enhanced resting-state functional connectivity of hippocampal regions in type 2 diabetes // Diabetes.
2015. Vol. 64, N 3. P. 1025-1034.


Ингибиторы дипептидилпептидазы-IV дипротин А и ситаглиптин в условиях
их введения на второй-третьей неделях постнатального развития изменяют метаболизм моноаминов в стриатуме взрослых крыс

Н.Н.Хлебникова, Е.В.Оршанская*, В.Б.Наркевич**, В.С.Кудрин**, Н.А.Крупина – 150
Лаборатория общей патологии нервной системы (зав. — акад. РАН В.К.Решетняк), *лаборатория общей патологии кардиореспираторной системы (зав. — докт. биол. наук И.А.Тараканов) ФГБНУ НИИ общей патологии и патофизиологии, Москва, РФ; **Лаборатория нейрохимической фармакологии (зав. — канд. мед. наук В.С.Кудрин) ФГБНУ НИИ фармакологии им. В.В.Закусова, Москва, РФ
Методом ВЭЖХ с электрохимической детекцией исследован уровень моноаминов и их метаболитов в структурах мозга взрослых 3-месячных крыс с эмоционально-мотивационными нарушениями, вызванными введением ингибиторов дипептидилпептидазы-IV (ДПП-IV; EC 3.4.14.5) дипротина А и ситаглиптина на 2-3-й неделях постнатального развития (5-18-й постнатальные дни). В стриатуме крыс обеих опытных групп выявлено статистически значимое снижение содержания метаболита серотонина 5-оксииндолуксусной кислоты, а также выраженная тенденция к снижению уровня серотонина. У взрослых крыс, которых неонатально подвергали действию дипротина А, в стриатуме наблюдалась тенденция к увеличению метаболизма дофамина (по отношению ДОФУК/ДА). Во фронтальной коре, гипоталамусе и миндалине изменений в уровне моноаминов и их метаболитов не обнаружено. Полученные данные позволяют предположить, что ингибиторы ДПП-IV в условиях неонатального введения приводят к длительному нарушению состояния серотонинергической и дофаминергической систем мозга.
Ключевые слова: ингибиторы дипептидилпептидазы-IV дипротин А и ситаглиптин, эмоционально-мотивационные нарушения, моноамины, структуры мозга крыс
Адрес для корреспонденции: nanikh@yandex.ru.
Хлебникова Н.Н.
Литература
            1.         Крупина Н.А., Крыжановский Г.Н. Недостаточность дофаминергической нигростриатной системы как дизрегуляционный механизм дофаминзависимого депрессивного синдрома // Журн. неврол. психиатр. 2003. Т. 103, № 4. С. 42-47.
            2.         Крупина Н.А., Кушнарева Е.Ю., Хлебникова Н.Н., Золотов Н.Н., Крыжановский Г.Н. Экспериментальная модель тревожно-депрессивного состояния у крыс, вызванная введением ингибитора дипептидилпептидазы IV метионил-2(S)-цианопирролидина в раннем постнатальном периоде // Журн. высш. нервн. деят. 2009. Т. 59, № 3. С. 360-372.
            3.         Крупина Н.А., Хлебникова Н.Н., Орлова И.Н., Попкова Е.В., Родина В.И., Крыжановский Г.Н. Эффекты хронического мягкого стресса у крыс Вистар и Август: поведение и содержание моноаминов в стриатуме // Патогенез. 2012. Т. 10, № 2. С. 50-58.
            4.         Кушнарева Е.Ю., Крупина Н.А., Хлебникова Н.Н, Кудрин В.С., Золотов Н.Н., Крыжановский Г.Н. Уровень моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс с экспериментальным тревожно-депрессивным состоянием, вызванным введением ингибитора дипептидилпептидазы IV в раннем постнатальном периоде // Нейрохимия. 2012. Т. 29, № 1. С. 35-44.
            5.         Хлебникова Н.Н., Крупина Н.А., Кушнарева Е.Ю., Золотов Н.Н., Крыжановский Г.Н. Влияние имипрамина и ингибитора пролилэндопептидазы бензилоксикарбонил-метионил-2(S)-цианопирролидина на активность пролинспецифических пептидаз в мозге крыс с экспериментальным тревожно-депрессивным состоянием // Бюл. экспер. биол. 2011. Т. 152, № 10. С. 387-391.
            6.         Хлебникова Н.Н., Кушнарева Е.Ю., Кудрин В.С., Крупина Н.А. Влияние имипрамина и ингибитора пролилэндопептидазы бензилоксикарбонил-метионил-2(S)-цианопирролидина на уровень моноаминов и их метаболитов в мозге крыс с экспериментальным тревожно-депрессивным состоянием // Нейрохимия. 2014. Т. 31, № 4. С. 314-320.
            7.         Anstrom K.K., Miczek K.A., Budygin E.A. Increased phasic dopamine signaling in the mesolimbic pathway during social defeat in rats // Neuroscience. 2009. Vol. 161, N 1. P. 3-12.
            8.         Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders: DSM-5. Arlington, 2013.
            9.         Furuyashiki T., Deguchi Y. Roles of altered striatal function in major depression // Brain Nerve. 2012. Vol. 64, N 8. P. 919-926.
10.       Hamon M., Blier P. Monoamine neurocircuitry in depression and strategies for new treatments // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2013. Vol. 45. P. 54-63.
11.       Krupina N.A., Khlebnikova N.N. Neonatal exposure to the dipeptidyl peptidase-IV inhibitors diprotin A and sitagliptin induces depression-like behavior, anxiety, and latent aggression in adolescent and adult rats. // J. Behav. Brain Sci. 2016. Vol. 6, N 4. P. 167-183.
12.       Kulikov A.V., Popova N.K. Tryptophan hydroxylase 2 in seasonal affective disorder: underestimated perspectives? // Rev. Neurosci. 2015. Vol. 26, N 6. P. 679-690.
13.       Martin E.I., Ressler K.J., Binder E., Nemeroff C.B. The neurobiology of anxiety disorders: brain imaging, genetics, and psychoneuroendocrinology // Psychiatr. Clin. North Am. 2009. Vol. 32, N 4. P. 549-575.
14.       Shih J.C., Chen K., Ridd M.J. Monoamine oxidase: From genes to behavior // Annu. Rev. Neurosci. 1999. Vol. 22. P. 197-217.
15.       Yanowitch R., Coccaro E.F. The neurochemistry of human aggression // Advances in Genetics / Eds. R.Huber, D.L.Bannasch, P.Brennan. San Diego, 2011.
Vol. 75, Ch. 7. P. 151-169.


Оценка показателей окислительного статуса мозга и плазмы крови у крыс при фокальной ишемии-реперфузии
А.А.Девятов*,**, Т.Н.Фёдорова**, С.Л.Стволинский**, М.А.Белоусова***, О.С.Медведев***, В.А.Тутельян* – 156
*ФГБУН ФИЦ питания и биотехнологии, Москва, РФ; **ФГБНУ Научный центр неврологии, Москва, РФ; ***МГУ им. Ломоносова, Москва, РФ
Исследован ряд показателей окислительного статуса мозга и плазмы крови у крыс через 24 ч реперфузии после часовой фокальной ишемии головного мозга. В мозге животных с ишемией было выявлено увеличение активности ферментов СОД и каталазы. При этом после ишемии снижалась общая антиоксидантная активность ткани мозга и уменьшался уровень МДА и карбонильных производных белков. В плазме крови ишемизированных животных, как и в мозге, увеличивалась активность СОД и снижалась общая антиоксидантная активность. Уровень МДА при этом повышался. Изменения показателей в плазме крови и в мозге не всегда были однонаправленны.
Ключевые слова: фокальная ишемия мозга, окислительный стресс, мозг, плазма крови
Адрес для корреспонденции: Sasha.92.jan@mail.ru.
Девятов А.А.
Литература
            1.         Ускова М.А., Васильева М.А., Трусов Н.В., Авреньева Л.И., Гусева Г.В., Аксенов И.В., Кравченко Л.В. Оценка антиоксидантных и гепатопротекторных свойств штамма Lactobacillus casei 114001 на модели токсического поражения печени, индуцированного четыреххлористым углеродом // Вопр. питания. 2009. Т. 78, № 5. C. 24-30.
            2.         Alexandrova M.L., Bochev P.G. Oxidative Stress in Stroke // Oxidative Stress and Neurodegenerative Disorders / Eds. G.A.Qureshi, S.H.Parvez. Amsterdam, 2007. P. 313-368.
            3.         Allen C.L.,
Bayraktutan U. Oxidative stress and its role in the pathogenesis of ischaemic stroke // Int. J. Stroke. 2009. Vol. 4, N 6. P. 461-470.
            4.         Awooda H.A., Lutfi M.F., Sharara G G.M., Saeed A.M. Oxidative/nitrosative stress in rats subjected to focal cerebral ischemia/reperfusion // Int. J. Health Sci. (Qassim). 2015. Vol. 9, N 1. P. 17-24.
            5.         Cell Senescence: Methods and Protocols / Eds. L.Galluzzi, I.Vitale, O.Kepp, G.Kroemer. Totowa, 2013.
            6.         Deng H., Zuo X., Zhang J., Liu X., Liu L., Xu Q., Wu Z., Ji A.
Б-lipoic acid protects against cerebral ischemia/reperfusion-induced injury in rats // Mol. Med. Rep. 2015. Vol. 11, N 5. P. 3659-3665.
            7.         Dominguez C., Delgado P., Vilches A., Martin-Gallan P., Ribo M., Santamarina E., Molina C., Corbeto N., Rodriguez-Sureda V., Rosell A., Alvarez-Sabin J., Montaner J. Oxidative stress after thrombolysis-induced reperfusion in human stroke // Stroke. 2010. Vol. 41, N 4. P. 653-660.
            8.         Fedorova T.N., Boldyrev A.A., Gannushkina I.V. Lipid peroxidation in experimental ischemia of the brain // Biochemistry (Mosc). 1999. Vol. 64, N 1. P. 75-79.
            9.         Kunz A.,
Dirnagl U., Mergenthaler P. Acute pathophysiological processes after ischaemic and traumatic brain injury // Best Pract. Res. Clin. Anaesthesiol. 2010. Vol. 24, N 4. P. 495-509.
10.       Manzanero S., Santro T., Arumugam T.V. Neuronal oxidative stress in acute ischemic stroke: sources and contribution to cell injury // Neurochem. Int. 2013. Vol. 62, N 5. P. 712-718.
11.       McCann S.K., Dusting G.J., Roulston C.L. Early increase of Nox4 NADPH oxidase and superoxide generation following endothelin-1-induced stroke in conscious rats // J. Neurosci. Res. 2008. Vol. 86, N 11. P. 2524-2534.
12.       Radak D.,
Resanovic I., Isenovic E.R
. Link between oxidative stress and acute brain ischemia // Angiology. 2014. Vol. 65, N 8. P. 667-676.
13.       Ström J.O., Ingberg E., Theodorsson A., Theodorsson E. Method parameters’ impact on mortality and variability in rat stroke experiments: a meta-analysis // BMC Neurosci. 2013. Vol. 14. P. 41. doi: 10.1186/1471-2202-14-41.
14.       Vani J.R., Mohammadi M.T., Foroshani M.S., Jafari M. Polyhydroxylated fullerene nanoparticles attenuate brain infarction and oxidative stress in rat model of ischemic stroke // EXCLI J. 2016. Vol. 15. P. 378-390.
15.       Woodruff T.M., Thundyil J., Tang S.C., Sobey C.G., Taylor S.M., Arumugam T.V. Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke // Mol. Neurodegener. 2011. Vol. 6, N 1. P. 11. doi: 10.1186/1750-1326-6-11.


Биофизика и биохимия
Взаимосвязь уровня пропротеин конвертазы субтилизин/кексин 9-го типа (PCSK9) с толщиной комплекса интима-медиа у пациентов с семейной гиперхолестеринемией
К.С.Бенимецкая, Ю.И.Рагино, Е.В.Шахтшнейдер, К.В.Макаренкова, Ю.В.Щепина, Е.М.Стахнёва, М.И.Воевода160
ФГБНУ НИИ терапии и профилактической медицины, Новосибирск, РФ
Изучена ассоциация белка PCSK9 с толщиной комплекса интима-медиа при семейной гиперхолестеринемии у 53 пациентов в возрасте 49.9±6.9 года, принимающих статины. Методами ИФА в крови определяли уровень белка PCSK9, выполнялось УЗИ сонных артерий с измерением толщины комплекса интима-медиа общих сонных артерий в дистальном сегменте на протяжении 10 мм от бифуркации по дальней стенке сосуда в режиме online. Рассчитывался средний показатель измерений с обеих сторон, в анализ включали максимальный средний показатель. Уровень PCSK9 положительно коррелировал c толщиной комплекса интима-медиа общих сонных артерий у пациентов с семейной гиперхолестеринемией.
Ключевые слова: пропротеин конвертаза субтилизин/кексин 9-го типа (PCSK9), семейная гиперхолестеринемия, толщина комплекса интима-медиа
Адрес для корреспонденции: benimetskaya@gmail.com.
Бенимецкая К.С.
Литература
            1.         Cheng J.M., Oemrawsingh R.M., Garcia-Garcia H.M., Boersma E., van Geuns R.J., Serruys P.W., Kardys I., Akkerhuis K.M. PCSK9 in relation to coronary plaque inflammation: Results of the ATHEROREMO-IVUS study // Atherosclerosis. 2016. Vol. 248. P. 117-122.
            2.         Gencer B., Montecucco F., Nanchen D., Carbone F., Klingenberg R., Vuilleumier N., Aghlmandi S., Heg D., Räber L., Auer R., Jüni P., Windecker S., Lüscher T.F., Matter C.M., Rodondi N., Mach F. Prognostic value of PCSK9 levels in patients with acute coronary syndromes // Eur. Heart J. 2016. Vol. 37, N 6. P. 546-553.
            3.         Kusters D.M., Wiegman A., Kastelein J.J., Hutten B.A. Carotid intima-media thickness in children with familial hypercholesterolemia // Circ. Res. 2014. Vol. 114, N 2. P. 307-310.
            4.         Lambert G., Petrides F., Chatelais M., Blom D.J., Choque B., Tabet F., Wong G., Rye K.A., Hooper A.J., Burnett J.R., Barter P.J., Marais A.D. Elevated plasma PCSK9 level is equally detrimental for patients with nonfamilial hypercholesterolemia and heterozygous familial hypercholesterolemia, irrespective of low-density lipoprotein receptor defects // J. Am. Coll. Cardiol. 2014. Vol. 63, N 22. P. 2365-2373.
            5.         Leander K., Mälarstig A., Van't Hooft F.M., Hyde C., Hellénius M.L., Troutt J.S., Konrad R.J., Öhrvik J., Hamsten A., de Faire U. Circulating proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) predicts future risk of cardiovascular events independently of established risk factors // Circulation. 2016. Vol. 133, N 13. P. 1230-1239.
            6.         Lim G.B. Low prognostic utility of measuring PCSK9 levels in ACS // Nat. Rev. Cardiol. 2016. Vol. 13, N 2. P. 62-63.
            7.         Nordestgaard B.G., Chapman M.J., Humphries S.E., Ginsberg H.N., Masana L., Descamps O.S., Wiklund O., Hegele R.A., Raal F.J., Defesche J.C., Wiegman A., Santos R.D., Watts G.F., Parhofer K.G., Hovingh G.K., Kovanen P.T., Boileau C., Averna M., Borén J., Bruckert E., Catapano A.L., Kuivenhoven J.A., Pajukanta P., Ray K., Stalenhoef A.F., Stroes E., Taskinen M.R., Tybjærg-Hansen A.; European Atherosclerosis Society Consensus Panel. Familial hypercholesterolaemia is underdiagnosed and undertreated in the general population: guidance for clinicians to prevent coronary heart disease: Consensus Statement of the European Atherosclerosis Society // Eur. Heart J. 2013. Vol. 34, N 45. P. 3478-3490a.
            8.         Raal F., Panz V., Immelman A., Pilcher G. Elevated PCSK9 levels in untreated patients with heterozygous or homozygous familial hypercholesterolemia and the response to high-dose statin therapy // J. Am. Heart Assoc. 2013. Vol. 2, N 2. P. e000028.
            9.         Rogacev K.S., Heine G.H., Silbernagel G., Kleber M.E., Seiler S., Emrich I., Lennartz S., Werner C., Zawada A.M., Fliser D., Böhm M., März W., Scharnagl H., Laufs U. PCSK9 plasma concentrations are independent of GFR and do not predict cardiovascular events in patients with decreased GFR // PLoS One. 2016. Vol. 11, N 1. P. e0146920.
10.       Shan L., Pang L., Zhang R., Murgolo N.J., Lan H., Hedrick J.A. PCSK9 binds to multiple receptors and can be functionally inhibited by an EGF-A peptide // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008. Vol. 375, N 1. P. 69-73.
11.       Tibolla G., Dhyani A., Baragetti A., Catapano A.L. Plasma proprotein convertase subtilisin kexin type 9 (PCSK9) and plasma lipids in a free living population: results from the plic study // Atherosclerosis. 2014. Vol. 235, N 2. P. e60. doi: 10.1016/j.atherosclerosis. 2014.05.149.
12.       Werner C., Hoffmann M.M., Winkler K., Böhm M., Laufs U. Risk prediction with proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) in patients with stable coronary disease on statin treatment // Vascul. Pharmacol. 2014. Vol. 62, N 2. P. 94-102.
13.       Xie W., Liu J., Wang W., Wang M., Qi Y., Zhao F., Sun J., Liu J., Li Y., Zhao D. Association between plasma PCSK9 levels and 10-year progression of carotid atherosclerosis beyond LDL-C: a cohort study. // Int. J. Cardiol. 2016. Vol. 215. P. 293-298.
14.       Zhu Y.M., Anderson T.J., Sikdar K., Fung M., McQueen M.J., Lonn E.M., Verma S. Association of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) with cardiovascular risk in primary prevention // Arterioscler.
Thromb. Vasc. Biol. 2015. Vol. 35, N 10. P. 2254-2259.


Цистеинсодержащие пептиды стимулируют миграцию моноцитов через активацию NADPH-оксидазы
Т.Л.Красникова, Т.И.Арефьева, Е.А.Пылаева, М.В.Сидорова – 164
ФГБУ РКНПК Минздрава РФ, Москва
Анализировали влияние на миграцию моноцитов ингибитора NADPH — апоцинина и блокатора PD98059 экстраклеточной киназы MEK/ERK, участвующей в миграции моноцитов, опосредованной оксидазой Nox4. Миграция моноцитов, стимулируемая цистеинсодержащими пептидами (фрагментами хемокинов МСР-1 и фракталкина со свободной тиольной группой), полностью ингибировалась апоцинином и блокатором MEK/ERK. Предполагается, что механизм стимулирующего влияния цистеинсодержащих пептидов на миграцию моноцитов опосредуется NADPH-оксидазной системой, в частности Nox4.
Ключевые слова: цистеин, пептиды, миграция моноцитов, NADPH-оксидаза
Адрес для корреспонденции: tlkrasnikova@gmail.com.
Красникова Т.Л.
Литература
            1.         Арефьева Т.И., Соколов В.О., Пылаева Е.А., Кухтина Н.Б., Потехина А.В., Рулева Н.Ю., Сидорова М.В., Беспалова Ж.Д., Азьмуко А.А., Красникова Т.Л. Пептидный фрагмент 2940 аминокислотной последовательности моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) стимулирует миграцию моноцитов in vivo и способствует ранозаживлению // ДАН. 2012. Т. 446, № 1. С. 106-109.
            2.         Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Рулева Н.Ю., Сидорова М.В., Азьмуко А.А., Беспалова Ж.Д., Красникова Т.Л. Пептидные фрагменты хемокинового домена фракталкина: влияние на миграцию моноцитов человека // Биоорган. химия. 2012. Т. 38, № 6. С. 660-666.
            3.         Сидорова М.В., Арефьева Т.И., Палькеева М.П., Молокоедов А.С., Азьмуко А.А., Рулева Н.Ю., Пылаева Е.А., Красникова Т.Л., Беспалова Ж.Д. Цистеинсодержащие пептиды вызывают миграцию моноцитов // Биоорган. химия. 2015. Т. 41, № 1. С. 13-22.
            4.         Сидорова М.В., Молокоедов А.С., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б., Красникова Т.Л., Беспалова Ж.Д., Бушуев В.Н. Пептидные фрагменты хемокина МСР-1, их структурные аналоги и их влияние на МСР-1-опосредованную миграцию моноцитарных клеток // Биоорган. химия. 2004. Т. 30, № 6. С. 582-593.
            5.         Barbieri S.S., Cavalca V., Eligini S., Brambilla M., Caiani A., Tremoli E., Colli S. Apocynin prevents cyclooxygenase 2 expression in human monocytes through NADPH oxidase and glutathione redox-dependent mechanisms // Free Radic. Biol. Med. 2004. Vol. 37, N 2. 156-165.
            6.         Cathcart M.K. Regulation of superoxide anion production by NADPH oxidase in monocytes/macrophages: contributions to athe
АФКcleАФКis // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2004. Vol. 24, N 1. P. 23-28.
            7.         Forman H.J., Torres M. Reactive oxygen species and cell signaling: respiratory burst in macrophage signaling // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002. Vol. 166, N 12, Pt 2. P. S4-S8.
            8.         Forman H.J., Torres M., Fukuto J. Redox signaling // Mol. Cell. Biochem. 2002. Vol. 234-235, N 1-2. P. 49-62.
            9.         Hurd T.R., DeGennaro M., Lehmann R. Redox regulation of cell migration and adhesion // Trends Cell Biol. 2012. Vol. 22, N 2. P. 107-115.
10.       Lee C.F., Qiao M., Schröder K., Zhao Q., Asmis R. Nox4 is a novel inducible source of reactive oxygen species in monocytes and macrophages and mediates oxidized low density lipoprotein-induced macrophage death // Circ. Res. 2010. Vol. 106, N 9. P. 1489-1497.
11.       Lee C.F., Ullevig S., Kim H.S., Asmis R. Regulation of monocyte adhesion and migration by Nox4 // PLoS One. 2013. Vol. 8, N 6. P. e66964.
12.       Siow Y.L., Au-Yeung K.K., Woo C.W., O K. Homocysteine stimulates phosphorylation of NADPH oxidase p47phox and p67phox subunits in monocytes via protein kinase Cbeta activation // Biochem. J. 2006. Vol. 398, N. 1. P. 73-82.
13.       Ullevig S., Kim H.S., Asmis R. S-glutathionylation in monocyte and macrophage (dys)function // Int. J. Mol. Sci. 2013. Vol. 14, N 8. P. 15 212-15 232.
14.       Ullevig S., Zhao Q., Lee C.F., Seok Kim H., Zamora D., Asmis R. NADPH oxidase 4 mediates monocyte priming and accelerated chemotaxis induced by metabolic stress // Arterioscler.
Thromb. Vasc. Biol. 2012. Vol. 32, N 2. P. 415-426.


Фармакология и токсикология
Кардиоваскулярные эффекты высокомолекулярных соединений  гуминовой природы
М.В.Зыкова*, М.В.Белоусов*, Т.В.Ласукова**,***, А.С.Горбунов***, Л.А.Логвинова*, А.М.Дыгай**** – 167
*ФГБОУ ВО Сибирский государственный медицинский университет Минздрава РФ, Томск; **ГОУ ВПО Томский государственный педагогический университет Министерства образования и науки РФ, Томск; ***НИИ кардиологии ТНИМЦ РАН, Томск, РФ; ****НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга ТНИМЦ РАН, Томск, РФ
Исследовали активную субстанцию, выделенную из нативных гуминовых веществ торфа, охарактеризованную по физико-химическим параметрам методами УФ- и ИК-спектроскопии, титриметрии, элементного (C,H,N) анализа. Кардиоваскулярные эффекты активной субстанции изучали на модели изолированного перфузируемого по методу Лангендорфа сердца крысы. Установлено, что в концентрации 0.01-0.1 мг/мл активная субстанция оказывает вазодилатирующий эффект. В результате перфузии сердца раствором исследуемой активной субстанции наблюдали снижение давления, развиваемого левым желудочком, и конечного диастолического давления.
Ключевые слова: гуминовые кислоты, торф, сердце, кардиоваскулярные эффекты
Адрес для корреспонденции: gmv2@rambler.ru.
Зыкова М.В.
Литература
            1.         Белоусов М.В., Ахмеджанов Р.Р., Зыкова М.В., Васильев К.Ю., Юсубов М.С. Влияние нативных гуминовых кислот низинного торфа томской области на окислительное фосфорилирование в митохондриях в условиях гипоксии // Хим.-фарм. журн. 2015. Т. 49. № 4. С. 39-43.
            2.         Бузлама А.В., Чернов Ю.Н. Анализ фармакологических свойств, механизмов действия и перспектив применения гуминовых веществ в медицине // Экспер. и клин. фармакол. 2010. Т. 73, № 9 С. 43-48.
            3.         Веремей Э.И., Журба В.А. Применение оксидата торфа при болезнях в области пальцев у крупного рогатого скота // Ветеринария. 2002. № 8. С. 41-43.
            4.         Зыкова М.В., Белоусов М.В., Гурьев А.М., Ахмеджанов Р.Р., Юсубов М.С. Стандартизация гуминовых кислот низинного древесно-травяного вида торфа томской области // Хим.-фарм. журн. 2013. Т. 47, № 12. С. 53-56.
            5.         Лигачева А.А., Данилец М.Г., Трофимова Е.С., Шерстобоев Е.Ю., Жданов В.В., Гурьев А.М., Белоусов М.В., Юсубов М.С., Корж А.П., Кривощеков С.В., Дыгай А.М. Влияние водорастворимых полисахаридов с различной химической структурой, выделенных из аира болотного (Acorus calamus L.) и клевера лугового (Trifolium pratense L.), на продукцию оксида азота (скрининговое исследование) // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 160, № 9. С. 314-319.
            6.         Смирнова Ю.В., Виноградова В.С. Механизм действия и функции гуминовых препаратов // Агрохимический вестник. 2004. № 1. С. 22-23.
            7.         Степченко Л.М., Жорина Л.В., Кравцова Л.В. Влияние гумата натрия на обмен веществ и резистентность высокопродуктивной птицы // Биол. науки. 1991. № 10. С
. 90-95.
            8.         Hseu Y.C., Senthil Kumar K.J., Chen C.S., Cho H.J., Lin S.W., Shen P.C., Lin C.W., Lu F.J., Yang H.L. Humic acid in drinking well water induces inflammation through reactive oxygen species generation and activation of nuclear factor-kB/activator protein-1 signaling pathways: a possible role in atherosclerosis // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2014. Vol. 274, N 2. P. 249-262.
            9.         Hseu Y.C., Wang S.Y., Chen H.Y., Lu F.J., Gau R.J., Chang W.C., Liu T.Z., Yang H.L. Humic acid induces the generation of nitric oxide in human umbilical vein endothelial cells: stimulation of nitric oxide synthase during cell injury // Free Radic. Biol. Med. 2002. Vol. 32, N 7. P. 619-629.
10.       Massion P.B., Feron O., Dessy C., Balligand J.L. Nitric oxide and cardiac function: ten years after, and continuing // Circ. Res. 2003. Vol. 93, N 5. P. 388-398.
11.       Pena-Mendez E.M., Havel J., Patoska J. Humic substances — compounds of still unknown structure: applications in agriculture, industry, environment, and biomedicine // J. Appl. Biomed. 2005. N 3. P. 13-24.
12.       Vucskits A.V., Hullar I., Bersényi A., Andrasofszky E., Kulcsar M., Szabo J. Effect of fulvic and humic acids on performance, immune response and thyroid function in rats // J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. (Berl). 2010. Vol. 94, N 6. P. 721-728.


Получение препаратов рекомбинантного серпина камчатского краба Paralithodes camtschaticus для биомедицинских исследований
Н.Н.Костин*,**, Н.А.Пономаренко*, В.А.Исаев***, Г.Н.Руденская*, Т.В.Бобик*, А.Г.Габибов*,**, И.В.Смирнов*,** – 171
*ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; **Химический факультет МГУ им. М.В.Ломоносова,Москва, РФ; ***ООО Научно-производственное предприятие “ТРИНИТА”, Москва, РФ
Получены генетические конструкции для внутри- и внеклеточной экспрессии целевого белка с различными лидерными последовательностями, разработан оригинальный метод эффективного отбора клонов с максимальным уровнем экспрессии. Содержание серпина в клетках составило 6 мг/л при внутриклеточной экспрессии в системе Pichia pastoris.
Ключевые слова: Pichia pastoris, рекомбинантные белки, серпин, антикоагулянт
Адрес для корреспонденции: ivansmr@inbox.ru.
Смирнов И.В.
Литература
1.         Патент РФ № 2560264. Способ получения рекомбинантного ингибитора сериновых протеиназ камчатского краба / В.А.Исаев, Г.Н.Руденская, Н.Н.Костин, Е.Н.Сергеева, И.В.Стаценко, Т.Я.Колесникова // Бюл. № 23. Опубликовано 20.08.2015.
2.         Apte-Deshpande A., Rewanwar S., Kotwal P., Raiker V.A., Padmanabhan S. Efficient expression and secretion of recombinant human growth hormone in the methylotrophic yeast Pichia pastoris: potential applications for other proteins // Biotechnol. Appl. Biochem. 2009. Vol. 54, N 4. P. 197-205.
3.         Balashova M.V., Lyutova L.V., Rudenskaya Y.A., Isaev V.A., Andina S.S., Koslov L.V., Rudenskaya G.N. Anticoagulant and anticompliment effect of an endogenous inhibitor from hepatopancreas of red king crab (Paralithosed camtshaticus) // Biol. Chem. 2011. Vol. 5, N 3. P. 268-275.
4.         Gettins P.G. Serpin structure, mechanism, and function // Chem. Rev. 2002. Vol. 102, N 12. P. 4751-4804.
5.         Kuznetsov S.A., Kuranova I.P., Golyshev S.A., Rudenskaya Yu.A., Isaev V.A., Rudenskaya G.N. A novel endogenous inhibitor from the hepatopancreas of the kamchatka crab Paralithodes camtschaticus // Russ. J. Bioorgan. Chem. 2012. Vol. 38. N 3. P. 290-297.
6.         Pemberton P.A., Bird P.I. Production of serpins using yeast expression systems // Methods. 2004. Vol. 32, N 2. P. 185-190.
7.         Shukla A.K., Reinhart C., Michel H. Dimethylsulphoxide as a tool to increase functional expression of heterologously produced GPCRs in mammalian cells // FEBS Lett. 2006. Vol. 580, N 17. P. 4261-4265.
8.         Silverman G.A., Bird P.I., Carrell R.W., Church F.C., Coughlin P.B., Gettins P.G., Irving J.A., Lomas D.A., Luke C.J., Moyer R.W., Pemberton P.A., Remold-O’Donnell E., Salvesen G.S., Travis J., Whisstock J.C. The serpins are an expanding superfamily of structurally similar but functionally diverse proteins. Evolution, mechanism of inhibition, novel functions, and a revised nomenclature // J. Biol. Chem. 2001. Vol. 276, N 36. P. 33 293-33 296.
9.         Wu S., Letchworth G.J. High efficiency transformation by electroporation of Pichia pastoris pretreated with lithium acetate and dithiothreitol // Biotechniques.
2004. Vol. 36, N 1. P. 152-154.


Экспериментальная оценка влияния препарата кагоцел на генеративную функцию крыс-самцов пубертатного возраста
Т.Г.Боровская, М.Е.Полуэктова, А.В.Вычужанина, В.А.Машанова, Ю.А.Щемерова    – 176
НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга ТНИМЦ РАН, Томск, РФ
Изучено возможное токсическое действие противовирусного препарата “Кагоцел” на репродуктивную систему крыс-самцов пубертатного возраста. Лекарственное средство вводили в течение всего цикла сперматогенеза (48 дней) в терапевтической дозе и в 10 раз ее превышающей. Установлено, что кагоцел не снижает способность животных к спариванию и к оплодотворению, не угнетает сперматогенез, не оказывает токсического влияния на потомство. Полученные данные характеризуют кагоцел как препарат с широким профилем репродуктивной безопасности и свидетельствуют о том, что возрастные границы использования кагоцела в педиатрической практике могут быть расширены.
Ключевые слова: противовирусный препарат кагоцел, генеративная функция крыс-самцов, пубертатный возраст
Адрес для корреспонденции: repropharm@yandex.ru.
Боровская Т.Г.
Литература
1.         Винокуров А.А. Лимфома Ходжкина, проблема репродукции у мужчин // Клин. онкогематол. 2013. Т. 6, № 3. С. 258-273.
2.         Дурнев А.Д., Смольникова Н.М., Скосырева, Немова Е.П., Соломина А.С. Шреде О.В., Гуськова Т.А., Верстакова О.Л., Сюбаев Р.Д. Методические рекомендации по доклиническому изучению репродуктивной токсичности новых лекарственных средств // Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под. ред. А.Н.Миронова, Н.Д.Бунатяна. М., 2013. Ч. 1. С. 80-93.
3.         Рыбалкин С.П., Коновалова Е.В., Гуськова Т.А., Савинова Т.Б. Экспериментальная оценка влияния препарата Кагоцел на генеративную функцию животных // Токсикол. вестник. 2013. № 2. С
. 33-38.
4.         de Peyster A., Wang Y.Y. Genetic toxicity studies of gossypol // Mutat. Res. 1993. Vol. 297, N 3. P. 293-312.


Исследование защитных свойств биологического антидота на основе антитела, метаболизирующего фосфорорганический пестицид параоксон
Ю.А.Мокрушина, А.В.Степанова, В.А.Паликов*, А.В.Степанов, Г.И.Белоус*, И.А.Дьяченко*, В.Д.Кнорре, И.В.Смирнов, А.Г.Габибов180
ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; *Филиал Института биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Пущино, Московская область, РФ
Антитело A17 и его мутанты способны с высокой эффективностью взаимодействовать с фосфорорганическим пестицидом параоксоном. Исследовали защитные свойства антитела A17-K47 при отравлении параоксоном в мышиной модели. Оптимальными дозами параоксона для моделирования острого токсического эффекта фосфорорганических соединений является доза 550 мкг/кг. Фармакокинетические параметры антитела A17-K47: t1/2 распред.=7.2±1.4 мин, t1/2 вывед.=330±20 мин. Препарат антитела не оказывал токсических эффектов при введении в десятикратной расчетной терапевтической дозе (610 мг/кг). Препарат не повлиял на снижение смертности при остром отравлении параоксоном, однако отсутствие токсичности открывает перспективы его использования при хроническом отравлении параоксоном.
Ключевые слова: каталитические антитела, фосфорорганические токсины, параоксон, профилактика отравлений, биологический антидот
Адрес для корреспонденции: yuliana256@mail.ru. Мокрушина Ю.А.

Литература
1.         Garrett T.L., Rapp C.M., Grubbs R.D., Schlager J.J., Lucot J.B. A murine model for sarin exposure using the carboxylesterase inhibitor CBDP // Neurotoxicology. 2010. Vol. 31, N 5. P. 502-508.
2.         Guide for Care and Use of Laboratory Animals. Washington, 1996.
3.         Ilyushin D.G., Smirnov I.V., Belogurov A.A.Jr, Dyachenko I.A., Zharmukhamedova T.Iu., Novozhilova T.I., Bychikhin E.A., Serebryakova M.V., Kharybin O.N., Murashev A.N., Anikienko K.A., Nikolaev E.N., Ponomarenko N.A., Genkin D.D., Blackburn G.M., Masson P., Gabibov A.G. Chemical polysialylation of human recombinant butyrylcholinesterase delivers a long-acting bioscavenger for nerve agents in vivo // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2013. Vol. 110, N 4. P. 1243-1248.
4.         Jokanovic M. Medical treatment of acute poisoning with organophosphorus and carbamate pesticides // Toxicol. Lett. 2009. Vol. 190, N 2. P. 107-115.
5.         Masson P., Carletti E., Nachon F. Structure, activities and biomedical applications of human butyrylcholinesterase // Protein Pept. Lett. 2009. Vol. 16, N 10. P. 1215-1224.
6.         Masson P., Nachon F.,
Broomfield C.A., Lenz D.E., Verdier L., Schopfer L.M., Lockridge O.
A collaborative endeavor to design cholinesterase-based catalytic scavengers against toxic organophosphorus esters // Chem. Biol. Interact. 2008. Vol. 175, N 1-3. P. 273-280.
7.         Smirnov I., Carletti E., Kurkova I., Nachon F., Nicolet Y., Mitkevich V.A., Debat H., Avalle B., Belogurov A.A.Jr, Kuznetsov N., Reshetnyak A.,Masson P., Tonevitsky A.G., Ponomarenko N., Makarov A.A., Friboulet A., Tramontano A., Gabibov A. Reactibodies generated by kinetic selection couple chemical reactivity with favorable protein dynamics // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2011. Vol. 38. P. 15 954-15 959.
8.         Smirnov I.V., Golovin A.V., Chatziefthimiou S.D., Stepanova A.V., Peng Y., Zolotareva O.I., Belogurov A.A.Jr, Kurkova I.N., Ponomarenko N.A., Wilmanns M., Blackburn G.M., Gabibov A.G., Lerner R.A. Robotic QM/MM-driven maturation of antibody combining sites // Sci. Adv. 2016. Vol. 2, N 10. P. e1501695.


Противовоспалительная и анальгетическая активность комплекса флавоноидов Lychnis chalcedonica L.
Ю.В.Нестерова*, Т.Н.Поветьева*, Л.Н.Зибарева**, Н.И.Суслов*,**, Е.П.Зуева*, С.Г.Аксиненко*, О.Г.Афанасьева*, С.Г.Крылова*, Е.Н.Амосова*, О.Ю.Рыбалкина*,**, К.А.Лопатина*,** – 185
*НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга, Томский НИМЦ, Томск, РФ; **ФГАОУ ВО Национальный исследовательский Томский государственный университет, Томск, РФ
Исследовали противовоспалительную и анальгетическую активность комплекса флавоноидов Lyсhnis chalcedonica L. на моделях острого асептического воспаления, вызванного каррагенином, гистамином, серотонином, и химического болевого раздражения, индуцированного раствором уксусной кислоты. Показано, что курсовое назначение флавоноидов Lyсhnis chalcedonica L. обеспечивает стойкий фармакологический эффект, сопоставимый с активностью эталонного противовоспалительного препарата диклофенака натрия.
Ключевые слова: противовоспалительная и анальгетическая активности, флавоноиды
Адрес для корреспонденции: nes-yuliya@yandex.ru.
Нестерова Ю.В.
Литература
            1.         Азарова О.В., Галактионова Л.П. Флавоноиды: механизм противовоспалительного действия // Химия растительного сырья. 2012. № 4. С. 61-78.
            2.         Крылова С.Г., Зуева Е.П., Зибарева Л.Н., Амосова Е.Н., Разина Т.Г. Противоязвенная активность экстрактов экдистероидсодержащих растений родов Lychnis и Silene семейства Caryophyllaceae // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 158, № 8. С. 190-194.
            3.         Лакин Г.Ф. Биометрия. М., 1990.
            4.         Машковский М.Д. Лекарственные средства: 15-е изд. М., 2008.
            5.         Нестерова Ю.В., Поветьева Т.Н., Нагорняк Ю.Г., Андреева Т.И., Суслов Н.И. Влияние биологически активных веществ из живокости высокой на развитие острого воспаления разного генеза // Бюл. экспер. биол. 2008. Т. 145, № 6. С. 671-674.
            6.         Нестерова Ю.В., Поветьева Т.Н., Суслов Н.И., Пушкарский С.В., Нагорняк Ю.Г., Попова Е.В., Андреева Т.И., Пашинский В.Г. Создание новых лекарственных препаратов на основе алкалоидов и флавоноидов из растений Сибири // Бюл. экспер. биол. 2008. Прил. № 2. С. 30-36.
            7.         Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С., Маслов М.Ю., Суслов Н.И., Зибарева Л.Н. Гемореологическая и церебропротекторная активность экстракта Lychnis chalcedonica L. при ишемии мозга у крыс // Бюл. экспер. биол. 2005. Т. 139, № 1. С. 68-71.
            8.         Плотников М.Б., Васильев А.С., Алиев О.И., Зибарева Л.Н. Крысы линии Brattleboro как модель синдрома повышенной вязкости крови для исследования средств, обладающих гемореологической активностью // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 5. С. 653-655.
            9.         Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / Под ред. А.Н.Миронова. М., 2012.
10.       Саратиков А.С., Венгеровский А.И., Прищеп Т.П. Адъювантная болезнь (морфология, патогенез, экспериментальная терапия). Томск, 1983.
11.       Сигидин Я.А., Шварц Г.Я, Арзамасцев А.П., Либерман С.С. Лекарственная терапия воспалительного процесса. М., 1988.
12.       Смолякова И.М., Авдеенко С.Н., Калинкина Г.И., Юсубов М.С., Зибарева Л.Н. Исследование химического состава лихниса халцедонского, культивируемого в Западной Сибири. Сообщение II. ВЭЖ-хроматографическое исследование фенольных соединений и экдистероидов лихниса халцедонского, культивируемого в Западной Сибири // Химия растительного сырья. 2010. № 3. С. 95-102.
13.       Сухомлинов Ю.А., Покровский М.В., Конопля А.И., Бачинский О.Н. Исследование влияния дигидрокверцетина и настоя цветков лабазника шестилепестного на функциональное состояние миокарда крыс в условиях моделирования эмоционально-иммобилизационного стресса // Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2005. № 2. С. 209-213.
14.       Тараховский Ю.С., Ким Ю.А., Абдрасимов Б.С., Музафаров Е.Н. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина. Пущино, 2013.


Влияние фенибута и нового производного глутаминовой кислоты глуфимета на дыхание митохондрий клеток сердца и головного мозга стрессированных животных на фоне блокады индуцибельной NO-синтазы
В.Н.Перфилова, Т.А.Попова*, И.И.Прокофьев, И.С.Мокроусов, О.В.Островский*, И.Н.Тюренков – 190
Кафедра фармакологии и биофармации факультета усовершенствования врачей (зав. — чл.-кор. РАН, докт. мед. наук проф. И.Н.Тюренков), *кафедра теоретической биохимии с курсом клинической биохимии (зав. — докт. мед. наук проф. О.В.Островский) ФГБОУ ВО Волгоградского государственного медицинского университета Минздрава РФ, Волгоград 
У крыс после 24-часового стрессорного воздействия, моделируемого подвешиванием за дорсальную шейную кожную складку, наблюдается увеличение потребления кислорода митохондриями клеток сердца и головного мозга при отсутствии АДФ, снижение дыхания митохондрий в присутствии АДФ, что свидетельствует о разобщении процессов окисления субстратов и синтеза АТФ и может вызывать утечку электронов из дыхательной цепи, образование АФК и окислительное повреждение клеточных структур. Блокада индуцибельной NO-синтазы аминогуанидином (50 мг/кг внутрибрюшинно однократно перед стрессированием) приводила к повышению сопряжения дыхания и окислительного фосфорилирования в митохондриях клеток сердца и головного мозга крыс, подвергшихся иммобилизационно-болевому воздействию, особенно выраженному в кардиомиоцитах. Исследуемые вещества — глуфимет (29 мг/кг внутрибрюшинно однократно перед стрессированием) и фенибут (50 мг/кг внутрибрюшинно однократно перед стрессированием) — способствовали ограничению стрессорного повреждения митохондрий как на фоне ингибирования индуцибельной NO-синтазы, так и без него, о чем свидетельствует повышение коэффициента дыхательного контроля по сравнению с аналогичным показателем стрессированных крыс контрольных группы.
Ключевые слова: митохондрии, стресс, производные ГАМК и глутамата
Адрес для корреспонденции: igor.prokofiev@mail.ru.
Прокофьев И.И.
Литература
            1.         Ковалев Г.В., Гурбанов К.Г., Тюренков И.Н., Найденов С.Н. Влияние транквилизаторов на функциональное состояние миокарда при его стрессорном повреждении // Фармакология и токсикология. 1983. Т. 46, № 3. С. 41-44.
            2.         Перфилова В.Н., Островский О.В., Веровский В.Е., Попова Т.А., Лебедева С.А., Диб Х. Влияние цитрокарда на функциональное состояние митохондрий кардиомиоцитов при хронической алкогольной интоксикации // Бюл. экспер. биол. 2007. Т. 143, № 3. С. 312-314.
            3.         Тюренков И.Н., Перфилова В.Н., Попова Т.А., Иванова Л.Б., Прокофьев И.И., Гуляева О.В., Штепа Л.И. Изменение оксидантного и антиоксидантного статуса у самок с экспериментальным гестозом под влиянием производных ГАМК // Бюл. экспер. биол. 2013. Т. 155, № 3. С. 340-343.
            4.         Тюренков И.Н., Перфилова В.Н., Садикова Н.В., Берестовицкая В.М., Васильева О.С. Влияние нового производного глутаминовой кислоты на показатели сократимости миокарда стрессированных животных в условиях блокады синтеза оксида азота // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 3. С. 366-368.
            5.         Тюренков И.Н., Перфилова В.Н., Садикова Н.В., Прокофьев И.И. NO-зависимый механизм кардиопротекторного действия фенибута при стрессорном нарушении сократительной функции сердца // Экспер. и клин. фармакол. 2015. Т. 78, № 11. С. 8-11.
            6.         Удинцев Н.А., Иванов В.В. Антиоксидантное действие глутаминовой кислоты // Патол. физиол. 1984. № 4. С. 60-62.
            7.         Brand M.D., Nicholls D.G. Assessing mitochondrial dysfunction in cells // Biochem. J. 2011. Vol. 435, N 2. P. 297-312. Erratum in: Vol. 437, N 3. P. 575.
            8.         Cossenza M., Cadilhe D.V., Coutinho R.N., Paes-de-Carvalho R. Inhibition of protein synthesis by activation of NMDA receptors in cultured retinal cells: a new mechanism for the regulation of nitric oxide production // J. Neurochem. 2006. Vol. 97, N 5. P. 1481-1493.
            9.        
Fulda S., Gorman A.M., Hori O., Samali A
. Cellular stress responses: cell survival and cell death // Int. J. Cell Biol. 2010. Vol. 2010. ID 214074. doi: 10.1155/2010/214074.
10.       Lanza I.R., Nair K.S. Functional assessment of isolated mitochondria in vitro // Methods Enzymol. 2009. Vol. 457. P. 349-372.
11.       Laszlo F., Evans S.M., Whittle B.J. Aminoguanidine inhibits both constitutive and inducible nitric oxide synthase isoforms in rat intestinal microvasculature in vivo // Eur. J. Pharmacol. 1995. Vol. 272, N 2-3. P. 169-175.
12.       Olivenza R., Moro M.A., Lizasoain I., Lorenzo P., Fernandez A.P., Rodrigo J., Bosca L., Leza J.C. Chronic stress induces the expression of inducible nitric oxide synthase in rat brain cortex // J. Neurochem. 2000. Vol. 74, N 2. P. 785-791.
13.       Viswanatha G.L., Shylaja H., Rao K.S., Ashwini Y., Kumar V.R., Mohan C.G., Sunil V.G., Kumar M.V., Rajesh S. Amelioration of immobilization stress-induced biochemical and behavioral alterations and mitochondrial dysfunction by naringin in mice: possible mechanism of nitric oxide modulation // J. Chin. Integr. Med. 2011. Vol. 9, N 11. P. 1254-1263.
14.       Wang C.H., Wu S.B., Wu Y.T., Wei Y.H. Oxidative stress response elicited by mitochondrial dysfunction: implication in the pathophysiology of aging // Exp. Biol. Med. (Maywood). 2013. Vol. 238, N 5. P. 450-460.


Микробиология и иммунология
Изменение свойств мультипотентных мезенхимных стромальных клеток под действием интерферона-гамма
Н.А.Петинати, Н.М.Капранов, А.Е.Бигильдеев, М.Д.Попова, Ю.О.Давыдова, И.В.Гальцева, Н.И.Дризе, Л.А.Кузьмина, Е.Н.Паровичникова, В.Г.Савченко194
ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава РФ, Москва
Изучали изменение популяции мультипотентных мезенхимных стромальных клеток человека, активированных ИФН-g. Клетки культивировали в стандартных условиях, добавляя в среду культивирования ИФН-g в разных концентрациях, в течение 4 ч или в течение 2 пассажей. Показано, что суммарная клеточная продукция достоверно снижалась при длительном культивировании в присутствии ИФН-g, тогда как 4-часовое воздействие не влияло на клеточную продукцию. Через 4 ч культивирования уровень экспрессии IDO1 повышался в 300 раз, CSF1 — в 7 раз, а IL6 — в 2.4 раза. Такое повышение экспрессии этих генов сохранялось в культуре и через 1 сут и через 2 сут после удаления ИФН-g из среды культивирования. Сразу после воздействия ИФН-g на поверхности клеток практически не изменялась экспрессия MHC (HLA) I и II класса. Затем по мере культивирования наблюдалось значительное увеличение экспрессии HLA-ABC (MHC I) и HLA-DR (MHC II), что аннулирует “иммунную привилегированность” этих клеток, на которой основано клиническое применение аллогенных мультипотентных мезенхимных стромальных клеток. Мультипотентные мезенхимные стромальные клетки способны ингибировать пролиферацию лимфоцитов. Уровень ингибирования пролиферации лимфоцитов зависит от индивидуальных свойств донора мультипотентных мезенхимных стромальных клеток. Обработка клеток ИФН-g существенно не влияла на степень ингибирования пролиферации лимфоцитов.
Ключевые слова: мультипотентные мезенхимные стромальные клетки, интерферон-гамма, относительный уровень экспрессии генов, антигены главного комплекса гистосовместимости, ингибирование пролиферации лимфоцитов
Адрес для корреспонденции: ndrize@yandex.ru.
Дризе Н.И.
Литература
            1.         Ankrum J., Karp J.M. Mesenchymal stem cell therapy: two steps forward, one step back // Trends Mol. Med. 2010. Vol. 16, N 5. P. 203-209.
            2.         Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // Anal. Biochem. 1987. Vol. 162, N 1. P. 156-159.
            3.         Dominici M., Le Blanc K., Mueller I., Slaper-Cortenbach I., Marini F., Krause D., Deans R., Keating A., Prockop Dj, Horwitz E. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement // Cytotherapy. 2006. Vol. 8, N 4. P. 315-317.
            4.         Duijvestein M., Wildenberg M.E., Welling M.M., Hennink S., Molendijk I., van Zuylen V.L., Bosse T., Vos A.C., de Jonge-Muller E.S., Roelofs H., van der Weerd L., Verspaget H.W., Fibbe W.E., te Velde A.A., van den Brink G.R., Hommes D.W. Pretreatment with interferon-
g enhances the therapeutic activity of mesenchymal stromal cells in animal models of colitis // Stem Cells. 2011. Vol. 29, N 10. P. 1549-1558.
            5.         Elsaesser A.F., Schwarz S., Joos H., Koerber L., Brenner R.E., Rotter N. Characterization of a migrative subpopulation of adult human nasoseptal chondrocytes with progenitor cell features and their potential for in vivo cartilage regeneration strategies // Cell Biosci. 2016. Vol. 6. P. 11. doi: 10.1186/s13578-016-0078-6.
            6.         Introna M., Rambaldi A. Mesenchymal stromal cells for prevention and treatment of graft-versus-host disease: successes and hurdles // Curr. Opin. Organ Transplant. 2015. Vol. 20, N 1. P. 72-78.
            7.         Le Blanc K., Tammik C., Rosendahl K., Zetterberg E., Ringdén O. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells // Exp. Hematol. 2003. Vol. 31, N 10. P. 890-896.
            8.         Li N., Feugier P., Serrurrier B., Latger-Cannard V., Lesesve J.F., Stoltz J.F., Eljaafari A. Human mesenchymal stem cells improve ex vivo expansion of adult human CD34+ peripheral blood progenitor cells and decrease their allostimulatory capacity // Exp. Hematol. 2007. Vol. 35, N 3. P. 507-515.
            9.         Meisel R., Zibert A., Laryea M., Göbel U., Däubener W., Dilloo D. Human bone marrow stromal cells inhibit allogeneic T-cell responses by indoleamine 2,3-dioxygenase-mediated tryptophan degradation // Blood. 2004. Vol. 103, N 12. P. 4619-4621.
10.       Rafei M., Birman E., Forner K., Galipeau J. Allogeneic mesenchymal stem cells for treatment of experimental autoimmune encephalomyelitis // Mol. Ther. 2009. Vol. 17, N 10. P. 1799-1803.
11.       Ren G., Zhang L., Zhao X., Xu G., Zhang Y., Roberts A.I., Zhao R.C., Shi Y. Mesenchymal stem cell-mediated immunosuppression occurs via concerted action of chemokines and nitric oxide // Cell Stem Cell. 2008. Vol. 2, N 2. P. 141-150.
12.       Schmittgen T.D., Livak K.J. Analyzing real-time PCR data by the comparative C(T) method // Nat. Protoc. 2008. Vol. 3, N 6. P. 1101-1108.
13.       Sheng H., Wang Y., Jin Y., Zhang Q., Zhang Y., Wang L., Shen B., Yin S., Liu W., Cui L., Li N. A critical role of IFNgamma in priming MSC-mediated suppression of T cell proliferation through up-regulation of B7-H1 // Cell Res. 2008. Vol. 18, N 8. P. 846-857.
14.       Shipounova I.N., Petinati N.A., Bigildeev A.E., Zezina E.A., Drize N.I., Kuzmina L.A., Parovichnikova E.N., Savchenko V.G. Analysis of results of acute graft-versus-host disease prophylaxis with donor multipotent mesenchymal stromal cells in patients with hemoblastoses after allogeneic bone marrow transplantation // Biochemistry (Mosc). 2014. Vol. 79, N 12. P. 1363-1370.
15.       Sivanathan K.N., Gronthos S., Rojas-Canales D., Thierry B., Coates P.T. Interferon-gamma modification of mesenchymal stem cells: implications of autologous and allogeneic mesenchymal stem cell therapy in allotransplantation // Stem Cell Rev. 2014.
Vol. 10, N 3. P. 351-375.


Влияние вторичных метаболитов Bacillus sp. из многолетнемерзлых пород на синтез цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови человека
Л.Ф.Калёнова*,**, С.С.Колыванова*,**, А.С.Бажин**, И.М.Беседин**, В.П.Мельников*,** – 200
*ФГАОУ ВО Тюменский государственный университет, Тюмень, РФ; **ФГБУН Тюменский научный центр СО РАН, Тюмень, РФ 
Изучено влияние вторичных метаболитов микроорганизмов Bacillus sp., выделенных из многолетнемерзлых пород позднего неогена, на секрецию провоспалительных (ФНО-a, ИЛ-1b, ИЛ-8, ИЛ-2 и ИФН-g) и противовоспалительных (ИЛ-4 и ИЛ-10) цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови человека in vitro. Установлено, что влияние метаболитов Bacillus sp. на секрецию цитокинов по многим показателям превосходит действие митогена фитогемагглютинина и метаболитов Bacillus cereus лекарственного штамма IP5832. Выявлена зависимость активности метаболитов от температуры инкубации бактерий. В частности, “холодовые” метаболиты Bacillus sp. (получены при -5оС) в большей степени индуцируют Th1-опосредованную секрецию ИФН-g, а “тепловые” (получены при 37оС) — Th2-опосредованную секрецию ИЛ-4. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности разработки лекарственных препаратов с иммуномодулирующим эффектом на основе метаболитов Bаcillus sp.
Ключевые слова: бактерии из многолетнемерзлых пород, вторичные метаболиты, температура инкубации бактерий, антигениндуцированная секреция цитокинов
Арес для корреспонденции: lkalenova@mail.ru.
Калёнова Л.Ф.
Литература
            1.         Абрамова А.Ю., Перцов С.С., Козлов А.Ю., Никенина Е.В., Калиниченко Л.С., Дудник Е.Н., Алексеева И.В. Содержание цитокинов в крови и структурах головного мозга у крыс при введении липополисахарида // Бюл. экспер. биол. 2013. Т. 155, № 4. С. 405-409.
            2.         Баева Т.А., Гейн С.В., Куюкина М.С., Ившина И.Б., Кочина О.А., Черешнев В.А. Влияние гликолипидного Rhodococcus-биосурфактанта на секреторную активность нейтрофилов in vitro // Бюл. экспер. биол. 2014. Т. 157, № 2. С. 202-206.
            3.         Вахитов Т.Я., Петров Л.Н. Регуляторные функции экзометаболитов бактерий // Микробиология. 2006. Т. 75, № 4. С. 483-488.
            4.         Грязева И.В., Давыдова О.К. Роль алкилоксибензолов в регуляции стрессового ответа бактерий // Вестн. ЧелГУ. 2013. № 7. С. 55-57.
            5.         Данилова Т.А., Аджиева А.А., Данилина Г.А., Лунин В.Г., Грабко В.И., Минко А.Г. Изменение профиля цитокинов в сыворотке крови мышей при введении культуры стрептококка группы А // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 1. С. 75-78.
            6.         Кремлева Е.А., Сгибнев А.В. Провоспалительные цитокины как регуляторы состояния микробиоценоза влагалища // Бюл. экспер. биол. 2016. Т. 162, № 7. С. 88-91.
            7.         Николаев Ю.А., Мулюкин А.Л., Степаненко И.Ю., Эль-Регистан Г.И. Ауторегуляция стрессового ответа микроорганизмов // Микробиология. 2008. Т. 75, № 4. С. 489-496.
            8.         Шпаков А.О. Сигнальные молекулы бактерий непептидной природы QS-типа // Микробиология. 2009. Т. 78, № 2. С. 163-175.
            9.         Эль-Регистан Г.И., Мулюкин А.Л., Николаев Ю.А., Сузина Н.Е., Гальченко В.Ф., Дуда В.И. Адаптогенные функции внеклеточных ауторегуляторов микроорганизмов // Микробиология. 2006. Т. 75, № 4. С. 446-456.
10.       Kalenova L.F., Novikova M.A., Subbotin A.M. Effects of permafrost microorganisms on skin wound reparation // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 158, N 4. P. 478-482.
11.       Kalyonova L.F., Novikova M.A., Subbotin A.M., Bazhin A.S. Effects of temperature on biological activity of permafrost microorganisms // Bull. Exp. Biol. Med. 2015. Vol. 158, N 6. P. 772-775.
12.       Kalenova L.F., Suhovey U.G., Broushkov A.V., Melnikov V.P., Fisher T.A., Besedin I.M., Novikova M.A., Efimova J.A., Subbotin A.M. Experimental study of the effects of permafrost microorganisms on the morphofunctional activity of the immune system // Bull. Exp. Biol. Med. 2011. Vol. 151, N 2. P. 201-204.
13.       Ritchie A.J., Jansson A.
Р., Stallberg J.Р., Nilsson P.А., Lysaght P.M., Cooley M.A. The Pseudomonas aeruginosa quorum-sensing molecule N-3-(oxododecanoyl)-L-homoserine lactone inhibits T-cell differentiation and cytokine production by a mechanism involving an early step in T-cell activation // Infect. Immun. 2005. Vol. 73, N 3. Р. 1648-1655.
14.       Ritchie A.J., Yam A.O., Tanabe K.M., Rice S.A., Cooley
М.А. Modification of in vivo and in vitro T- and B-cell-mediated immune responses by the Pseudomonas aeruginosa quorum-sensing molecule N-(3-oxododecanoyl)-L-homoserine lactone // Infect. Immun. 2003. Vol. 71, N 8. Р
. 4421-4431.

Регенеративный потенциал сперматогониальных стволовых клеток, эндотелиальных и эпителиальных прекурсоров мышей линии С57Bl/6 с метаболическими нарушениями
Е.Г.Скурихин, А.В.Пахомова, О.В.Першина, Л.А.Ермолаева, В.А.Крупин, Н.Н.Ермакова, Э.С.Пан, А.И.Кудряшова, О.Ю.Рыбалкина, Т.Б.Павловская, Н.В.Литвяков*, В.Е.Гольдберг*, А.М.Дыгай204
НИИФиРМ им. Е.Д.Гольдберга, *Томский НИМЦ РАН, Томск, РФ
На модели угнетения сперматогенеза бусульфаном и in vitro исследовали свойства сперматогониальных стволовых клеток, эндотелиальных и эпителиальных прекурсоров семенников мышей линии C57Bl/6 в условиях метаболических нарушений. Показано, что сперматогониальные стволовые клетки (CD117CD90+) и эпителиальные прекурсоры (CD45СD31Sca-1+CD49f+) из тестикул мышей с метаболическими нарушениями демонстрируют 17- и 28-кратный прирост клеточной массы соответственно и генерируют колонии in vitro. В то же время потенциал к самообновлению сперматогониальных стволовых клеток с иммунофенотипом CD51CD24+CD52+ снижается. Сперматогониальные стволовые клетки (CD117CD90+, CD117+CD90+) и эндотелиальные прекурсоры (CD45CD31+) из тестикул мышей-доноров с метаболическими нарушениями демонстрируют высокую способность к приживлению в пораженных бусульфаном семенниках мышей линии C57Bl/6.
Ключевые слова: метаболические нарушения, воспаление, сперматогониальные стволовые клетки, эндотелиальные прекурсоры, эпителиальные прекурсоры
Адрес для корреспонденции: angelinapakhomova2011@gmail. com.
Пахомова А.В.
Литература
            1.         Биология стволовых клеток и клеточные технологии. Т. 2 / Под ред. М.А.Пальцева. М., 2009.
            2.         Манушарова Р.А., Черкезова Э.И. Гипогонадизм у мужчин // Фарматека. 2014. № 12. С. 61-69.
            3.         Роживанов Р.В., Яшина Ю.Н. Аспекты применения андрогенной заместительной терапии при лечении гипогонадизма у мужчин с сахарным диабетом и метаболическом синдромом // Ожирение и метаболизм. 2015. Т. 12, № 1. С. 11-14.
            4.         Скурихин Е.Г., Пахомова А.В., Ермакова Н.Н., Першина О.В., Крупин В.А., Пан Э.С., Кудряшова А.И., Ермолаева Л.А., Дыгай А.М. Роль тканеспецифичных стволовых и прогениторных клеток в регенерации поджелудочной железы и тестикулярной ткани при диабетических нарушениях // Клет. технол. в биол. и мед. 2016. № 3. С. 180-187.
            5.         Corona G., Rastrelli G., Morelli A., Vignozzi L., Mannucci E., Maggi M. Hypogonadism and metabolic syndrome // J. Endocrinol. Invest. 2011. Vol. 34, N 7. P. 557-567.
            6.         Jungwirth A., Diemer T., Dohle G.R., Giwercman A., Kopa Z., Krausz C., Tournaye H. Guidelines on male infertility. European Association of Urology, 2014. [URL: https://uroweb.org/wp-content/uploads/17-Male-Infertility_LR.pdf].
            7.         Kanatsu-Shinohara M., Ogonuki N., Inoue K., Ogura A., Toyokuni S., Honjo T., Shinohara T. Allogeneic offspring produced by male germ Line stem cell transplantation into infertile mouse testis // Biol. Reprod. 2003. Vol. 68, N 1. P. 167-173.
            8.         Kupelian V., Page S.T., Araujo A.B., Travison T.G., Bremner W.J., McKinlay J.B. Low sex hormone-binding globulin, total testosterone, and symptomatic androgen deficiency are associated with development of the metabolic syndrome in nonobese men // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2006. Vol. 91, N 3. P. 843-850.
            9.         Lunenfeld B., Mskhalaya G., Zitzmann M., Arver S., Kalinchenko S., Tishova Y., Morgentaler A. Recommendations on the diagnosis, treatment and monitoring of hypogonadism in men // Aging Male. 2015. Vol. 18, N 1. P. 5-15.
10.       Ogawa T., Aréchaga J.M., Avarbock M.R., Brinster R.L. Transplantation of testis germinal cells into mouse seminiferous tubules // Int. J. Dev. Biol. 1997. Vol. 41, N 1. P. 111-122.
11.       Pacini G., Ahrén M., Ahrén B. Reappraisal of the intravenous glucose tolerance index for a simple assessment of insulin sensitivity in mice // Am. J. Physiol. Regul. Integr Comp. Physiol. 2009. Vol. 296, N 5. P. R1316-R1324.
12.       Paoletti R., Bolego C., Poli A., Cignarella A. Metabolic syndrome, inflammation and atherosclerosis // Vase Health Risk Manag. 2006. Vol. 2, N 2. P. 145-152.
13.       WHO Manual for the Standardized Investigation, Diagnosis and Management of the Infertile Male. Cambridge, 2000.
14.       Zhang M., Zhou H., Zheng C., Xiao J., Zuo E., Liu W., Xie D., Shi Y., Wu C., Wang H., Li D., Li J. The roles of testicular c-kit positive cells in de novo morphogenesis of testis // Sci.
Rep. 2014. Vol. 4. P. 5936. doi: 10.1038/srep05936.


Генетика
Управляемая коамплификация генов для получения рекомбинантных белков терапевтического назначения: исследование динамики инсерции и амплификации генетических кассет в геноме клеток яичника китайского хомячка при коэкспрессии пары совместимых плазмид
С.В.Ковнир*, Н.А.Орлова*, Ю.А.Ходак*, М.П.Кондрашова*, А.Г.Габибов**, К.Г.Скрябин*, А.И.Воробьев***, И.И.Воробьев*,** – 211
*Институт биоинженерии ФИЦ Фундаментальные основы биотехнологии РАН, Москва, РФ; **ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; ***ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава РФ, Москва
Семейство векторов p1.1 на основе некодирующих областей конститутивно-экспрессирующегося гена клеток китайского хомячка EEF1A и конкатемера терминального повтора вируса Эпштейна—Барр позволяет увеличить частоту интеграции целевых плазмид в геном и быстро амплифицировать целевые гены в геноме. На примере флюоресцентных белков (eGFP и mCherry) было показано, что векторы семейства p1.1 с селекционными маркерами дигидрофолатредуктазы и глутаминсинтетазы при котрансфекции в клетки линии CHO DG44 позволяют получить поликлональную популяцию клеток, в которой около 70% клеток экспрессируют оба гена. Последующая одностадийная амплификация интегрированных в геном клеток генетических кассет под действием метотрексата позволяет увеличить уровень экспрессии обоих интегрированных генов до 8.2% eGFP, 9.9% mCherry от общего белка. Разработанный метод может быть использован для получения стабильных линий-продуцентов функциональных гетеродимерных белков, в частности, гормонов и терапевтических антител.
Ключевые слова: CHO, EEF1A, линии-продуценты, биофармацевтика, амплификация в геноме
Адрес для корреспонденции: ptichman@gmail.com.
Воробьев И.И.
Литература
1.         Патент РФ № 2560596. Плазмида для экспрессии в клетках СНО рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) человека, плазмида для экспрессии в клетках СНО бета-субъединицы рекомбинантного ФСГ человека, клетка СНО — продуцент рекомбинантного ФСГ человека и способ получения указанного гормона / И.И.Воробьев, Н.А.Орлова, С.В.Ковнир, Ю.А.Ходак // Бюл. № 23. Опубликовано 20.08.2015.
2.         Патент РФ № 2585532. Плазмида для экспрессии рекомбинантного фактора свертываемости крови IX человека, клетка СНО — продуцент рекомбинантного фактора свертываемости крови ix человека и способ получения указанного фактора / С.В.Ковнир, Н.А.Орлова, И.И.Воробьев, Ю.В.Ходак, М.А.Дронина, И.В.Смирнов, Н.А.Пономаренко, К.Г.Скрябин, А.Г.Габибов // Бюл. № 15. Опубликовано 27.05.2016.
3.         Moritz B., Becker P.B.,
Göpfert U. CMV promoter mutants with a reduced propensity to productivity loss in CHO cells // Sci. Rep. 2015. Vol. 5. ID 16952. doi: 10.1038/srep16952.
4.         Orlova N.A., Kovnir S.V., Hodak J.A., Vorobiev I.I., Gabibov A.G., Skryabin K.G. Improved elongation factor-1 alpha-based vectors for stable high-level expression of heterologous proteins in Chinese hamster ovary cells // BMC Biotechnol. 2014. Vol. 14. P. 56. doi: 10.1186/1472-6750-14-56.
5.         Orlova N.A., Orlov A.V., Vorobiev I.I. A modular assembly cloning technique (aided by the BIOF software tool) for seamless and error-free assembly of long DNA fragments // BMC Res. Notes. 2012. Vol. 5. P. 303. doi: 10.1186/1756-0500-5-303.
6.         Shaner N.C., Campbell R.E., Steinbach P.A., Giepmans B.N., Palmer A.E., Tsien R.Y. Improved monomeric red, orange and yellow fluorescent proteins derived from Discosoma sp. red fluorescent protein // Nat.
Biotechnol. 2004. Vol. 22, N 12. P. 1567-1572.


Онкология
Взаимосвязь соматических мутаций гена PIK3CA в опухолях с клинико-морфологическими характеристиками больных раком молочной железы
М.Л.Филипенко*,***, Н.А.Оськина*, И.А.Оскорбин*,***, О.В.Мишукова*,***, Л.К.Овчинникова**, Е.С.Герштейн**, Н.Е.Кушлинский** – 216
*Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск, РФ; **ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина Минздрава РФ, Москва; ***ФГАОУ ВО Новосибирский национальный исследовательский государственный университет, Новосибирск, РФ
Методом мультиплексной аллельспецифичной ПЦР в режиме реального времени исследовали наличие активирующих соматических мутаций в кодонах 542 и 545 экзона 9 (p.E542K c.1624G>A и p.E545K c.1633G>A) и в кодоне 1047 экзона 20 (p.H1047R c.3140A>G и p.H1047L c.3140A>T) гена PIK3CA каталитической p110a-субъединицы фосфатидилинозитол-3-киназы в опухолях 473 больных РМЖ. Выявлено 58 (12.3%) различных мутаций. Показано увеличение частоты встречаемости мутаций PIK3CA по мере прогрессирования заболевания (с 2.4% при I-IIa стадиях до 28.7% при III-IV стадиях; p=0.0001) и тенденция к ее увеличению в опухолях с неблагоприятными прогностическими признаками (высокая степень злокачественности, “тройной негативный” фенотип). Установлено, что наличие исследованных мутаций PIK3CA в опухолях статистически значимо ухудшает безрецидивную выживаемость как в общей группе, так и при III стадии заболевания.
Ключевые слова: аллельспецифичная ПЦР в режиме реального времени, ген PIK3CA, мутации, рак молочной железы, прогноз
Адрес для корреспонденции: biochimia@yandex.ru.
Филипенко М.Л.
Литература
            1.         Филипенко М.Л., Шамовская Д.В., Оськина Н.А., Оскорбин И.П., Храпов Е.А., Овчинникова Л.К., Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Разработка метода выявления соматических мутаций гена PIK3CA с помощью мультиплексной аллель-специфичной ПЦР в режиме реального времени и его валидация в опухолях больных раком молочной железы // Альманах клинической медицины. 2015. № 41. С. 12-18.
            2.         Al-Sukhun S., Lataifeh I., Al-Sukhun R. Defining the prognostic and predictive role of PIK3CA mutations: sifting through the conflicting data // Curr. Breast Cancer Rep. 2016. Vol. 8, N 2. P. 73-79.
            3.         Chandarlapaty S., Sakr R.A., Giri D., Patil S., Heguy A., Morrow M., Modi S., Norton L., Rosen N., Hudis C., King T.A. Frequent mutational activation of the PI3K-AKT pathway in trastuzumab-resistant breast cancer // Clin. Cancer Res. 2012. Vol. 18, N 24. P. 6784-6791.
            4.         Cizkova M., Susini A., Vacher S., Cizeron-Clairac G., Andrieu C., Driouch K., Fourme E., Lidereau R., Bièche I. PIK3CA mutation impact on survival in breast cancer patients and in ER
a
, PR and ERBB2-based subgroups // Breast Cancer Res. 2012. Vol. 14, N 1. P. R28.
            5.         Engelman J.A., Luo J., Cantley L.C. The evolution of phosphatidylinositol 3-kinases as regulators of growth and metabolism // Nat. Rev. Genet. 2006. Vol. 7, N 8. P. 606-619.
            6.         Gustin J.P., Karakas B., Weiss M.B., Abukhdeir A.M., Lauring J., Garay J.P., Cosgrove D., Tamaki A., Konishi H., Konishi Y., Mohseni M., Wang G., Rosen D.M., Denmeade S.R., Higgins M.J., Vitolo M.I., Bachman K.E., Park B.H. Knockin of mutant PIK3CA activates multiple oncogenic pathways // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2009. Vol. 106, N 8. P. 2835-2840.
            7.         Kalinsky K., Jacks L.M., Heguy A., Patil S., Drobnjak M., Bhanot U.K., Hedvat C.V., Traina T.A., Solit D., Gerald W., Moynahan M.E. PIK3CA mutation associates with improved outcome in breast cancer // Clin. Cancer Res. 2009. Vol. 15, N 16. P. 5049-5059.
            8.         Karakas B., Bachman K.E., Park B.H. Mutation of the PIK3CA oncogene in human cancers // Br. J. Cancer. 2006. Vol. 94, N 4. P. 455-459.
            9.         Loi S., Michiels S., Lambrechts D., Fumagalli D., Claes B., Kellokumpu-Lehtinen P.L., Bono P., Kataja V., Piccart M.J., Joensuu H., Sotiriou C. Somatic mutation profiling and associations with prognosis and trastuzumab benefit in early breast cancer // J. Natl Cancer Inst. 2013. Vol. 105, N 13. P. 960-967.
10.       Loibl S., Majewski I., Guarneri V., Nekljudova V., Holmes E., Bria E., Denkert C., Schem C., Sotiriou C., Loi S., Untch M., Conte P., Bernards R., Piccart M., von Minckwitz G., Baselga J. PIK3CA mutations are associated with reduced pathological complete response rates in primary HER2-positive breast cancer: pooled analysis of 967 patients from five prospective trials investigating lapatinib and trastuzumab // Ann. Oncol. 2016. Vol. 27, N 8. P. 1519-1525.
11.       Razis E., Bobos M., Kotoula V., Eleftheraki A.G., Kalofonos H.P., Pavlakis K., Papakostas P., Aravantinos G., Rigakos G., Efstratiou I., Petraki K., Bafaloukos D., Kostopoulos I., Pectasides D., Kalogeras K.T., Skarlos D., Fountzilas G. Evaluation of the association of PIK3CA mutations and PTEN loss with efficacy of trastuzumab therapy in metastatic breast cancer // Breast Cancer Res. Treat. 2011. Vol. 128, N 2. P. 447-456.
12.       Samuels Y., Wang Z., Bardelli A., Silliman N., Ptak J., Szabo S., Yan H., Gazdar A., Powell S.M., Riggins G.J., Willson J.K., Markowitz S., Kinzler K.W., Vogelstein B., Velculescu V.E. High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers // Science. 2004. Vol. 304. P. 554.
13.       Zhang Y., Liu M., Yang H., Wang J., Liu H., Li X., Li J., Xu J., Li X. PIK3CA mutations are a predictor of docetaxel plus epirubicin neoadjuvant chemotherapy clinical efficacy in breast cancer // Neoplasma. 2014. Vol. 61, N 4. P. 461-467.
14.       Zhao L., Vogt P.K. Class I PI3K in oncogenic cellular transformation // Oncogene. 2008. Vol. 27, N 41. P. 5486-5496.


Особенности характеристик клеток субклона меланомной линии (Mel Ibr) после воздействия куриного эмбрионального экстракта
Н.М.Сураева, Л.Ф.Морозова, О.О.Рябая, Ю.А.Хоченкова, А.В.Самойлов*, О.С.Бурова, Н.В.Голубцова, А.Е.Бармашов, М.А.Барышников221
ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина Минздрава РФ, Москва; *ФГБНУ ВНИИ технологии консервирования, Видное, Московская обл., РФ
Продолжено изучение фенотипа клеток субклона меланомной линии человека Mel Ibr, полученного ранее после воздействия на клетки родительской линии куриным эмбриональным экстрактом. Исследовали наличие в клетках субклона характеристик эпителиально-мезенхемального перехода, который в злокачественных опухолях различной локализации ответствен за метастазирование и повышение их инвазивности. Анализ уровней экспрессии генов Е-кадгерина и виментина в клетках субклона и родительской линии выявил активацию процессов эпителиально-мезенхимального перехода в субклоне. На клетках субклона отсутствовали иммунологические маркеры CD90, CD271 и CD95, в то время как в исходной популяции эти маркеры определялись. В отличие от родительской линии клетки субклона сохраняли жизнеспособность в бессывороточной среде, формируя сосудисто-подобные структуры, характерные для васкулогенной мимикрии.
Ключевые слова: дедифференцировка, субклон меланомных клеток, эпителиально-мезенхемальный переход
Адрес для корреспонденции: nsuraeva@yandex.ru.
Сураева Н.М.
Литература
            1.         Плешкан В.В., Зиновьева М.В., Свердлов Е.Д. Меланома: поверхностные маркеры как первый “порт” адресной доставки терапевтических генов при многоуровневой генной терапии // Мол. биол. 2011. Т. 45, № 3. С. 416-433.
            2.         Патент РФ № 2287576. Клеточная линия меланомы человека Mel Ibr, используемая для получения противоопухолевых вакцин / И.Н.Михайлова, А.Ю.Барышников, Л.Ф.Морозова, А.Е.Бережной, А.М.Козлов, С.С.Ларин, Г.П.Георгиев, Г.Н.Ворожцов, Н.В.Гнучев // Бюл. № 32. Опубликовано 20.11.06.
            3.         Сураева Н.М., Воротеляк Е.А., Прокофьев М.И., Самойлов А.В., Васильев А.В.,Терских В.В., Барышников А.Ю. Получение, характеристика и долгосрочное культивирование примордиальных половых и бластодермальных клеток кур // Докл. АН. 2008. Т. 423, № 3. С. 408-410.
            4.         Сураева Н.М., Морозова Л.Ф., Самойлов А.В., Бурова О.С., Голубева В.А., Барышникова М.А., Барышников А.Ю. Изменение морфологических и иммунологических характеристик клеток меланомной линии (Mel Ibr) в результате воздействия куриного эмбрионального экстракта // Бюл. экспер. биол. 2015. Т. 159, № 4. С. 521-524.
            5.         Сураева Н.М., Самойлов А.В. Получение фармацевтических белков с помощью трансгенной птицы // Вестн. РОНЦ. 2009. Т. 20, № 4. С. 19-26.
            6.         Busch C., Krochmann J., Drews U. The chick embryo as an experimental system for melanoma cell invasion // PloS One. 2013. Vol. 8, N 1. P. e53970.
            7.         Deng R., Li W., Guan Z., Zhou J.M., Wang Y., Mei Y.P., Li M.T., Feng G.K., Huang W., Liu Z.C., Han Y., Zeng Y.X., Zhu X.F. Acetylcholinesterase expression mediated by c-Jun-NH2-terminal kinase pathway during anticancer drug-induced apoptosis // Oncogene. 2006. Vol. 25, N 53. P. 7070-7077.
            8.         Díez-Torre A., Andrade R., Eguizábal C., López E., Arluzea J., Silió M., Aréchaga J. Reprogramming of melanoma cells by embryonic microenvironments // Int. J. Dev. Biol. 2009. Vol. 53, N 8-10. P. 1563-1568.
            9.         Hendrix M.J., Seftor E.A., Seftor R.E., Kasemeier-Kulesa J., Kulesa P.M., Postovit L.M. Reprogramming metastatic tumour cells with embryonic microenvironments // Nat. Rev. Cancer. 2007. Vol. 7, N 4. P. 246-255.
10.       Kalyani A., Hobson K., Rao M.S. Neuroepithelial stem cells from the embryonic spinal cord: isolation, characterization, and clonal analysis // Dev. Biol. 1997. Vol. 186, N 2. P. 202-223.
11.       Mani S.A., Guo W., Liao M.J., Eaton E.N., Ayyanan A., Zhou A.Y., Brooks M., Reinhard F., Zhang C.C., Shipitsin M., Campbell L.L., Polyak K., Brisken C., Yang J., Weinberg R.A. The epithelial-mesenchymal transition generates cells with properties of stem cells // Cell. 2008. Vol. 133, N 4. P. 704-715.
12.       Magnoni C., Giudice S., Pellacani G., Bertazzoni G., Longo C., Veratti E., Morini D., Benassi L., Vaschieri C., Azzoni P., De Pol A., Seidenari S., Tomasi A., Pollio A., Ponti G. Stem cell properties in cell cultures from different stage of melanoma progression // Appl. Immunohistochem. Mol. Morphol. 2014. Vol. 22, N 3.
Р. 171-181.
13.       Pajtler K., Bohrer A., Maurer J., Schorle H., Schramm A., Eggert A., Schulte J.H. Production of chick embryo extract for the cultivation of murine neural crest stem cells // J. Vis. Exp. 2010. N 45. pii: 2380.
14.       Wang Y., Brooks C.F., Jones S.A., Olliff L.K., Morgan M., Speksnijder G.L., Foley C., Harvey A.J. Progress toward the culture and transformation of chicken blastodermal cells // Stem Cells.
2006. Vol. 24, N 7. P. 1638-1645.


Механизмы чувствительности опухолевых клеток сарком мягких тканей к темозоломиду
Р.Р.Хуснутдинов, С.В.Бойчук – 227
ФГБОУ ВПО Казанский государственный медицинский университет, Казань, Республика Татарстан, РФ
Исследованы механизмы чувствительности опухолевых клеток сарком мягких тканей к действию алкилирующего агента темозоломида. Механизмы чувствительности опухолевых клеток к темозоломиду имеют комплексный характер и определяются не только уровнем экспрессии фермента O6-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазы (MGMT), но и функциональным состоянием белка-онкосупрессора р53. Цитотоксические свойства темозоломида в наибольшей степени проявлялись в отношении опухолевых клеток саркомы Юинга A-673, в то время как в клетках лейомиосаркомы SK-LMS-1 наблюдались признаки клеточного старения.
Ключевые слова: саркомы мягких тканей, MGMT, p53, апоптоз, старение
Адрес для корреспонденции: boichuksergei@mail.ru.
Бойчук С.В.
Литература
1.         Bocangel D., Sengupta S., Mitra S., Bhakat K.K. p53-Mediated down-regulation of the human DNA repair gene O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) via interaction with Sp1 transcription factor // Anticancer Res. 2009. Vol. 29, N 10. P. 3741-3750.
2.         Cabrini G., Fabbri E., Lo Nigro C., Dechecchi M.C., Gambari R. Regulation of expression of O6-methylguanine-DNA methyltransferase and the treatment of glioblastoma (Review) // Int. J. Oncol. 2015. Vol. 47, N 2. P. 417-428.
3.         D’Atri S., Tentori L., Lacal P.M., Graziani G., Pagani E., Benincasa E., Zambruno G., Bonmassar E., Jiricny J. Involvement of the mismatch repair system in temozolomide-induced apoptosis // Mol. Pharmacol. 1998. Vol. 54, N 2. P. 334-341.
4.         Fan C.H., Liu W.L., Cao H., Wen C., Chen L., Jiang G. O6-methylguanine DNA methyltransferase as a promising target for the treatment of temozolomide-resistant gliomas // Cell Death Dis. 2013. Vol. 4, P. e876. doi: 10.1038/cddis.2013.388.
5.         Jackson S.P., Bartek J. The DNA-damage response in human biology and disease // Nature. 2009. Vol. 461. P. 1071-1078.   
6.         Rodier F., Campisi J. When DNA damage goes invisible // Cell Cycle. 2009. Vol. 8, N 22. P. 3632-3633.


Биотехнологии
Генетическое конструирование нативных комбинаций цепей В-клеточных репертуаров на поверхности метилотрофных дрожжей Pichia pastoris
Т.В.Бобик, Е.М.Шурдова, И.В.Смирнов, Н.А.Пономаренко, Е.Н.Хурс*, В.Д.Кнорре, А.Г.Габибов231
Лаборатория биокатализа (зав. — акад. А.Г.Габибов) ФГБУН Института биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; *Лаборатория химических основ биокатализа (зав. — докт. хим. наук проф. Т.В.Демидкина) ФГБУН Института молекулярной биологии им. В.А.Энгельгардта РАН, Москва, РФ
Созданы генетические конструкции, позволяющие получать на поверхности клеток дрожжей Pichia pastoris библиотеку Fab-фрагментов антител, содержащих нативную комбинацию цепей индивидуального В-лимфоцита. На примере полученного ранее антитела А17 [7] показано, что уровень Fab-фрагмента антитела на поверхности дрожжевых клеток сравним с таковым при совместной котрансформации векторов, содержащих последовательности каждой цепи. Разработан адекватный способ получения библиотек генов иммуноглобулинов, полностью соответствующих характеристикам реальных репертуаров В-лимфоцитов человека.
Ключевые слова: Fab-фрагменты антител, система экспрессии Pichia pastoris
Адрес для корреспонденции: gabibov@mx.ibch.ru. Габибов А.Г.

Литература
1.         Захаров А.В., Смирнов И.В., Серебрякова М.В., Дронина М.А., Казначеева А.В., Куркова И.Н., Белогуров А.А., Friboulet A., Пономаренко Н.А., Габибов А.Г., Бобик Т.В. Экспрессия каталитических антител в эукариотических системах // Мол. биол. 2011. Т. 45, № 1. C. 86-95.
2.         DeKosky B.J., Ippolito G.C., Deschner R.P., Lavinder J.J., Wine Y., Rawlings B.M., Varadarajan N., Giesecke C., Dörner T., Andrews S.F., Wilson P.C., Hunicke-Smith S.P., Willson C.G., Ellington A.D., Georgiou G. High-throughput sequencing of the paired human immunoglobulin heavy and light chain repertoire // Nat. Biotechnol. 2013. Vol. 31, N 2. P. 166-169.
3.         Gabibov A.G., Belogurov A.A.Jr, Lomakin Y.A., Zakharova M.Y., Avakyan M.E., Dubrovskaya V.V., Smirnov I.V., Ivanov A.S., Molnar A.A., Gurtsevitch V.E., Diduk S.V., Smirnova K.V., Avalle B., Sharanova S.N., Tramontano A., Friboulet A., Boyko A.N., Ponomarenko N.A., Tikunova N.V. Combinatorial antibody library from multiple sclerosis patients reveals antibodies that cross-react with myelin basic protein and EBV antigen // FASEB J. 2011. Vol. 25, N 12. P.4211-4221.
4.         Lomakin Y.A., Zakharova M.Y., Stepanov A.V., Dronina M.A., Smirnov I.V., Bobik T.V., Pyrkov A.Y., Tikunova N.V., Sharanova S.N., Boitsov V.M., Vyazmin S.Y., Kabilov M.R., Tupikin A.E., Krasnov A.N., Bykova N.A., Medvedeva Y.A., Fridman M.V., Favorov A.V., Ponomarenko N.A., Dubina M.V., Boyko A.N., Vlassov V.V., Belogurov A.A.Jr, Gabibov A.G. Heavy-light chain interrelations of MS-associated immunoglobulins probed by deep sequencing and rational variation // Mol. Immunol. 2014. Vol.62, N 2. P. 305-314.
5.         McDaniel J.R., DeKosky B.J., Tanno H., Ellington A.D., Georgiou G. Ultra-high-throughput sequencing of the immune receptor repertoire from millions of lymphocytes // Nat. Protoc. 2016. Vol. 11, N 3. P. 429-442.
6.         Ponomarenko N., Chatziefthimiou S.D., Kurkova I., Mokrushina Y., Mokrushina Y., Stepanova A., Smirnov I., Avakyan M., Bobik T., Mamedov A., Mitkevich V., Belogurov A.Jr, Fedorova O.S., Dubina M., Golovin A., Lamzin V., Friboulet A., Makarov A.A., Wilmanns M., Gabibov A. Role of k→l light-chain constant-domain switch in the structure and functionality of A17 reactibody // Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr. 2014. Vol. 70, Pt 3. P. 708-719.
7.         Reshetnyak A.V., Armentano M.F., Ponomarenko N.A., Vizzuso D., Durova O.M., Ziganshin R., Serebryakova M., Govorun V., Gololobov G., Morse H.C.3rd, Friboulet A., Makker S.P., Gabibov A.G., Tramontano A. Routes to covalent catalysis by reactive selection for nascent protein nucleophiles // J. Am. Chem. Soc. 2007. Vol. 129, N 51. P. 16 175-16 182.
8.         Turchaninova M.A., Britanova O.V., Bolotin D.A., Shugay M., Putintseva E.V., Staroverov D.B., Sharonov G., Shcherbo D., Zvyagin I.V., Mamedov I.Z., Linnemann C., Schumacher T.N., Chudakov D.M. Pairing of T-cell receptor chains via emulsion PCR // Eur. J. Immunol. 2013. Vol. 43, N 9. P. 2507-2515.
9.         Wu S., Letchworth G.J. High efficiency transformation by electroporation of Pichia pastoris pretreated with lithium acetate and dithiothreitol // Biotechniques.
2004. Vol. 36, N 1. P. 152-154.


Экспериментальные методы — клинике
Динамика показателей прооксидантно-антиоксидантной системы в раневом отделяемом и плазме крови при моделировании гнойной раны и ее лечении аппаратным способом в жидкой фазе
И.М.Быков, А.А.Басов, В.В.Малышко, С.С.Джимак*, С.Р.Федосов*, А.В.Моисеев** – 237
ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет Минздрава РФ, Краснодар; *ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, Краснодар, РФ; **ФГБОУ ВО Кубанский государственный аграрный университет, Краснодар, РФ
Исследовали изменения в прооксидантно-антиоксидантной системе кроликов на местном (в экссудате) и системном (в крови) уровне при лечении гнойных ран в жидкой среде разработанным аппаратно-программным способом, а также сравнивали эффективность предложенного способа с классическими методами лечения подобных ран. Отмечено более быстрое восстановление показателей прооксидантно-антиоксидантной системы до физиологических значений в послеоперационном периоде при лечении аппаратно-программным способом (до 7-х суток) по сравнению с классическим методом лечения (до 10-х суток), что позволяет говорить об увеличении адаптационных возможностей организма лабораторных животных. Отмечено снижение интенсивности свободнорадикального окисления на 26.6% в экссудате при использовании аппаратно-программного комплекса лечения ран. Полученные данные свидетельствуют о повышении скорости регенераторных процессов на местном уровне.
Ключевые слова: гнойная рана, антиоксидантная активность, каталаза, супероксиддисмутаза, хемилюминесценция
Адрес для корреспонденции: son_sunytch@mail.ru.
Басов А.А.
Литература
            1.         Алиев М.Д., Соколовский В.А., Дмитриева Н.В., Синюкова Г.Т., Сычева Л.Ю., Амирасланов А.А., Мистакопуло Н.Ф. Осложнения после эндопротезирования крупных суставов. Методы лечения // Вестн. РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН. 2003. Т. 14, № 2-1. С. 35-39.
            2.         Королюк M.A., Иванов Л.И., Майорова И.Г., Токарев B.П. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. № 1. C. 16-19.
            3.         Костюк В.А., Потапович А.И., Ковалева Ж.И. Простой и чувствительный метод определения супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцитина // Вопросы медицинской химии. 1990. № 2. С. 88-91.
            4.         Маханько А.В., Малышко В.В., Басов А.А., Федосов С.Р., Власов Р.В., Чернобай К.Н. Программа управления устройством для лечения ран. Свидетельство о государственной регистрации программы для ЭВМ № 2015615207. Дата регистрации 13.05.2015.
            5.         Павлюченко И.И., Федосов C.P., Басов A.A. Программа регистрации сигналов хемилюминотестера ЛТ-1. Свидетельство о регистрации программы для ЭBM № 2006611562. Дата регистрации 10.05.2006.
            6.         Патент РФ № 2455703. Способ хирургического моделирования окислительного стресса у лабораторных животных / A.A.Басов, И.M.Быков, C.P.Федосов, B.B.Малышко // Бюл. № 19. Опубликовано 10.07.2012.
            7.         Патент РФ № 163627. Устройство для местного лечения и динамического наблюдения поверхностных гнойных ран / А.А.Басов, В.В.Малышко, С.Р.Федосов // Бюл. № 21. Опуликовано 27.07.2016.
            8.         Патент РФ № 2436101. Способ диагностики нарушений метаболизма в организме в условиях окислительного стресса / А.А.Басов, И.И.Павлюченко, И.М.Быков, С.Р.Федосов, Е.А.Губарева // Бюл. № 34. Опубликовано 10.12.2011.
            9.         Патент РФ № 54787. Система лабораторной диагностики окислительного стресса / И.И.Павлюченко, А.А.Басов, С.Р.Федосов / Бюл. № 21. Опубликовано 27.07.2006.
10.       Пяткин О.В., Медведев Г.М., Пяткова Г.В., Ващенко А.В., Пятков А.А. Оптимизация лечения гнойных осложнений ран у военнослужащих северного региона // Экол. чел. 2006. № 6. С. 25-27.
11.       Федосов С.Р., Савченко Ю.П., Павлюченко И.И., Голиков И.В., Пятаков С.Н. Динамика про-/антиоксидантного баланса в процессе эволюции гнойной раны // Кубанск. науч. мед. вестн. 2010. № 9. С. 166-169.
12.       Хирургические инфекции кожи и мягких тканей. Российские национальные рекомендации / Под ред. В.С.Савельева. М., 2009.
13.       Badr G., Hozzein W.N., Badr B.M., Al Ghamdi A., Saad Eldien H.M., Garraud O. Bee venom accelerates wound healing in diabetic mice by suppressing activating transcription factor-3 (atf-3) and inducible nitric oxide synthase (inos)-mediated oxidative stress and recruiting bone marrow-derived endothelial progenitor cells // J. Cell. Physiol. 2016. Vol. 231, N 10. P. 2159-2171.
14.       Van der Vliet A., Janssen-Heininger Y.M. Hydrogen peroxide as a damage signal in tissue injury and inflammation: murderer, mediator, or messenger? // J. Cell. Biochem. 2014. Vol. 115, N 3. P. 427-435.
15.       Yashin A.Y. A flow-injection system with amperometric detection for selective determination of antioxidants in foodstuffs and drinks // Russ. J. General Chem. 2008.
Vol. 78, N 12. P. 2566-2571.


Морфология и патоморфология
Экспрессия каннабиноидных рецепторов 1-го типа на этапах нейрональной дифференцировки фибробластов человека
М.Ю.Бобров1,2,4, В.В.Безуглов2, Л.Г.Хаспеков1, С.Н.Иллариошкин1, Е.В.Новосадова3, И.А.Гривенников3242
1ФГБНУ Научный центр неврологии, Москва, РФ; 2ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва, РФ; 3ФГБУН Институт молекулярной генетики РАН, Москва, РФ; 4ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Оценивали дифференциальную экспрессию каннабиноидных рецепторов 1-го типа (КР1) на различных этапах трансформации фибробластов кожи человека в терминально дифференцированные нейроны. Методом иммуноцитохимического окрашивания было показало, что КР1 на фибробластах отсутствуют, однако при трансформации от фибробластов к индуцированным плюрипотентным стволовым клеткам наблюдается выраженная стимуляция экспрессии КР1. На нейрональных предшественниках рецепторы локализуются преимущественно на телах клеток и у основания их отростков. Подобное распределение сохраняется и на окончательном этапе дифференцировки индуцированных плюрипотентных стволовых клеток в нейроны.
Ключевые слова: каннабиноидные рецепторы, клеточное репрограммирование, индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, нейрональные предшественники
Адрес для корреспонденции: mbobr@mail.ru.
Бобров М.Ю.
Литература
            1.         Лебедева О.С., Новосадова Е.В., Мануилова Е.С., Арсеньева Е.Л., Киселев С.Л., Лагарькова М.А., Хаспеков Л.Г., Иллариошкин С.Н., Гривенников И.А. Получение и характеристика клеточной модели болезни Паркинсона на основе индуцированных плюрипотентных стволовых клеток // Стволовые клетки и регенеративная медицина. М., 2014. P. 154-168.
            2.         Berger C., Schmid P.C., Schabitz W.R., Wolf M., Schwab S., Schmid H.H. Massive accumulation of N-acylethanolamines after stroke. Cell signalling in acute cerebral ischemia? // J. Neurochem. 2004. Vol. 88, N 5. P. 1159-1167.
            3.         Compagnucci C., Di Siena S., Bustamante M.B., Di Giacomo D., Di Tommaso M., Maccarrone M., Grimaldi P., Sette C. Type-1 (CB1) cannabinoid receptor promotes neuronal differentiation and maturation of neural stem cells // PLoS One. 2013. Vol. 8, N 1. P. e54271.
            4.         Galve-Roperh
I., Chiurchiu V., Diaz-Alonso J., Bari M., Guzman M., Maccarrone M. Cannabinoid receptor signaling in progenitor/stem cell proliferation and differentiation // Prog. Lipid Res. 2013. Vol. 52, N 4. P. 633-650.
            5.         Glass M., Dragunow M., Faull R.L. Cannabinoid receptors in the human brain: a detailed anatomical and quantitative autoradiographic study in the fetal, neonatal and adult human brain // Neuroscience. 1997. Vol. 77, N 2. P. 299-318.
            6.         Hermann H., Marsicano G., Lutz B. Coexpression of the cannabinoid receptor type 1 with dopamine and serotonin receptors in distinct neuronal subpopulations of the adult mouse forebrain // Neuroscience. 2002. Vol. 109, N 3. P. 451-460.
            7.         Hillard C.J. The endocannabinoid signaling system in the CNS: a primer // Int. Rev. Neurobiol. 2015. Vol. 125. P. 1-47.
            8.         Hwang D.Y., Kim D.S., Kim D.W. Human ES and iPS cells as cell sources for the treatment of Parkinson’s disease: current state and problems // J. Cell. Biochem. 2010. Vol. 109, N 2. P. 292-301.
            9.         Jin K., Xie L., Kim S.H., Parmentier-Batteur S., Sun Y., Mao X.O., Childs J., Greenberg D.A. Defective adult neurogenesis in CB1 cannabinoid receptor knockout mice // Mol. Pharmacol. 2004. Vol. 66, N 2. P. 204-208.
10.       Lau T., Schloss P. The cannabinoid CB1 receptor is expressed on serotonergic and dopaminergic neurons // Eur. J. Pharmacol. 2008. Vol. 578, N 2-3. P. 137-141. 
11.       Mackie K. Distribution of cannabinoid receptors in the central and peripheral nervous system // Handb. Exp. Pharmacol. 2005. N 168. P. 299-325.
12.       Ramos J.A., Gomez M., de Miguel R. Effects on development // Handb. Exp. Pharmacol. 2005. N 168. P. 643-656.
13.       Soltys J., Yushak M., Mao-Draayer Y. Regulation of neural progenitor cell fate by anandamide // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2010. Vol. 400, N 1. P. 21-26.
14.       Stanslowsky N., Jahn K., Venneri A., Naujock M., Haase A., Martin U., Frieling H., Wegner F. Functional effects of cannabinoids during dopaminergic specification of human neural precursors derived from induced pluripotent stem cells // Addict. Biol. 2016. Mar 30. doi: 10.1111/adb.12394.
15.       Yamanaka S. A fresh look at iPS cells // Cell. 2009.
Vol. 137, N 1. P. 13-17.


Иммунолокализация гемоксигеназ в стенке мозговых артерий разного диаметра у крыс
В.М.Черток, А.Е.Коцюба – 246
Кафедра анатомии человека (зав. — проф. В.М.Черток) ГБОУ ВПО Тихоокеанского государственного медицинского университета Минздрава РФ, Владивосток
Исследовали распределение двух ферментов, участвующих в образовании монооксида углерода — гемоксигеназы-1 и гемооксигеназы-2 — в пиальных ветвях I-V порядков бассейна средней мозговой артерии и внутримозговых сосудах у половозрелых крыс Вистар. Иммуногистохимическим методом установлено наличие гемооксигеназы-2 в эндотелии мелких пиальных и внутримозговых артериол, а также в миоцитах пиальных ветвей I-III порядков. Экспрессии гемооксигеназы-1, которая является индуцибельной формой фермента, в физиологических условиях в сосудах мозга не происходит, но наблюдается на фоне введения метаарсенита натрия. В этом случае маркеры гемооксигеназы-1 определяются в миоцитах пиальных ветвей I-II порядков и в эндотелии мелких пиальных и внутримозговых сосудов. На иммунолокализацию и количественное распределение гемооксигеназы-2 в сосудах метаарсенит натрия не влияет.
Ключевые слова: пиальные ветви разного диаметра, внутримозговые артерии, гемоксигеназа-1, гемооксигеназа-2, иммунолокализация
Адрес для корреспонденции: chertokv@mail.ru. Черток В.М.   

Литература
            1.         Коцюба А.Е., Черток В.М. Распределение гемоксигеназы-2 в ядрах головного мозга крысы // Морфология. 2012. Т. 142, № 6. С. 15-19.
            2.         Черток В.М., Коцюба А.Е. Эндотелиальный (интимальный) механизм регуляции мозговой гемодинамики: трансформация взглядов // Тихоокеан. мед. журн. 2012. № 2. С. 17-26.
            3.         Черток В.М., Коцюба А.Е., Коцюба Е.П. Гемоксигеназа-2 в нейронах головного и спинного мозга человека // Вестн. РАМН. 2012. № 6. С. 36-41.
            4.         Andresen J.J., Shafi N.I., Durante W., Bryan R.M. Jr. Effects of carbon monoxide and heme oxygenase inhibitors in cerebral vessels of rats and mice // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2006. Vol. 291, N 1.
Р. H223-H230.
            5.         Bellien J., Thuillez C., Joannides R. Contribution of endothelium-derived hyperpolarizing factors to the regulation of vascular tone in humans // Fundam. Clin.
Рharmacol. 2008. Vol. 22, N 4. P. 363-377.
            6.         Chertok V.M., Kotsyuba A.E. Immunodetection of cistathionine
b-synthase and cistathionine g-liase in the walls of cerebral arteries in normo- and hypertensive rats // Dokl. Biol. Sci. 2012. Vol. 445, N 1. Р. 223-226.
            7.         Fredenburgh L.E., Merz A.A., Cheng S. Haeme oxygenase signalling pathway: implications for cardiovascular disease // Eur. Heart J. 2015. Vol. 36, N 24.
Р. 1512-1518.
            8.         Jones A.W., Durante W., Korthuis R.J. Heme oxygenase-1 deficiency leads to alteration of soluble guanylate cyclase redox regulation // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2010. Vol. 335, N 1. P. 85-91.
            9.         Lamon B.D., Zhang F.F., Puri N., Brodsky S.V., Goligorsky M.S., Nasjletti A. Dual pathways of carbon monoxide-mediated vasoregulation: modulation by redox mechanisms // Circ. Res. 2009. Vol. 105, N 8.
Р. 775-783.
10.       Leffler C.W., Parfenova H., Jaggar J.H. Carbon monoxide as an endogenous vascular modulator // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2011. Vol. 301, N 1.
Р. H1-H11.
11.       Levitt D.G., Levitt M.D. Carbon monoxide: a critical quantitative analysis and review of the extent and limitations of its second messenger function // Clin. Pharmacol. 2015. Vol. 7.
Р. 37-56.
12.       Naik J.S., O’Donaughy T.L.,
Walker B.R. Endogenous carbon monoxide is an endothelial-derived vasodilator factor in the mesenteric circulation // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2003. Vol. 284, N 3. Р. H838-H845.
13.       Reis W.L., Biancardi V.C., Son S., Antunes-Rodrigues J., Stern J.E. Carbon monoxide and nitric oxide interactions in magnocellular neurosecretory neurones during water deprivation // J. Neuroendocrinol. 2015. Vol. 27, N 2.
Р. 111-122.
14.       Qin X., Kwansa H., Bucci E., Doré S., Boehning D., Shugar D., Koehler R.C. Role of heme oxygenase-2 in pial arteriolar response to acetylcholine in mice with and without transfusion of cell-free hemoglobin polymers // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2008. Vol. 295, N 2.
Р. R498-R504.
15.       Wesseling S., Fledderus J.O., Verhaar M.C., Joles J.A. Beneficial effects of diminished production of hydrogen sulfide or carbon monoxide on hypertension and renal injury induced by NO withdrawal // Br. J. Pharmacol.
2015. Vol. 172, N 6. Р. 1607-1619.


Оценка пролиферативной активности эпителия влагалища у женщин со стрессовым недержанием мочи в условиях применения Er:YAG-лазера 
Г.А.Лапий, А.Ю.Яковлева, А.И.Неймарк*, Е.Л.Лушникова – 251
ФГБНУ Институт молекулярной патологии и патоморфологии, Новосибирск, РФ; *ГБОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет, Барнаул, РФ
Изучены особенности экспрессии маркера пролиферации Ki-67 в биоптатах влагалища женщин со стрессовым недержанием мочи в условиях применения неаблятивного эрбиевого лазера “Fotona”. Показано, что экспрессирующие Ki-67 клетки во всех случаях локализовались в парабазальном и базальном слоях многослойного плоского эпителия, индекс меченых ядер до воздействия Er:YAG-лазера составил 19.05±2.86%. Через 1-2 мес после лазерного воздействия индекс метки в эпителии достоверно увеличился и составил 31.79±2.25%. Выявленные изменения интерпретируются с позиции эпителиально-стромальных взаимодействий. Предполагается, что повышение пролиферативной активности эпителия влагалища после применения Er:YAG-лазера связано с присутствием в подэпителиальной строме значительного количества синтетически активных фибробластов.
Ключевые слова: недержание мочи при напряжении, биопсия влагалища, Er:YAG-лазер Fotona, пролиферативная активность эпителия, иммуногистохимия
Адрес для корреспонденции: pathol@inbox.ru.
Лапий Г.А.
Литература
            1.         Аполихина И.А., Горбунова Е.А., Одинокова В.А. Малоинвазивные инновационные лазерные технологии в гинекологической практике // Акуш. и гин. 2014. № 11. С. 17-22.
            2.         Безменко А.А., Шмидт А.А., Коваль А.А., Сибирев С.А., Карпищенко Ж.М., Гайворонских Д.И. Морфологическое обоснование применения Er:YAG-лазера для лечения недержания мочи при напряжении у женщин // Журн. акуш. и жен. болезн. 2014. Т. 63, № 3. С. 21-25.
            3.         Лапий Г.А., Яковлева А.Ю., Неймарк А.И. Особенности структурной реорганизации слизистой оболочки влагалища при стрессовом недержании мочи в условиях воздействия Er:YAG-лазером // Бюл. экспер. биол. 2016. Т. 162, № 10. С. 511-516.
            4.         Покуль Л.В., Евтушенко И.Д., Казанцева И.Д., Чухрай О.Ю. Оценка пролиферации эпителия слизистой оболочки влагалища у больных репродуктивного возраста после противоопухолевого лечения // Успехи соврем. естествознания. 2010. № 1. С. 15-19.
            5.         Федорова Т.А., Москвин С.В., Аполихина И.А. Лазерная терапия в акушерстве и гинекологии. М., 2009.
            6.         El-Domyati M., Abd-El-Raheem T., Medhat W., Abdel-Wahab H., Al Anwer M. Multiple fractional erbium: yttrium-aluminum-garnet laser sessions for upper facial rejuvenation: clinical and histological implications and expectations // J. Cosmet. Dermatol. 2014. Vol. 13, N 1. P. 30-37.          
7.         El Ghalbzouri A., Ponec M. Diffusible factors released by fibroblasts support epidermal morphogenesis and deposition of basement membrane components // Wound Repair Regen. 2004. Vol. 12, N 3. P. 359-367.
            8.         Fistonic N., Fistonic I., Gustek S.F., Turina I.S., Marton I., Vizintin Z., Kazic M., Hreljac I., Perhavec T., Lukac M. Minimally invasive, non-ablative Er:YAG laser treatment of stress urinary incontinence in women — a pilot study // Lasers Med. Sci. 2016. Vol. 31, N 4. P. 635-643.
            9.         Florin L., Maas-Szabowski N., Werner S., Szabowski A., Angel P. Increased keratinocyte proliferation by JUN-dependent expression of PTN and SDF-1 in fibroblasts // J. Cell Sci. 2005. Vol. 118, Pt 9. P. 1981-1989.
10.       Gambacciani M., Levancini M., Cervigni M. Vaginal erbium laser: the second-generation thermotherapy for the genitourinary syndrome of menopause // Climacteric. 2015. Vol. 18, N 5. P. 757-763.
 11.      Gaviria J.E., Korosec B., Fernandez J., Montero G. Up to 3-year follow-up of patients with vaginal relaxation syndrome participating in laser vaginal tightening // J. Laser Health Acad. 2016. URL: http://www.laserandhealthacademy. com/media/objave/academy/priponke/gaviria_ laha_ 2016_onlinefirst_0001.pdf (
дата обращения 20.12.2016).
12.       Maas-Szabowski N., Stärker A., Fusenig N.E. Epidermal tissue regeneration and stromal interaction in HaCaT cells is initiated by TGF-alpha // J. Cell Sci. 2003. Vol. 116, Pt. 14. P. 2937-2948. 13. Pardo J.I., Sola V.R., Morales A.A. Treatment of female stress urinary incontinence with Erbium-YAG laser in non-ablative mode // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2016. Vol. 204. P. 1-4.
14.       Takacs P., Saiz C., Jaramillo S., Zhang Y., Yavagal S., Candiotti K., Medina C.A. Cellular proliferation in female pelvic organ prolapse: a pilot study // Arch. Gynecol. Obstet. 2011. Vol. 283, N 6. P. 1329-1332.
15.       Vizintin Z., Lukac M., Kazic M., Tettamanti M. Erbium laser in gynecology // Climacteric.
2015. Vol. 18, Suppl. 1. P. 4-8.


Цитотоксичность додецилсульфата натрия в отношении кератиноцитов линии HaCaT: сравнительный анализ различных методов оценки жизнеспособности клеток
А.Л.Русанов, Н.Г.Лузгина*, А.В.Лисица* – 256
ООО НПО “Перспектива”, Новосибирск, РФ; *ФГБНУ НИИ биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича, Москва, РФ
С помощью световой микроскопии, МТТ-теста и теста по поглощению клетками нейтрального красного исследовано изменение жизнеспособности кератиноцитов иммортализованной линии HaCaT при воздействии различных доз додецилсульфата натрия в течение 3 мин, 1 и 48 ч. Для всех выбранных сроков воздействия установлены показатели IC50. Для клеток линии HaCaT характерно дозозависимое снижение жизнеспособности при воздействии додецилсульфата натрия, пропорциональное длительности его экспозиции. Величины данных показателей, измеренные разными методами (с использованием МТТ-теста и по поглощению нейтрального красного), различаются, причем характер различий определяется сроком экспозиции додецилсульфата натрия. При сроках воздействия 1 и 48 ч количественные данные, полученные методом МТТ, имеют бóльшую дисперсию по сравнению с определенными по поглощению нейтрального красного.
Ключевые слова: HaCaT, додецилсульфат натрия, токсичность, МТТ, нейтральный красный
Адрес для корреспонденции: alexander.l.rusanov@gmail.com.
Русанов А.Л.
Литература
            1.         Boelsma E., Verhoeven M.C., Ponec M. Reconstruction of a human skin equivalent using a spontaneously transformed keratinocyte cell line (HaCaT) // J. Invest. Dermatol. 1999. Vol. 112, N 4. P. 489-498.
            2.         Fotakis G., Timbrell J.A. In vitro cytotoxicity assays: comparison of LDH, neutral red, MTT and protein assay in hepatoma cell lines following exposure to cadmium chloride // Toxicol. Lett. 2006. Vol. 160, N 2. P. 171-177.
            3.         Gibbs S. In vitro irritation models and immune reactions // Skin Pharmacol. Physiol. 2009. Vol. 22, N 2. P. 103-113.
            4.         Guo X., Huang S., Sun J., Wang F. Comparison of the cytotoxicities and wound healing effects of hyaluronan, carbomer, and alginate on skin cells in vitro // Adv. Skin Wound Care. 2015. Vol. 28, N 9. P. 410-414.
            5.         ICCVAM-Recommended Test Method Protocol Normal Human Keratinocyte NRU Cytotoxicity Test Method. November 2006. [http://ntp.niehs.nih.gov/iccvam/docs/protocols/ivcyto-nhk.pdf].
            6.         OECD Guideline for the Testing of Chemicals Section 4: Health Effects. Test No. 431: In Vitro Skin Corrosion: Reconstructed Human Epidermis (RHE) Test Method. 26 July 2013. doi: 10.1787/9789264203822-en.
            7.         OECD Guideline for the Testing of Chemicals Section 4: Health Effects. Test No. 439: In Vitro Skin Irritation — Reconstructed Human Epidermis Test Method. 26 July 2013. doi: 10.1787/9789264203884-e.
            8.         Ramadan Q., Ting F.C. In vitro micro-physiological immune-competent model of the human skin // Lab. Chip. 2016. Vol. 16, N 10. P. 1899-1908.
            9.         Sanchez L., Mitjans M., Infante M.R., Vinardell M.P. Potential irritation of lysine derivative surfactants by hemolysis and HaCaT cell viability // Toxicol. Lett. 2006. Vol. 161, N 1. P. 53-60.
10.       Sergachev I., Rusanov A., Trushkin E., Sakharov D., Marx U., Tonevitsky A. Fluorescent optical fiber sensors for cell viability monitoring // Analyst. 2013. Vol. 138, N 14. P. 4066-4069.
11.       Tyagi N., Bhardwaj A., Srivastava S.K., Arora S., Marimuthu S., Deshmukh S.K., Singh A.P., Carter J.E., Singh S. Development and characterization of a novel in vitro progression model for UVB-induced skin carcinogenesis // Sci.
Rep. 2015. Vol. 5. ID 13894. doi: 10.1038/srep13894.


Виртуально-экспериментальное обоснование динамического остеосинтеза при лечении переломов проксимального отдела бедренной кости
В.Э.Дубров, И.А.Кузькин, И.М.Щербаков, А.Л.Матвеев, А.В.Юдин – 261
МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ
Изучали объемную модель чрезвертельного перелома бедренной кости, фиксированного динамическим фиксатором “Targon PF”, методом конечных элементов. Измеряемыми параметрами являлись величина и направление смещения элементов системы, величина давления в зоне контакта отломков и распределение напряжений von Mises в области металлофиксаторов в зависимости от погружения динамического винта относительно втулки фиксатора. Совокупность полученных данных свидетельствует о том, что в процессе сращения перелома и укорочения оси шейки бедренной кости на 10 мм стабильность системы “кость-металлофиксатор” возрастает, на что указывает уменьшение деформации системы под нагрузкой на 16.8%, уменьшение напряжения в элементах фиксатора на 20.2% и снижение давления в зоне контакта отломков на 19.8%.
Ключевые слова: метод конечных элементов, математическое моделирование, чрезвертельный перелом бедренной кости, цефаломедуллярный остеосинтез 
Адрес для корреспонденции: vduort@gmail.com.
Дубров В.Э.
Литература
            1.         Анурьев В.И. Справочник конструктора-машиностроителя. Том 1. М., 2001.
            2.         Верховод А.Ю., Иванов Д.В. Применение метода конечных элементов для сравнительной оценки стабильности остеосинтеза оскольчатый диафизарных переломов костей голени блокируемыми интрамедуллярными стержнями и аппаратами наружной фиксации // Современные проблемы науки и образования. 2012. № 4; URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=6905 (дата обращения: 28.10.2016).
            3.         Кобелев И.А., Виноградов В.Г. Компьютерное моделирование и конструирование стержневого аппарата внешней фиксации для остеосинтеза внесуставных переломов проксимального отдела бедренной кости // Врач-аспирант. 2012. Т. 50, № 1.3. С. 418-423.
            4.         Шейх-Заде Ю.Р., Галенко-Ярошевский П.А., Чередник И.Л. Математическое описание телосложения и упитанности человека // Бюл. экспер. биол. 2013. Т. 156, № 10. С
. 518-521.
            5.         Anez-Bustillos L., Derikx L.C., Verdonschot N., Calderon N., Zurakowski D., Snyder B.D., Nazarian A., Tanck E. Finite element analysis and CT-based structural rigidity analysis to assess failure load in bones with simulated lytic defects // Bone. 2014. Vol. 58. P. 160-167.
            6.         Goffin J.M., Pankaj P., Simpson A.H. A computational study on the effect of fracture intrusion distance in three- and four-part trochanteric fractures treated with Gamma nail and sliding hip screw // J. Orthop. Res. 2014. Vol. 32, N 1. P. 39-45.
            7.         Goffin J.M., Pankaj P., Simpson A.H. Are plasticity models required to predict relative risk of lag screw cut-out in finite element models of trochanteric fracture fixation? // J. Biomech. 2014. Vol. 47, N 3. P. 323-328.
            8.         Hambli R. A quasi-brittle continuum damage finite element model of the human proximal femur based on element deletion // Med. Biol. Eng. Comput. 2013. Vol. 51, N 1-2. P. 219-231.
            9.         Kawatani Y., Nishida K., Anraku Y., Kunitake K., Tsutsumi Y. Clinical results of trochanteric fractures treated with the TARGON® proximal femur intramedullary nailing fixation system // Injury. 2011. Vol. 42, Suppl. 4. P. S22-S27.
10.       Koivumäki J.E., Thevenot J., Pulkkinen P., Kuhn V., Link T.M., Eckstein F., Jämsä T. Ct-based finite element models can be used to estimate experimentally measured failure loads in the proximal femur // Bone. 2012. Vol. 50, N 4. P. 824-829.
11.       Mahaisavariya B., Chantarapanich N., Riansuwan K., Sitthiseripratip K. Prevention of excessive medialisation of trochanteric fracture by a buttress screw: a novel method and finite element analysis // J. Med. Assoc. Thai. 2014. Vol. 97, Suppl. 9. P. S127-S132.
12.       Müller M.E., Allgöwer M., Schneider R., Willenegger H. Manual of internal fixation: techniques recommended by the AO Group. N.Y., 1991. P. 282-299.
13.       Shih K.S., Hsu C.C., Hsu T.P. A biomechanical investigation of the effects of static fixation and dynamization after interlocking femoral nailing: a finite element study // J. Trauma Acute Care Surg. 2012. Vol. 72, N 2. P. E46-E53.