info@iramn.ru
com@iramn.ru
bam.b@g23.relcom.ru



БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ

2015 г., Том 160, № 12 ДЕКАБРЬ

 

СОДЕРЖАНИЕ

Физиология
Волновая экспрессия белков с-fos и Arc в нейронных популяциях гиппокампа в ответ на одиночный эпизод нового опыта
О.И.Ивашкина*, К.А.Торопова*, А.А.Иванова**, С.А.Чехов**, К.В.Анохин*,** – 689
*ФГБУ НИЦ “Курчатовский институт”, Москва, РФ; **ФБГУ НИИ нормальной физиологии им. П.К.Анохина РАМН, Москва, РФ
Иммуногистохимически определяли накопление белков с-Fos и Arc в нейронах разных отделов гиппокампа после обучения мышей обстановочному условному рефлексу замирания. Установлено, что динамика экспрессии с-Fos и Arc имеет двухфазный характер: с максимумом через 15-30 мин после обучения, и вторым, менее выраженным пиком через 1-3 ч. Индукция Arc происходила раньше, чем с-Fos, а общая динамика экспрессии различалась в зубчатой фасции, СА1 и СА3 полях гиппокампа. Полученные данные открывают возможность картирования когнитивных нейронных сетей мозга с существенно более точным временным разрешением, а также привлекают внимание к волновым колебаниям активности гиппокампа после кратковременного эпизода нового опыта.
Ключевые слова: немедленные ранние гены, c-Fos, Arc, гиппокамп, обучение
Адрес для корреспонденции: oivashkina@gmail.com. Ивашкина О.И.

Действие никотинамидадениндинуклеотида (NAD+) и диаденозинтетрафосфата (Ар4А) на электрическую активность рабочего и пейсмекерного предсердного миокарда морской свинки
К.Б.Пустовит*,**, Д.В.Абрамочкин*,** – 693
*Кафедра физиологии человека и животных МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва, РФ; **Кафедра физиологии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава РФ, Москва
Исследовалось влияние нуклеотидных полифосфатных соединений, никотинамидадениндинуклеотида (NAD+) и диаденозинтетрафосфата (Ар4А), на конфигурацию потенциалов действия в препаратах синоатриального узла и ушка правого предсердия морской свинки. В рабочем миокарде NAD+ и Ар4А в концентрациях 10—5 и 10—4 М не изменяли уровень потенциала покоя, однако существенно уменьшали длительность потенциалов действия, причем наиболее выраженное укорочение наблюдалось на уровне 25% реполяризации. В истинном водителе ритма синоатриального узла обе концентрации NAD+ и Ар4А вызывали гиперполяризацию и снижение скорости медленной диастолической деполяризации, однако лишь в концентрации 10—4 М соединения существенно замедляли синусовый ритм. Кроме того, под действием полифосфатов в пейсмекере наблюдалось укорочение потенциалов действия и выраженное ускорение переднего фронта потенциалов действия. Сравнительный анализ эффектов NAD+ и Ар4А в рабочем и пейсмекерном миокарде позволяет предположить ингибиторное действие соединений на кальциевый ток L-типа наряду со стимуляцией одного или нескольких калиевых токов, обеспечивающей ускорение реполяризации и гиперполяризацию мембраны, вероятно, посредством активации пуринорецепторов.
Ключевые слова: никотинамидадениндинуклеотид, диаденозинтетрафосфат, предсердие, синоатриальный узел, потенциал действия
Адрес для корреспонденции: abram340@mail.ru. Абрамочкин Д.В.

Общая патология и патологическая физиология
Механизмы эритропоэзстимулирующего действия релиз-активных антител к эритропоэтину в комплексном лечении экспериментальной анемии в период гестации
Я.В.Бурмина, Е.В.Удут, В.В.Жданов, Л.С.Сотникова, Л.А.Мирошниченко, Е.В.Симанина, Т.Ю.Полякова, Г.Н.Зюзьков, А.В.Чайковский, Л.А.Ставрова, О.И.Эпштейн, А.М.Дыгай – 698
ФГБНУ НИИ фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д.Гольдберга, Томск, РФ
Исследовали эффективность применения препарата (поэтам), содержащего релиз-активные антитела к эритропоэтину, в дополнение к стандартной терапии экспериментальной железодефицитной анемии в период гестации, изучали механизмы стимуляции эритропоэза. Подтверждена способность комбинированной терапии оказывать эритропоэзстимулирующее действие, более существенное по сравнению с монотерапией по числу эритрокариоцитов и эритроидных предшественников в гемопоэтической ткани, содержанию эритроцитов и гемоглобина в периферической крови. Повышение функциональной активности эритроидного ростка связано с модулирующим влиянием поэтама на пролиферативную активность и дифференцировку эритроидных предшественников и происходит во многом благодаря стимуляции препаратом секреции гемопоэтически активных субстанций адгезирующими элементами кроветворного микроокружения.
Ключевые слова: эритропоэтическая активность, эритропоэз, релиз-активные антитела к эритропоэтину, анемия, феррум лек
Адрес для корреспонденции: evu8@mail.ru. Удут Е.В.

Особенности срочной экспрессии сукцинатзависимого рецептора GPR91 в тканях при гипоксии
Л.Д.Лукьянова, Ю.И.Кирова, Э.Л.Германова – 703
ФГБНУ НИИ общей патологии и патофизиологии, Москва, РФ
Сукцинатзависимый рецептор GPR91 идентифицируется в нормоксических условиях в разных количествах во всех исследованных аэробных тканях, но не в эритроцитах. Наибольшая плотность рецептора выявлена в миокарде (в 2.3 раза больше, чем в почках, и в 1.7 раза больше, чем в коре головного мозга). Гипоксическая экспрессия GPR91 тканеспецифична, зависит от длительности и тяжести гипоксии и не коррелирует с базовым уровнем рецептора. Она максимально выражена в коре головного мозга, что предполагает особую значимость этого сигнального пути для функционирования мозга. Индукция срочной экспрессии GPR91 в коре головного мозга в ответ на однократное гипоксическое воздействие происходит в первые 15-60 мин и коррелирует с формированием срочной толерантности организма к гипоксии. Срочная экспрессия GPR91 при гипоксии, специфичная для коры головного мозга, связана с активностью ГАМК-шунта, являющегося в этих условиях источником сукцината для рецептора.
Ключевые слова: срочная экспрессия GPR91, ГАМК-шунт, сукцинат, гипоксия
Адрес для корреспонденции: ldlukyanova@gmail.com. Лукьянова Л.Д.

Биофизика и биохимия
Определение микроРНК плазмы крови, ассоциированных с гемолизом
М.Ю.Шкурников*,**, Е.Н.Князев*, К.А.Фомичева**, Д.С.Михайленко**, К.М.Нюшко**, Э.К.Сарибекян**, Т.Р.Саматов*, Б.Я.Алексеев** – 709
*ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ; **ФГБУ Национальный медицинский исследовательский радиологический центр Минздрава РФ, Москва
Исследовано влияние гемолиза на профиль микроРНК плазмы крови. Установлено, что гемолиз около 0.05% эритроцитов в образце значимо влияет на уровень 9 микроРНК: hsa-miR-486-5p, hsa-miR-16-5p, hsa-miR-451a, hsa-miR-106a-5p, hsa-miR-17-5p, hsa-miR-93-5p, hsa-miR-20a-5p, hsa-miR-107, hsa-miR-20b-5p. Показано влияние гемолиза на уровень микроРНК семейства miR-17 в плазме крови.
Ключевые слова: микроРНК, гемолиз, микрочиповый анализ, плазма крови
Адрес для корреспонденции: mshkurnikov@imscs.msu.ru. Шкурников М.Ю.

Влияние селективных агонистов V1a, V2 и V1b рецепторов на транспорт натрия в почке крыс
Д.В.Голосова, Т.А.Каравашкина, А.В.Кутина, А.С.Марина, Ю.В.Наточин – 712
Лаборатория физиологии почки и водно-солевого обмена (зав. — канд. мед. наук. А.В.Кутина) ФГБУН Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН, Санкт-Петербург, РФ
В опытах in vivo на крысах Вистар установлена роль подтипов рецепторов вазопрессина в изменении реабсорбции натрия в почке. Селективный агонист V1a-рецепторов снизил реабсорбцию ионов натрия в почке, и их экскреция возросла почти в 100 раз: эффект подобен действию фуросемида. Селективный агонист V2-рецепторов увеличил реабсорбцию ионов натрия в почке, одновременно повысив реабсорбцию осмотически свободной воды. Стимуляция V1b-рецепторов не повлияла на транспорт натрия. Полученные результаты свидетельствуют о ключевой роли V1a-рецепторов в регуляции экскреции ионов натрия почкой.
Ключевые слова: почка, рецепторы вазопрессина, натрий, реабсорбция
Адрес для корреспонденции: natochin1@mail.ru. Наточин Ю.В.

Влияние гипотермии и последующего самосогревания на активность Са2+-зависимых нейтральных протеаз в тканях суслика и крысы
П.M.Нурмагомедова, Э.З.Эмирбеков*, M.M.Абасова – 716
Кафедра биохимии и биофизики ФГБОУ ВПО Дагестанского государственного университета Минобрнауки РФ, Махачкала, Республика Дагестан; *Кафедра физико-химической биологии филиала ФГАОУ ВО Южного федерального университета Минобрнауки РФ, Махачкала, Республика Дагестан
Исследовано влияние гипотермии и последующего самосогревания на активность Са2+-зависимых нейтральных протеаз в тканях суслика и крысы. Умеренная гипотермия не вызывает достоверных изменений активности Са2+-зависимых нейтральных протеаз в исследуемых тканях суслика, а в сердечной мышце крысы наблюдается снижение активности протеаз. Глубокая гипотермия снижает активность ферментов в исследуемых тканях как у крыс, так и у сусликов. При пролонгировании гипотермии и после самосогревания различия в активности Са2+-зависимых нейтральных протеаз выявлены только в сердечной мышце.
Ключевые слова: гипотермия, крысы, суслики, Са2+-зависимые нейтральные протеазы, кальпаины
Адрес для корреспонденции: parizat1949@bk.ru. Нурмагомедова П.М.

Фармакология и токсикология
Влияние нового антиоксидантного вещества эноксифол на агрегацию тромбоцитов и реологические свойства крови лабораторных крыс при экспериментальном диабете
А.Ф.Кучерявенко, А.А.Спасов, В.А.Анисимова*  – 721
Кафедра фармакологии (рук. — докт. мед. наук акад. РАМН А.А.Спасов) Волгоградского государственного медицинского университета, Волгоград, РФ; *НИИ физической и органической химии Южного федерального университета, Ростов-на-Дону, РФ
Проведена оценка эффективности действия нового антиоксидантного вещества эноксифол, проявляющего антиагрегантную активность in vitro и in vivo на параметры гемостаза лабораторных крыс с экспериментальным диабетом. В качестве препаратов сравнения использовали гипогликемическое средство с антитромбоцитарными свойствами гликлазид и препарат, улучшающий реологические свойства крови, — пентоксифиллин. Эноксифол проявил выраженную ингибирующую активность в отношении агрегации тромбоцитов крыс с экспериментальным диабетом, сравнимую с гликлазидом, а также снижал вязкость крови, проявляя выраженную активность в сравнении с пентоксифиллином. С учетом того, что одним из патогенетических звеньев сосудистых осложнений при сахарном диабете является оксидативный стресс, можно предположить, что способность эноксифола улучшать показатели гемостаза связана с наличием двух видов активности: антиагрегантной и антиоксидантной.
Ключевые слова: эноксифол, агрегация тромбоцитов, вязкость крови, антиоксидантная активность
Адрес для корреспонденции: aidakucheryavenko@yandex.ru. Кучерявенко А.Ф.

Независимый от р53 и каспазы-3 механизм действия ацетаминофена на нейральные клетки человека
А.В.Александрова, Н.В.Сенявина, Д.В.Мальцева, А.А.Хуторненко, Д.А.Сахаров – 725
ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ

Показано, что под действием ацетаминофена в концентрации 5 мМ происходит увеличение экспрессии JNK, фактора, индуцируемого гипоксией HIF1A, и CASP3, что указывает на развитие окислительного стресса и апоптотического пути гибели клеток. При концентрации ацетаминофена 10 мМ не происходит индукции HIF1A и CASP3, но снижается экспрессия шаперона HSP90, что указывает на запуск независимого от каспазы-3 механизма гибели клеток. Обсуждаются методы предотвращения интоксикации, вызванной ацетаминофеном.
Ключевые слова: ацетаминофен, нейральные клетки, механизмы гибели клеток
Адрес для корреспонденции: a.aleksandrova@bioclinicum. com. Александрова А.В.

Связь между дозой сульфата целлюлозы при внутривенном введении кроликам и антикоагулянтным эффектом
Н.Н.Дрозд, С.А.Кузнецова*, Т.Б.Калинина, Н.Ю.Васильева* – 730
ФГБУ Гематологический научный центр Минздрава РФ, Москва; *ФГБУ Институт химии и химической технологии СО РАН, Красноярск, РФ
С увеличением дозы сульфата целлюлозы (динамическая вязкость 3.4 сП, содержание серы 14.1%), полученной из соломы пшеницы, при внутривенном введении кроликам увеличиваются время свертывания плазмы в некоторых коагулологических тестах и антикоагулянтная активность плазмы. При введении сульфата целлюлозы в дозе 1 мг/кг время свертывания плазмы с антикоагулянтом (через 5 мин после введения) почти в 3 раза больше, чем при введении физиологического раствора.
Ключевые слова: сульфат целлюлозы, антикоагулянт, аIIa-активность, аХа-активность
Адрес для корреспонденции: nndrozd@mail.ru. Дрозд Н.Н.

Локализация и экспрессия транспортеров нуклеозидов ENT1 и ENT2 в полярных клетках эпителия кишечника
Н.В.Сенявина, Т.Н.Герасименко, К.А.Фомичева*, С.А.Тоневицкая**, А.Д.Каприн*  – 734
ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ; *ФГБУ Национальный медицинский исследовательский радиологический центр Минздрава РФ, Москва; **ФГБОУ ВПО Университет машиностроения (МАМИ), Москва, РФ
Клетки Сасо-2 широко используют при in vitro исследованиях проницаемости стенки кишечника для лекарственных средств, однако транспортная активность данных клеток до конца не охарактеризована. Исследована локализация и экспрессия транспортеров нуклеозидов семейства ENT, осуществляющих перенос ряда противоопухолевых и противовирусных препаратов. Иммуноцитохимическое окрашивание выявило апикальную локализацию ENT1 и интегральную экспрессию ENT2 в клетках Сасо-2. На основании полученных данных, а также величины поглощения гипоксантина данными клетками была построена математическая модель, позволившая количественно оценить экспрессию транспортеров на апикальной и базолатеральной мембране клеток Сасо-2. Обсуждается несоответствие генной и белковой экспрессии транспортеров, затрудняющее предсказание чувствительности пациентов к лекарственным препаратам при выборе индивидуальной терапии.
Ключевые слова: Сасо-2, полярность, транспортеры нуклеозидов, математическая модель
Адрес для корреспонденции: n.seniavina@bioclinicum.com. Сенявина Н.В.

Микробиология и иммунология
Комплементопосредованная гибель инфузорий Tetrahymena pyriformis под воздействием сыворотки крови человека
П.А.Иванов, М.И.Фактор, Н.С.Карпова, Е.Г.Черемных, О.С.Брусов – 739
ФГБНУ Научный центр психического здоровья, Москва, РФ
Токсичность сыворотки крови человека для инфузорий Tetrahymena pyriformis определяется системой комплемента. В процессе гибели инфузорий под воздействием сыворотки происходит существенное повышение проницаемости мембраны клеток для низкомолекулярных соединений, вероятно, за счет образования пор. Ингибиторы сериновых протеаз или физические воздействия (например, нагревание до 56оС), ингибирующие активность комплемента, полностью блокируют гибель инфузорий при воздействии человеческой сыворотки. Активация сывороточного комплемента при взаимодействии с клетками инфузорий происходит по классическому или лектиновому пути. Вклад альтернативного пути активации незначителен.
Ключевые слова: система комплемента, инфузория, Tetrahymena pyriformis, токсичность, сыворотка крови
Адрес для корреспонденции: ivanovpa@mail.ru. Иванов П.А.

Длина теломер индивидуальных хромосом у пациентов с ревматоидным артритом
Е.А.Блинова, Е.В.Зиннатова, М.Ш.Барковская, В.И.Борисов, А.Э.Сизиков, В.С.Кожевников, Н.Б.Рубцов*, В.А.Козлов – 744
ФГБНУ НИИ фундаментальной и клинической иммунологии, Новосибирск, РФ; *ФГБНУ Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, РФ
Охарактеризована длина теломер индивидуальных хромосом в лимфоцитах периферической крови человека в норме и при ревматоидном артрите. Используя количественную флюоресцентную гибридизацию in situ с последующим компьютерным анализом цифровых изображений метафаз, мы показали, что распределение длины теломер на индивидуальных хромосомах в норме и при патологии различается. У пациентов с ревматоидным артритом выявлено достоверное укорочение длины теломер на p-плече хромосомы 4, что может иметь существенное значение для патогенеза данного мультифакториального заболевания. Кроме того, активность заболевания обратно коррелировала с длиной теломер на p-плече хромосомы 10, где расположены гены, вовлеченные в процессы дифференцировки и пролиферации Т-клеток.
Ключевые слова: длина теломер, количественная флюоресцентная гибридизация in situ, лимфоциты, ревматоидный артрит, хромосомы
Адрес для корреспонденции: blinovaelena-85@yandex.ru. Блинова Е.А.

Окисленный декстран усиливает альтернативную активацию макрофагов мышей оппозитных линий
А.В.Чечушков*, П.М.Кожин*, Н.С.Зайцева*, А.Е.Лемза*, Е.Б.Меньщикова*, А.В.Троицкий*, В.А.Шкурупий*,**  – 749
*ФГБНУ НИИ экспериментальной и клинической медицины, Новосибирск, РФ; **ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава РФ, Новосибирск
Исследовали различия в поляризации перитонеальных макрофагов мышей оппозитных линий СВА и C57Bl/6 и влияние окисленного декстрана массой 60 кД. Макрофаги мышей линии C57Bl/6 демонстрировали фенотип, близкий к M1, с возрастающим уровнем экспрессии костимулирующей молекулы CD86 и неизменным уровнем экспрессии CD206 в ответ на активацию. У макрофагов мышей линии СВА наблюдалась большая пластичность в ответ на различные активирующие агенты, увеличение экспрессии маркеров происходило вне зависимости от стимулируемого рецептора (TLR-4 или маннозный рецептор), при этом возрастало количество как CD86 (классическая активация), так и CD206 (альтернативная активация). Реагирование макрофагов на дополнительное введение в среду культивирования окисленного декстрана 60 кД можно охарактеризовать как потенцирование их альтернативной активации: экспрессия CD86 у мышей ли­нии CBA в ответ на ЛПС и ЛПС+ИЛ-4 и у мышей линии С57Bl/6 в ответ на ИФН-g и ЛПС+ИФН-g под действием окисленного декстрана 60 кД снижалась, а экспрессия CD206 интактными макрофагами мышей линии CBA, а также стимулированными ИФН-g и ИЛ-4 возрастала.
Ключевые слова: окисленный декстран 60 кД, перитонеальные макрофаги, классическая активация, альтернативная активация, мыши линий C56Bl/6, CBA
Адрес для корреспонденции: lemen@centercem.ru. Меньщикова Е.Б.

Особенности воспалительного процесса репродуктивных органов самок мышей линии C57Bl/6 при экспериментальном туберкулезе
Г.Т.Сухих*, С.И.Каюкова, И.В.Бочарова, А.Е.Донников*, Л.Н.Лепеха, О.В.Демихова, Е.В.Уварова*, Ю.С.Березовский, Т.Г.Смирнова – 754
ФГБНУ Центральный НИИ туберкулеза, Москва, РФ; *ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Внутривенное инфицирование самок мышей линии C57Bl/6 M. tuberculosis Н37Rv приводит не только к поражению легких, но и к распространению туберкулезной инфекции в органы брюшной полости и малого таза. M. tuberculosis были обнаружены через 14, 35, 90 сут после инфицирования в легких, селезенке и через 90 сут в маточных рогах. При морфологическом исследовании органов самок мы наблюдали последовательное развитие экссудативно-некротического туберкулеза легких, острого и хронического воспаления неспецифического характера в половых органах (влагалище, матке, маточных рогах). Воспалительный процесс в половых органах сопровождался развитием анаэробного дисбиоза, наиболее выраженного через 35 сут после инфицирования. Противотуберкулезная терапия приводила к снижению количества M. tuberculosis в легких и селезенке через 60 и 90 сут, абациллированию маточных рогов, купированию неспецифического воспаления в половых органах самок мышей, восстановлению баланса аэробно-анаэробной флоры, а также развитию кандидоза слизистых урогенитального тракта.
Ключевые слова: экспериментальный туберкулез, инбредные мыши, воспаление, репродуктивные органы
Адрес для корреспонденции: kajukovalnp@gmail.com. Каюкова С.И.

Генетика
Сравнение профиля экспрессии мРНК генов, участвующих в иммунном ответе, в пуповинной и венозной крови новорожденных первых суток жизни
О.С.Непша, И.В.Никитина, А.Е.Донников, А.А.Быстрицкий, С.М.Муллабаева, С.В.Павлович, Н.В.Александрова – 759
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Сравнивали уровень экспрессии мРНК генов, участвующих в иммунном ответе, в пуповинной и венозной крови новорожденных первых суток жизни с инфекционной патологией и без признаков инфекции. Экспрессию мРНК генов il1b, il6, il8, il10, il12а, il15, il18, tnfa, tgfb1, tbx21, gata3, foxp3, rorc2, cd45, cd68, cd69, tlr2, tlr4, tlr9, mmp8 определяли в клетках пуповинной и венозной крови новорожденных методом обратной транскрипции и ПЦР в режиме реального времени. В венозной крови доношенных детей без признаков инфекции по сравнению с пуповинной кровью повышена экспрессия il8, tlr2, tlr4, mmp8 и снижена — tbx21, а у поздних недоношенных детей повышено количество транскрипта mmp8 и снижено — tlr9, cd45, gata3. Получены достоверные различия по ряду анализируемых маркеров как между пуповинной и венозной кровью, так и между детьми с наличием врожденной инфекционной патологии и без признаков инфекции.
Ключевые слова: цитокины, мРНК, экспрессия генов, пуповинная кровь, венозная кровь
Адрес для корреспонденции: nepshonok@yandex.ru. Непша О.С.

Индивидуальные характеристики уровней продукции цитокинов у здоровых представителей европеоидного населения Cибирского региона
В.И.Коненков, А.В.Шевченко, В.Ф.Прокофьев, О.В.Повещенко, А.П.Лыков – 764
ФГБНУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии, Новосибирск, РФ
Определены уровни спонтанной и индуцированной конканавалином A продукции в культурах мононуклеарных клеток ряда ключевых цитокинов (ФНО-a, ИЛ-1b, ИЛ-4, ИЛ-6 и ИЛ-10) в группе здоровых лиц, у которых исследовали полиморфизм промоторных участков соответствующих генов. Показано, что наличие в генотипе человека определенных аллельных вариантов в промоторных областях генов цитокинов во многом определяет уровень их спонтанной и индуцированной продукции. Установлено, что аллельный вариант -31 С гена IL1b связан с высоким уровнем продукции этого цитокина. Наряду с этим полиморфизм C-590 T гена IL4 оказывает существенное влияние на уровень продукции таких цитокинов, как ИЛ-1b, ФНО-a, ИЛ-6 и ИЛ-10.
Ключевые слова: цитокины, полиморфизм, промоторная область, генотипы, конканавалин А
Адрес для корреспонденции: shalla64@mail.ru. Шевченко А.В.

Онкология
Влияние таргетной терапии на содержание транскрипционных, ростовых факторов, протеинкиназы TOR и активности внутриклеточных протеиназ у больных диссеминированным раком почки
Л.В.Спирина, Е.А.Усынин, И.В.Кондакова, З.А.Юрмазов, Е.М.Слонимская – 768
ФГБНУ Томский НИИ онкологии, Томск, РФ
Изучена динамика экспрессии транскрипционных факторов, VEGF и его рецептора VEGFR2, серин-треониновой протеинкиназы mTOR, активности протеасом и кальпаинов на фоне лечения ингибитором тирозинкиназ “Вотриентом” и блокатором mTOR “Афинитором” у больных с диссеминированным раком почки. На фоне лечения таргетными препаратами экспрессия гипоксического ядерного фактора HIF-1a в ткани опухоли снижалась. Снижение экспрессии VEGF и его рецептора VEGFR2 отмечено только в группе больных, получавших терапию ингибитором mTOR. Повышение активности кальпаинов в ткани опухоли наблюдается при лечении обоими таргетными препаратами. Полученные данные расширяют представления о механизме действия таргетных противоопухолевых препаратов, а также позволяют рассматривать изучаемые маркеры в качестве предикторных при выборе оптимальной терапии.
Ключевые слова: транскрипционные и ростовые факторы, mTOR, внутриклеточные протеиназы, рак почки
Адрес для корреспонденции: spirinalvl@mail.ru. Спирина Л.В.

Белки-регуляторы эпителиально-мезенхимального перехода и некоторые компоненты VEGF-сигнального пути в опухолях молочной железы
А.М.Щербаков, Е.С.Герштейн, Е.А.Короткова, Л.К.Овчинникова, О.Г.Овсий, В.Д.Ермилова, Г.П.Генс, Н.Е.Кушлинский – 773
ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина Минздрава РФ, Москва
Иммуногистохимическим методом определяли экспрессию белков-регуляторов эпителиально-мезенхимального перехода семейства Snail, их коактиватора NF-kB и компонентов VEGF-сигнального пути — VEGF и его двух рецепторов (VEGFR1 и VEGFR2) в 157 образцах опухолей молочной железы. В большинстве опухолей экспрессия SNAI1 не выявлена. В то же время опухоли со средней и высокой экспрессией SNAI2 суммарно составили более 65% наблюдений. Уровни экспрессии SNAI1, SNAI2 и их коактиватора NF-kB достоверно коррелировали. Прослеживалась также корреляция уровней экспрессии белков семейства Snail и VEGFR1 в опухолях. Кроме того, выявлена коэкспрессия SNAI2 и VEGFR2. Полученные данные свидетельствуют о координированной активации белков-регуляторов эпителиально-мезенхимального перехода и основных компонентов VEGF-сигнального пути в опухолях молочной железы.
Ключевые слова: рак молочной железы, эпителиально-мезенхимальный переход, белки Snail, VEGF, рецепторы VEGF
Адрес для корреспонденции: alex.scherbakov@gmail.com. Щербаков А.М.

Роль L1CAM в регуляции канонического Wnt-пути и генов MAGE I класса
М.Ю.Шкурников, Е.Н.Князев, D.Wicklein*, U.Schumacher*, Т.Р.Саматов**, А.Г.Тоневицкий – 779
ФГБУ Национальный медицинский исследовательский радиологический центр Минздрава РФ, Москва; *University Medical-Center Hamburg-Eppendorf, Hamburg, Germany; **ФГБОУ ВПО Университет машиностроения (МАМИ), Москва, РФ
Молекула L1CAM специфична для нервных клеток, а также для опухолей разной локализации. Экспрессия L1CAM значительно повышена в меланоме по сравнению с доброкачественными невусами, а также коррелирует с прогрессией меланомы и переходом от радиального к вертикальному росту. Моноклональные антитела к L1CAM способны эффективно и специфично ослаблять рост меланомы, однако такое воздействие стимулирует эпителиально-мезенхимальный переход. Использование shРНК к L1CAM позволило показать, что L1CAM регулирует активность канонического Wnt-пути и экспрес­сию генов семейства ассоциированных с меланомой антигенов (MAGE) I класса.
Ключевые слова: shРНК, L1CAM, меланома, MAGE, Wnt
Адрес для корреспонденции: mshkurnikov@imscs.msu.ru. Шкурников М.Ю.

Генетическая нестабильность в локусе rs5498 E469K (A/G) гена ICAM-1 у больных раком толстой кишки и молочной железы
В.В.Новиков*, С.В.Шумилова*, Д.В.Новиков*, А.В.Калугин*, С.Г.Фомина*, А.В.Караулов*,** – 783
*ФГБОУ ВПО Национальный исследовательский университет Нижегородского государственного университета им. Н.И.Лобачевского, Нижний Новгород, РФ; **ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.Сеченова, Москва, РФ
Однонуклеотидный полиморфизм rs5498 E469K (A/G) в составе гена ICAM-1 оказывает влияние на функциональную активность данного белка и ассоциирован с риском некоторых заболеваний. Проведено сравнение генотипов rs5498 E469K (A/G) опухолевых клеток с генотипом больных раком толстой кишки и молочной железы, проживающих на территории Нижегородской области. Были исследованы образцы периферической крови и опухолевых очагов больных раком толстой кишки и молочной железы и образцы периферической крови здоровых людей. Установлено, что частоты генотипов однонуклеотидной последовательности rs5498 E469K (A/G) в нижегородской популяции совпадают с частотами, характерными для жителей Германии. Сравнение генотипов клеток периферической крови и опухоли больных раком молочной железы и толстой кишки выявило потерю гетерозиготности в раковых клетках. При этом частота потери гетерозиготности повышалась с прогрессированием рака толстой кишки от стадии к стадии.
Ключевые слова: ICAM-1, рак толстой кишки, рак молочной железы, однонуклеотидный полиморфизм, потеря гетерозиготности
Адрес для корреспонденции: drkaraulov@mail.ru. Караулов А.В.

Инсулиноподобные факторы роста (ИФР) и связывающие их белки (ИФРСБ) сыворотки крови больных опухолями яичников
Е.С.Герштейн, Э.Р.Исаева, Д.Н.Кушлинский*, Е.А.Короткова, В.Д.Ермилова, К.П.Лактионов, Л.В.Адамян* – 787
ФГБНУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина, Москва, РФ, *ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Содержание ИФР-1, ИФР-2 и ИФРСБ-1, 2, 3 определяли в сыворотке крови 44 больных раком, 11 больных пограничными и 12 — доброкачественными опухолями яичников, а также 33 практически здоровых женщин. Уровень ИФР-1 достоверно снижен, а ИФРСБ-1 — повышен в сыворотке крови больных раком яичников по сравнению со всеми остальными группами. Уровень ИФРСБ-2 повышен у больных раком яичников и пограничными опухолями по сравнению со здоровыми женщинами и больными доброкачественными опухолями яичников. Взаимосвязи большинства исследованных показателей с клинико-морфологическими особенностями рака яичников не обнаружено. Выявлены нарушения баланса ИФР/ИФРСБ у больных раком яичников и показано, что ИФРСБ-2 — потенциальный серологический маркер рака яичников с чувствительностью 90% при 90% специфичности.
Ключевые слова: инсулиноподобные факторы роста (ИФР) 1-го и 2-го типа, ИФР-связывающие белки (ИФРСБ) 1, 2, 3-го типов, опухоли яичников
Адрес для корреспонденции: biochimia@mtu-net.ru. Герштейн Е.С.

Биотехнологии
Детекция наночастиц золота в тканях органов крыс методом просвечивающей электронной микроскопии
Т.А.Платонова, С.М.Придворова, А.В.Жердев, И.В.Гмошинский*, Л.С.Василевская*, Б.Б.Дзантиев – 791
ФГБУН Институт биохимии им. А.Н.Баха РАН, Москва, РФ; *ФГБНУ НИИ питания, Москва, РФ
Проведено электронно-микроскопическое изучение влияния водных дисперсий наночастиц золота (средний диаметр 8.0±0.9 нм) на слизистую оболочку и пейеровы бляшки тонкой кишки, печень и селезенку крыс. Показано, что наночастицы золота при введении в виде водной дисперсии в изолированную петлю кишки способны не только накапливаться в слизистой оболочке и пейеровых бляшках тонкой кишки, но и проникать в другие органы, в частности в печень и селезенку. Отмечены отдельные ультраструктурные изменения (гиперплазия эндоплазматического ретикулума) в клетках изученных органов.
Ключевые слова: наночастицы золота, ткани органов крыс, электронная микроскопия
Адрес для корреспонденции: dzantiev@inbi.ras.ru. Дзантиев Б.Б.

Получение и изучение интернализации конъюгата вискумин-ферромагнитных наночастиц клетками глиобластомы человека А172
А.А.Хуторненко, В.М.Герасимов, Д.А.Сахаров – 797
Научно-технический центр “БиоКлиникум”, Москва, РФ
В работе использовали частицы магнетита, модифицированные полиэтиленгликолем с молекулярной массой 3 кД, гидродинамический диаметр которых составляет примерно 60 нм. Растительный лектин вискумин, ковалентно иммобилизованный на этих наночастицах, сохранил свои связывающие свойства. Иммунохимические свойства вискумина после конъюгирования оценивали с помощью моноклональных антител. Полученный конъюгат с гидродинамическим диаметром 70 нм использовали для изучения связывания и интернализации клетками-мишенями. Связывание и вискумина, и его конъюгата определялось содержащими концевую галактозу рецепторами, однако внутриклеточное распределение различалось. Описанная модельная система может быть использована для разработки терапевтических препаратов направленного действия.
Ключевые слова: наночастицы магнетита, вискумин, внутриклеточный транспорт, направленная доставка, интернализация
Адрес для корреспонденции: d.sakharov@bioclinicum.com. Сахаров Д.А.

Антипролиферативный потенциал официнальных форм и наноразмерных частиц солей лития
А.П.Лыков, О.В.Повещенко, Н.А.Бондаренко, Н.П.Бгатова, О.П.Макарова, В.И.Коненков – 802
ФГБНУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии, Новосибирск, РФ
Исследован эффект официнальных форм и наноразмерных частиц карбоната лития и цитрата лития на пролиферативный потенциал клеток гепатомы-29. Показано, что наноразмерные частицы карбоната лития оказывают ингибирующее действие на пролиферацию клеток гепатомы-29 в меньших концентрациях по сравнению с официнальной формой соли. В основе антипролиферативного эффекта солей лития лежит активация апоптоза и задержка клеток гепатомы-29 в фазе G2/M клеточного цикла.
Ключевые слова: соли лития, гепатома-29, антипролиферативный эффект, наноразмерные частицы
Адрес для корреспонденции: aplykov2@mail.ru. Лыков А.П.

Транспорт и токсичность наночастиц серебра в сфероидах клеток HepaRG
Н.В.Сенявина, Т.Н.Герасименко, Н.В.Пулькова, Д.В.Мальцева – 806
ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ
Исследовано воздействие наночастиц серебра размером 10 нм на сфероиды клеток HepaRG, моделирующие ткань печени. Предложена математическая модель диффузии наночастиц в сфероиде из 5000 клеток в зависимости от внешней концентрации. Показано, что клетки в составе 3D-модели менее подвержены токсическому воздействию наночастиц по сравнению с традиционными 2D-культурами. При этом наблюдаемое нарушение целостности клеточной мембраны не приводит к снижению жизнеспособности клеток по данным МТТ-теста.
Ключевые слова: HepaRG, сфероид, серебро, наночастицы, модель
Адрес для корреспонденции: n.seniavina@bioclinicum.com. Сенявина Н.В.

Морфология и патоморфология
Морфологические изменения брыжеечных лимфатических узлов и субпопуляционный состав лимфоцитов при экспериментальном язвенном колите
Е.А.Постовалова*,**, Д.Н.Хочанский**, Н.А.Золотова*,**, Ю.Гао*, О.В.Макарова*,**, М.Т.Добрынина* – 811
*Кафедра клеточной биологии и гистологии биологического факультета МГУ им. М.В.Ло­моносова, Москва, РФ; **ФГБНУ НИИ морфологии человека, Москва, РФ
Изучены морфологические изменения брыжеечных лимфатических узлов мышей-самцов линии C57Bl/6 и исследован субпопуляционный состав лимфоцитов в них при экспериментальном остром и хроническом язвенном колите, индуцированном декстрансульфатом натрия. При остром и хроническом язвенном колите в брыжеечных лимфатических узлах развиваются реактивные изменения по смешанному типу, характеризующиеся фолликулярной гиперплазией и синусной реакцией. При остром язвенном колите в брыжеечных лимфатических узлах содержание CD19+В-лимфоцитов снижается, а CD3+CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов увеличивается, что, по-видимому, отражает процессы активации реакций Th1-типа. Увеличение содержания CD4+CD25+FOXP3+ регуляторных Т-лимфоцитов и CD3+CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов обусловлено усилением миграции лимфоцитов из тимуса и компартмента локальной иммунной системы ободочной кишки. При хроническом язвенном колите в брыжеечных лимфатических узлах увеличивается содержание CD19+В-лимфоцитов и CD3+CD4+Т-хелперов, что характерно для реакций адоптивного иммунитета и хронизации воспалительного процесса.
Ключевые слова: брыжеечные лимфатические узлы, экспериментальный колит, иммунофенотип
Адрес для корреспонденции: e.a.postovalova@gmail.com. Постовалова Е.А.

Морфологические особенности хрящевой ткани ушной раковины в разные возрастные периоды человека
В.П.Новоселов, С.В.Савченко, Е.В.Пяткова*, А.П.Надеев**, Т.А.Агеева**, Ю.В.Чикинев***, А.С.Полякевич*** – 817
Кафедра судебной медицины (зав. — проф. В.П.Новоселов) ГБОУ ВПО Новосибирского государственного медицинского университета, Новосибирск, РФ; *Кафедра судебной медицины (зав. — проф. В.И.Чикун) ГБОУ ВПО Красноярского государственного медицинского университета, Красноярск, РФ; **Кафедра патологической анатомии (зав. — проф. А.П.Надеев), ***кафедра госпитальной и детской хирургии (зав. — проф. Ю.В.Чикинев) ГБОУ ВПО Новосибирского государственного медицинского уни­верситета, Новосибирск, РФ
Методом определения метрических размеров между реперными точками, нанесенными на каждую из ушных раковин по направляющим осевым линиям, проводили комплексную морфологическую оценку ушной раковины для определения возраста человека. Установлено, что эластический хрящ ушной раковины человека в разные возрастные периоды характеризуется увеличением толщины хрящевой пластинки и изменением соотношения зон зрелого и молодого хряща, а также объемной плотности межклеточного вещества и эластических волокон в сочетании с изменениями численной плотности одиночных хондроцитов и изогрупп. В разные возрастные периоды также отмечается увеличение содержания аггрекана в хряще. Выявленные возрастные изменения структуры хряща ушной раковины расширяют возможности судебно-медицинской экспертизы и могут быть использованы при идентификации личности.
Ключевые слова: морфология, ушная раковина, установление возраста
Адрес для корреспонденции: dr.serg62@yandex.ru. Савченко С.В.

Изолированный амилоидоз предсердий у пациентов с разными формами фибрилляции предсердий
Т.В.Сухачева, М.В.Еремеева, А.Г.Ибрагимова, В.А.Васковский, Р.А.Серов, А.Ш.Ревишвили – 821
ФГБНУ Научный центр сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н.Бакулева, Москва, РФ
Проведено гистологическое и электронно-микроскопическое исследование миокарда ушка правого и левого предсердия пациентов с пароксизмальной, персистирующей и длительно персистирующей формами фибрилляции предсердий. Изолированный амилоидоз предсердий обнаружен в миокарде ушка левого предсердия у 50.0-56.3% пациентов и в миокарде ушка правого предсердия у 45.0-55.6% пациентов. Методом иммуногистохимии во всех случаях в депозитах амилоида выявлен фибриллярный предсердный натрийуретический пептид. На ультраструктурном уровне амилоидные массы были представлены скоплением фибрилл диаметром 8-10 нм, расположенных хаотично, внеклеточно вдоль сарколеммы, в инвагинациях мембраны и в расширенных каналах Т-системы кардиомиоцитов, а также в стенках сосудов. Амилоидоз чаще наблюдали у женщин, выраженность его положительно коррелировала с возрастом и длительностью фибрилляции предсердий и обратно коррелировала с фиброзом миокарда предсердий. Выявлена положительная (при длительно персистирующей фибрилляции предсердий) и отрицательная (при пароксизмальной фибрилляции предсердий) корреляция амилоидоза с содержанием миофибрилл в кардиомиоцитах предсердий.
Ключевые слова: фибрилляция предсердий, изолированный амилоидоз предсердий, кардиомиоциты, ультраструктура, предсердный натрийуретический пептид
Адрес для корреспонденции: tatiana@box.ru. Сухачева Т.В.

Методики
Прогрессивные матрицы равена в лексике динамического картирования мозга (фМРТ-исследование)
К.Г.Мажирина*,***,****,М.Е.Мельников*,****, М.А.Покровский*,***, Е.Д.Петровский**, А.А.Савелов**, М.Б.Штарк*,***,**** – 828
*ФГБНУ НИИ молекулярной биологии и биофизики, Новосибирск, РФ; **ФГБУН НИИ “Международный томографический центр” СО РАН, Новосибирск, РФ; ***НПФ “Компьютерные системы биоуправления”, Новосибирск, РФ; ****Новосибирский национальный исследовательский государственный университет, Новосибирск, РФ
С помощью функциональной магнитно-резонансной томографии изучена внутримозговая динамика при выполнении теста “Прогрессивные матрицы Равена”. Усложняющиеся с каждой серией задания теста вызывают изменения мозжечковой активации, функционально связанной с когнитивными действиями и операциями. По мере усложнения заданий происходит постепенное подавление активности сети базового режима (default mode network, DMN). Наиболее сильные изменения активации церебральных структур происходят во второй серии теста и касаются ассоциативной соматосенсорной области и зоны Вернике, которая, как известно, играет существенную роль в процессах мышления, связанных с синтезом и анализом информации.
Ключевые слова: прогрессивные матрицы Равена, функциональная магнитно-резонансная томография, нейровизуализация, когнитивные особенности
Адрес для корреспонденции: mark@niimbb.ru. Штарк М.Б.

Математическая и экспериментальная модель диффузии кислорода для сфероидов клеток HepaRG
А.В.Александрова, Н.П.Пулькова*, Т.Н.Герасименко, Н.Ю.Анисимов*, С.А.Тоневицкая*, Д.А.Сахаров – 836
ООО НТЦ “БиоКлиникум”, Москва, РФ; *ФГБОУ ВПО Университет машиностроения (МАМИ), Москва, РФ
Для оценки токсического действия ксенобиотиков in vitro все чаще используются трехмерные клеточные системы. При использовании многоклеточных сфероидов возникает вопрос об их оптимальном размере: при малом размере сфероида значительно усложняются манипуляции с ним, при большом размере затруднен перенос питательных веществ и кислорода в центр сфероида. Cуществующие математические модели, описывающие распределение веществ в многоклеточных сфероидах, требуют численного решения системы дифференциальных уравнений, что делает их сложноприменимыми в лабораторной практике. Предложена и экспериментально изучена математическая модель, описывающая распределение кислорода в объеме сфероида клеток HepaRG. Исследованы маркеры функциональной активности в сфероидах разного размера. Опреде­лен максимальный клеточный размер сфероида, поддерживаемого в культуре без развития некроза в течение 9 сут.
Ключевые слова: 3D-модель печени, HepaRG, математическая модель, гипоксия
Адрес для корреспонденции: a.aleksandrova@bioclinicum. com. Александрова А.В.

Анализ протеомного состава конденсата выдыхаемого воздуха новорожденных, находящихся на респираторной поддержке
А.С.Кононихин, А.Ю.Рындин, Н.Л.Стародубцева, В.В.Чаговец, А.А.Буров, А.Е.Бугрова, Ю.И.Костюкевич, И.А.Попов, В.Е.Франкевич, О.В.Ионов, В.В.Зубков, Е.Н.Николаев – 841
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Проведен сбор и протеомный анализ конденсата выдыхаемого воздуха новорожденных, находящихся на респираторной поддержке в отделении реанимации и интенсивной терапии. Определен протеомный состав конденсата выдыхаемого воздуха новорожденных на разных стадиях развития и с различными патологиями.
Ключевые слова: конденсат выдыхаемого воздуха, масс-спектрометрия, новорожденные дети, протеомика
Адрес для корреспонденции: alex.kononikhin@gmail.com. Кононихин А.С.

Методика определения резерва миокардиального кровотока с использованием нагрузочной динамической однофотонной эмиссионной компьютерной томографии
А.В.Мочула*, К.В.Завадовский*,**, Ю.Б.Лишманов*,**  – 845
*Лаборатория радионуклидных методов исследования (рук. — докт. мед. наук, чл.-кор. РАН Ю.Б.Лишманов) ФГБНУ НИИ кардиологии, Томск, РФ; **Лаборатория № 31 (рук. — докт. тех. наук В.С.Скуридин) Физико-технического института ФГАОУ ВО Национального исследовательского Томского политехнического университета, Томск, РФ
Разработана методика сбора и обработки сцинтиграфических данных для определения миокардиального резерва на гамма-камере с кадмий-цинк-теллуровыми детекторами. В покое и на фоне фармакологической нагрузки 16 пациентам с ИБС и 9 здоровым добровольцам проведена динамическая однофотонная эмиссионная компьютерная томография сердца с 99mТс-Технетрилом. В процессе обработки формировали ограниченные области с полости и стенок миокарда левого желудочка, на основании которых строили кривые “активность-время”. Индекс резерва миокардиального кровотока определялся как частное двух отношений среднего значения счета импульсов с области миокарда к площади под пиком кривой с полости ЛЖ для исследования на фоне нагрузки и в состоянии покоя. Среднее значение показателя миокардиального резерва в группе здоровых добровольцев составило 1.86 (1.59; 2.20), у пациентов с атеросклерозом коронарных артерий — 1.39 (1.12; 1.69). Разработка методики определения миокардиального резерва по данным однофотонной эмиссионной компьютерной томографии является перспективным направлением, требующим дальнейшего исследования.
Ключевые слова: миокардиальный резерв, однофотонная эмиссионная компьютерная томография, ишемическая болезнь сердца, позитронная эмиссионная томография
Адрес для корреспонденции: mochula.andrew@gmail.com. Мочула А.В.

Применение протеомного анализа мочи в диагностике состояния новорожденных детей
Н.Л.Стародубцева, А.С.Кононихин, А.Е.Бугрова, К.Н.Крохина, И.В.Никитина, Ю.И.Костюкевич, И.А.Попов, В.Е.Франкевич, Н.В.Александрова, О.В.Ионов, Е.Н.Николаев, Д.Н.Дегтярев – 849
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И.Кулакова Минздрава РФ, Москва
Протеомный анализ мочи применяли для неинвазивной диагностики патологий новорожденных детей, находящихся на выхаживании в отделении реанимации и интен­сивной терапии. Показана возможность дифференциации дыхательных нарушений инфекционного и неинфекционного генеза.
Ключевые слова: протеом мочи, масс-спектрометрия, новорожденные дети, заболевания дыхательных путей
Адрес для корреспонденции: n_starodubtseva@oparina4.ru. Стародубцева Н.Л.