info@iramn.ru
com@iramn.ru
bam.b@g23.relcom.ru



БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ

2014 г., Том 157, № 4 АПРЕЛЬ

 

СОДЕРЖАНИЕ

Физиология
Влияние интерлейкина–18 на биоэлектрическую активность кардиомиоцитов предсердия крыс в норме и при дозированном растяжении ткани
В.М.Митрохин, Е.Ю.Макаренко, Д.В.Абрамочкин, П.В.Сутягин, А.Г.Камкин – 401
Кафедра физиологии (зав. — проф. А.Г.Камкин) Медико–биологического факультета РНИМУ им. Н.И.Пирогова, Москва
С применением микроэлектродной техники исследовали влияние ИЛ–18 (50 нг/мл) на биоэлектрическую активность кардиомиоцитов предсердия крыс в норме и при дозированном растяжении ткани. Показано, что в 85% экспериментов ИЛ–18 увеличивал длительность потенциалов действия на уровнях 25, 50 и 90% фазы реполяризации, не вызывая изменений величины потенциала покоя, амплитуды, частоты следования потенциалов действия и силы сокращения кардиомиоцитов. Помимо этого, ИЛ–18 отменял вызванные растяжением механоиндуцированные изменения формы потенциалов действия.
Ключевые слова: провоспалительные цитокины, интерлейкин–18, кардиомиоциты, растяжение, микроэлектродная техника
Адрес для корреспонденции: kmakarenko@yandex.ru. Макаренко Е.Ю.

Динамика изменений ноцицептивных реакций у крыс при периферическом введении липополисахарида
А.Ю.Абрамова, А.Ю.Козлов, С.С.Перцов – 405
ФГБУ НИИ нормальной физиологии им. П.К.Анохина РАМН, Москва
Изучали характер изменений ноцицептивных реакций у крыс в разные временные периоды после внутрибрюшинного введения ЛПС (30 мкг/кг). Перцептуальный компонент ноцицептивной реакции у животных определяли по латентному периоду реакции отведения хвоста в ответ на свето-термальное раздражение, эмоциональный компонент — по порогу вокализации крыс при электрокожном раздражении хвоста. Латентный период реакции отведения хвоста животных в условиях светотермального раздражения уменьшался через 1 сут после периферического введения ЛПС, что отражает усиление перцептуального компонента ноцицептивной реакции в относительно ранние сроки после антигенного воздействия. На 7–е сутки после инъекции ЛПС у крыс наблюдалось выраженное уменьшение латентного периода реакции отведения хвоста и порога вокализации в ответ на ноцицептивное воздействие. Эти изменения свидетельствуют об усилении перцептуального и эмоционального компонентов ноцицепции в поздний период после антигенного воздействия. Представленные данные указывают на то, что антигенная стимуляция посредством периферического введения ЛПС приводит к повышению ноцицептивной чувствительности крыс. Динамика изменений эмоционального и перцептуального компонентов ноцицепции животных под влиянием ЛПС позволяет предположить наличие специфических механизмов системной регуляции боли, зависящих от периода исследования и характера иммунных реакций при антигенной стимуляции.
Ключевые слова: крысы, ноцицептивная реакция, антигенная стимуляция липополисахаридом
Адрес для корреспонденции: nansy71@nphys.ru. Абрамова А.Ю.

Продолжительная фазная реорганизация памяти условной пищевой аверсии у виноградной улитки
С.А.Козырев, С.В.Солнцева, В.П.Никитин – 409
ФГБУ НИИ нормальной физиологии им. П.К.Анохина РАМН, Москва
Исследовали особенности реконсолидации памяти на протяжении 30 сут после выработки условной пищевой аверсии у виноградных улиток. Через 2 сут после обучения инъекции антагониста NMDA–рецепторов глутамата МК–801 или ингибитора синтеза белка циклогексимида, сочетанные с напоминанием условным пищевым стимулом, приводили к развитию амнезии. Повторное обучение через 10 сут после индукции амнезии не вызывало формирования навыка. Инъекции МК–801 или циклогексимида и напоминание через 10 сут после обучения не оказывали влияния на сохранность памяти. Введения МК–801 или циклогексимида и напоминание через 30 сут после обучения вызывали развитие амнезии, при повторном обучении обнаружено восстановление памяти. Таким образом, на протяжении 30 сут после обучения происходит сложная, фазная реорганизация памяти, включающая ее упрочение в течение первых дней после обучения, стабилизацию и устойчивость к нарушающим воздействиям через 10 сут и вновь приобретаемую способность к реконсолидации на 30–е сутки после обучения.
Ключевые слова: обучение, реконсолидация памяти, амнезия, ингибитор синтеза белка, антагонист NMDA–рецепторов глутамата
Адрес для корреспонденции: nikitin.vp@mail.ru. Никитин В.П.

Участие нейропептида Y в сократимости миокарда крыс в раннем постнатальном онтогенезе
А.А.Зверев, Т.А.Аникина, П.М.Маслюков, Т.Л.Зефиров* – 415
Кафедра анатомии, физиологии и охраны здоровья человека (зав. — проф. Т.Л.Зефиров) Казанского (Приволжского ) федерального университета; *Кафедра нормальной физиологии с биофизикой (зав. — проф. П.М.Маслюков) Ярославской государственной медицинской академии
Исследовали влияние нейропептида Y в концентрациях 10—10–10—6 М на сократительную активность миокарда крыс 7, 21 и 100–дневного возраста. При анализе изометрического сокращения полосок миокарда установлено, что нейропептид Y уменьшает силу сокращения миокарда 7–дневных крысят. У 21–дневных крыс экзогенный нейропептид Y вызывает двухфазный эффект: сначала увеличение, а затем снижение сократимости миокарда. Нейропептид Y у 100–дневных животных не вызывает достоверных изменений сократимости миокарда.
Ключевые слова: нейропептид Y, сердце, онтогенез, сократимость миокарда
Адрес для корреспонденции: alekcei5@rambler.ru. Зверев А.А.

Общая патология и патологическая физиология
Экспрессия генов AhR– и Nrf2–сигнальных путей в сетчатке крыс линии OXYS при развитии ретинопатии и ее изменение под влиянием мелатонина
М.Л.Перепечаева, Н.A.Стефанова*, А.Ю.Гришанова – 418
ФГБУ НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН; *ФГБУ Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск
Один из экспериментальных подходов к терапии возрастной макулярной дегенерации — воздействие на развитие окислительного стресса. В этом качестве может быть эффективен мелатонин. Одна из гипотез, объясняющих эффективность мелатонина при возрастной макулярной дегенерации, — его способность модулировать экспрессию генов AhR– и Nrf2–сигнальных путей. На преждевременно стареющих крысах линии OXYS, являющихся адекватной моделью возрастной макулярной дегенерации человека, исследовали действие мелатонина на уровень мРНК генов AhR– и Nrf2–сигнальных путей. Показано, что мелатонин снижает уровень мРНК AhR–зависимых генов цитохромов CYP1А2 и CYP1B1 в сетчатке крыс линии OXYS, но не изменяет уровень мРНК Nrf2–зависимых генов.
Ключевые слова: возрастная макулярная дегенерация, крысы OXYS, арилгидрокарбоновый рецептор, транскрипционный фактор Nrf2, мелатонин
Адрес для корреспонденции: perepech@soramn.ru. Перепечаева М.Л.

Гипоактивация подкрепляющей мотивационной системы у больных с впервые выявленной артериальной гипертонией I–II степени
Л.И.Афтанас, И.В.Брак, О.М.Гилинская, В.В.Коренек, С.В.Павлов, Н.В.Рева – 424
ФГБУ НИИ физиологии и фундаментальной медицины СО РАМН, Новосибирск
У пациентов с впервые выявленной первичной артериальной гипертонией I–II степени без лечения исследованы особенности осцилляторной активности мозга в условиях активации с помощью актуализации в воображении персонально значимых эмоциональных сценариев двух базовых мотивационных систем мозга — обороны и положительного подкрепления. Выполняли сочетанную регистрацию 64–канальной ЭЭГ и кардиоваскулярной (“beat–by–beat”) реактивности. У пациентов с гипертонией по сравнению со здоровыми людьми в состоянии физиологического покоя выявлены достоверно сниженные концентрации серотонина тромбоцитов. В сценариях эмоциональной активации пациенты характеризовались значимо сниженной интенсивностью переживания положительных эмоций в сочетании с более выраженным подавлением активности дельта– (2–4 Гц) и тета– (диапазоны 4–6 и 6–8 Гц) осцилляторов ЭЭГ в теменно–затылочной коре (зоны P и PO) обоих полушарий мозга. Полученные данные свидетельствуют о недостаточности функций серотониновой системы мозга в сочетании с гипоактивацией подкрепляющей мотивационной системы у пациентов с первичной артериальной гипертонией.
Ключевые слова: первичная артериальная гипертония; серотонин тромбоцитов; осцилляторные системы мозга; дельта– и тета– диапазоны ЭЭГ; положительные эмоции
Адрес для корреспонденции: l.aftanas@physiol.ru. Афтанас Л.И.

Участие PI3K, MAPK ERK1/2 и р38 в реализации ростового потенциала мезенхимальных клеток–предшественников под влиянием фактора роста фибробластов
Г.Н.Зюзьков, М.Г.Данилец, А.А.Лигачева, В.В.Жданов, Е.В.Удут, Л.А.Мирошниченко, Е.В.Симанина, А.В.Чайковский, Е.С.Трофимова, М.Ю.Минакова, В.В.Удут, А.М.Дыгай – 431
ФГБУ НИИ фармакологии СО РАМН, Томск
Изучали PI3K–, МАРK/ERK1/2– и р38–зависимый сигналинг в условиях стимуляции функций мезенхимальных клеток–предшественников фактором роста фибробластов. Показана важная роль PI3K и ERK1/2 в реализации их ростового потенциала. Обнаружено блокирующее действие ингибитора PI3K на процессы пролиферации и дифференцировки прогениторных клеток и ингибитора ERK1/2 в отношении митотической активности родоначальных элементов. Выявлено отсутствие участия р38–опосредованного МАР–киназного пути в определении пролиферативно–дифференцировочного статуса фибробластных КОЕ.
Ключевые слова: PI3K, МАРK, фактор роста фибробластов, прогениторные клетки, регенеративная медицина
Адрес для корреспонденции: zgn@pharm.tsu.ru. Зюзьков Г.Н.

Исследование микроциркуляции ресничного тела глаза при экспериментальной нефрологической патологии
С.А.Обрубов, А.О.Иванова, С.О.Ключников*, А.А.Древаль, О.А.Богинская – 435
ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздравсоцразвития России; *ФГБУЗ Центр лечебной физкультуры и спортивной медицины ФМБА, Москва
Анализировали нарушения микрогемодинамики ресничного тела глаза при экспериментальном хроническом гломерулонефрите с тубулоинтерстициальным нефритом и оценка гемодинамических эффектов импульсного низкочастотного электромагнитного поля при данной патологии. С помощью лазерной допплеровской флуометрии установлено, что при экспериментальном хроническом гломерулонефрите с тубулоинтерстициальным нефритом в ресничном теле глаза животных происходит сосудистый спазм с затруднением кровотока в нутритивное русло. Воздействие импульсным низкочастотным электромагнитным полем по разработанной технологии позволит достоверно уменьшить тонус сосудов и увеличить приток в микроциркуляторное русло артериальной крови.
Ключевые слова: микроциркуляция, лазерная допплеровская флуометрия, хронический гломерулонефрит с вторичным тубулоинтерстициальным нефритом, импульсное низкочастотное электромагнитное поле
Адрес для корреспонденции: obrubovs@yandex.ru. Обрубов С.А.

Изменения легочной гемодинамики при экспериментальной ишемии миокарда в условиях применения нитроглицерина
В.И.Евлахов, И.З.Поясов – 439
Отдел физиологии висцеральных систем (зав. — проф. В.И.Овсянников) ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт–Петербург
На фоне применения нитроглицерина при ишемии миокарда левого желудочка депрессорные сдвиги давления в легочной артерии у кроликов менее выражены, чем в ответ на ишемию миокарда без фармакологического воздействия. В обоих случаях кровоток в легочной артерии снижается в равной степени, а сдвиги легочного сосудистого сопротивления недостоверны. В условиях применения нитроглицерина при ишемии миокарда давление в левом предсердии возрастает меньше, чем при ишемии миокарда без фармакологического воздействия, что свидетельствует о менее выраженном снижении сократимости миокарда левого желудочка.
Ключевые слова: ишемия миокарда, нитроглицерин, давление и кровоток в легочной артерии, легочное сосудистое сопротивление
Адрес для корреспонденции: viespbru@mail.ru. Евлахов В.И.

Влияние синтетического аналога индолицидина на процессы перекисного окисления липидов при термических ожогах
В.А.Лазаренко, Ю.Д.Ляшев, Н.И.Шевченко – 443
Кафедра патологической физиологии (зав. — проф. Л.А.Северьянова) ГБОУ ВПО Курского государственного медицинского университета Минздрава РФ
Установлено, что моделирование ожога у крыс вызывает повышение содержания продуктов ПОЛ и снижение активности антиоксидантных ферментов в ожоговой ране. Применение синтетического аналога индолицидина приводит к повышению концентрации МДА и ацилгидроперекисей в ожоговой ране в 1–е сутки эксперимента. В дальнейшем применение пептида в дозе 100 мкг/кг не оказывало существенного влияния на исследуемые показатели, а в дозе 500 мкг/кг приводило к снижению содержания продуктов ПОЛ на 10–е и 14–е сутки. Изменение активности ферментов антиоксидантной защиты у крыс, получавших аналог индолицидина в дозе 500 мкг/кг, имело двухфазный характер: повышение на 4–е сутки с последующим снижением.
Ключевые слова: аналог индолицидина, перекисное окисление липидов, ожог
Адрес для корреспонденции: nickolya@yandex.ru. Шевченко Н.И.

Активность ацетилхолинэстеразы в мозге крыс вистар и август с высокой и низкой двигательной активностью (цитохимическое исследование)
А.В.Сергутина, В.И.Рахманова – 446
Отдел исследований мозга ФГБУ Научного центра неврологии РАМН, Москва
Определяли активность ацетилхолинэстеразы количественно цитохимическим методом в структурах мозга (слои III и V сенсомоторной коры, хвостатое ядро, прилежащее ядро, гиппокамп — поле СА3) крыс линии Август и Вистар с высокой и низкой двигательной активностью в тесте “открытое поле”. Установлено, что в исследованных структурах мозга крыс линии Август активность ацетилхолинэстеразы преобладает у животных с высокой двигательной активностью по сравнению с крысами с низкой двигательной активностью. У крыс Вистар различия между показателями у животных с высокой и низкой двигательной активностью менее выражены, но варьируют в зависимости от серии исследований. Сравнение крыс линии Август с низкой двигательной активностью и Вистар с высокой двигательной активностью (максимальное различие двигательной функции у этих животных) выявило значимое превышение активности ацетилхолинэстеразы у крыс линии Август в слое III сенсомоторной коры и отсутствие различий в остальных исследованных структурах мозга этих животных.
Ключевые слова: крысы Вистар и Август, двигательная активность крыс, структуры мозга, ацетилхолинэстераза, цитохимия ферментов мозга
Адрес для корреспонденции: sergutina.anven@yandex.ru. Сергутина А.В.

О статистической связи экспрессии ADRA2A и риска рецидива при РМЖ
М.Ю.Шкурников, В.В. Галатенко*, А.Е.Лебедев**, В.Е.Подольский**, Е.А.Тоневицкий**, Д.В.Мальцева**  – 450
ФГБУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН; *МГУ им. М.В.Ломоносова; **Научно-технический центр “БиоКлиникум”, Москва
Проведен поиск дополнительных параметров, позволяющих прогнозировать риск возникновения рецидива при РМЖ. На основе общедоступных микрочиповых наборов данных выявлена статистически достоверная связь между риском возникновения рецидива и экспрессией a–адренорецептора 2A (ADRA2A). Эта связь подтверждена валидацией, осуществляемой на независимом наборе микрочиповых данных. Установлено, что при оценке риска возникновения рецидива РМЖ достоверность прогноза, основанного исключительно на экспрессии гена ADRA2A, близка к достоверности прогноза, осуществляемого тест–системами “OncotypeDX” и “MammaPrint”. При этом добавление к ADRA2A всего одного или двух дополнительных прогностических маркеров (например, экспрессии гена SQLE или экспрессии генов SQLE, DSCC1) позволяет обеспечить достоверность прогноза, не уступающую достоверности этих тест–систем.
Ключевые слова: экспрессия гена, рак молочной железы, риск рецидива, a-адренорецептор 2A
Адрес для корреспонденции: vgalat@imscs.msu.ru. Галатенко В.В.

Серотонин миокарда при ишемии в условиях ишемического прекондиционирования
С.Е.Науменко, Т.В.Латышева, М.А.Гилинский – 455
ФБГУ НИИ физиологии СО РАМН, Новосибирск
Изучали динамику интерстициального серотонина при локальной ишемии миокарда в условиях ишемического прекондиционирования у крыс Вистар. Ишемическое прекондиционирование приводило к повышению серотонина в диализате (p=0.003). Во время 30–минутной ишемии ишемическое прекондиционирование задерживало увеличение серотонина лишь до 20–й минуты ишемии. Ишемическое прекондиционирование способствует кратковременному повышению содержания серотонина в интерстиции миокарда, однако при последующей продолжительной ишемии задерживает накопление серотонина в интерстиции миокарда.
Ключевые слова: серотонин, ишемия миокарда, ишемическое прекондиционирование
Адрес для корреспонденции: NSE2@mail.ru. Науменко С.Е.

Функциональные и метаболические изменения в головном мозге при нейропатическом болевом синдроме на фоне хронической эпидуральной электростимуляции спинного мозга
А.А.Суфианов, А.Г.Шапкин, Г.З.Суфианова, В.Г.Елишев, Д.А.Барашин, В.Б.Бердичевский, С.В.Чуркин – 458
ФГБУ Федеральный центр нейрохирургии Минздрава РФ, Тюмень
Оценивали изменения функциональной и метаболической активности структур головного мозга по данным ЭЭГ и позитронно–эмиссионной/компьютерной томографии с 18F–фтордеоксиглюкозой у пациентов с нейропатическим болевым синдромом до и через 3 мес после имплантации системы для хронической эпидуральной стимуляции спинного мозга. Показано, что использование нейростимулятора в большинстве случаев сопровождается уменьшением нейропатического болевого синдрома и частичной нормализацией функциональной и метаболической активности структур головного мозга, ответственных за восприятие боли, эмоциогенные, поведенческие и вегетативные реакции организма.
Ключевые слова: электростимуляция спинного мозга, электроэнцефалограмма, метаболическая активность головного мозга, позитронно–эмиссионная томография
Адрес для корреспонденции: sufianov@mail.ru. Суфианов А.А.

Исследование фибротических осложнений и концентрации гидроксипролина в печени мышей в разные периоды развития генерализованного БЦЖ–гранулематоза
В.А.Шкурупий*,**, Л.Б.Ким*, О.В.Потапова*, Т.В.Шаркова*, А.Н.Путятина*, И.К.Никонова* – 463
*ФГБУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Новосибирск; **ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава РФ
У мышей–самцов линии BALB/c индуцировали генерализованный БЦЖ–гранулематоз. В период с 3–х по 180–е сутки после инфицирования в печени увеличивалось количество туберкулезных гранулем и их размеры, количество гепатоцитов в состоянии вакуольной дистрофии. Некротические изменения гепатоцитов были максимальными в острый период воспаления (3–30–е сутки), пролиферативные процессы в паренхиме печени были менее выражены, чем в контрольной группе. Повышенное содержание коллагеновых волокон в печени было детерминировано избыточным синтезом коллагена в локусах некрозов и увеличением количества гранулем и фибробластов в них. Повышенная пролиферативная и фибропластическая “активность” фибробластов в гранулемах и паренхиме печени, по–видимому, была детерминирована активированными макрофагами гранулем. Все это обусловливало изменения концентрации гидроксипролина в печени в острый и хронический периоды заболевания.
Ключевые слова: БЦЖ–гранулематоз, мыши, печень, фиброз, гидроксипролин
Адрес для корреспонденции: lenkim@soramn.ru. Ким Л.Б.

Биофизика и биохимия
Эффекты воздействия полихроматического видимого и инфракрасного света на биологические жидкие среды
В.Г.Зилов, А.А.Хадарцев, В.Д.Бицоев – 468
ФГБОУ ВПО Тульский государственный университет
Представлены результаты экспериментального исследования влияния полихроматического видимого и инфракрасного света на биологические жидкости, обосновывающие новые подходы к фототерапии. Полихроматический свет аппарата “Биоптрон” разных экспозиций и частот подводился через оптико–волоконный кабель, в том числе при насыщении воды CO2, а также на высоте 10 см от поверхности воды, что обеспечивало максимальное поглощение света. Эффект последействия облучения установлен через 26 и 15 мин, а увеличение поглощения света плазмой крови — через 1 ч после приема ванны с предварительно облученной поляризованным светом водой. Выявлены полосы поглощения, соответствующие таковым для иммуномодуляторов, противовоспалительных, противовирусных препаратов. Установлены изменения спектра валентных колебаний, зависящие от величины ангармонизма колебаний.
Ключевые слова: полихроматическое видимое и инфракрасное излучение, биологические среды, вода
Адрес для корреспонденции: medins@tsu.tula.ru. Хадарцев А.А.

Экспрессия генов Gstp1 и Nqo1 и белков–факторов транскрипции в печени мышей линии BALB/c под действием 3–(3'–трет–бутил–4'–гидроксифенил)пропилтиосульфоната натрия
А.Б.Шинтяпина, О.Г.Сафронова, В.А.Вавилин, Н.В.Кандалинцева*, А.Е.Просенко*, В.В.Ляхович – 472
ФГБУ НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН, Новосибирск; *НИИ химии антиоксидантов ФГБОУ ВПО Новосибирского государственного педагогического университета
Исследована временнάя динамика влияния нового фенольного антиоксиданта 3–(3'–трет–бутил–4'–гидроксифенил)пропилтиосульфоната натрия (ТС-13) на экспрессию генов ферментов антиоксидантной защиты Gstp1, Nqo1 и содержание белков–факторовтранскрипции NF–kB и ATF–2 в печени мышей. На 4–е и 7–е сутки после введения 100 мг/кг ТС–13 наблюдали достоверное снижение экспрессии гена Gstp1, а на 14–е сутки — повышение, через 7 и 14 сут — статистически значимое повышение экспрессии гена Nqo1. На 7–е сутки происходило значимое снижение содержания фосфорилированной формы ATF–2 и двух субъединиц ядерного фактора NF–kB (р50, р65) в печени животных.
Ключевые слова: фенольные антиоксиданты, Gstp1, Nqo1, NF-kB, ATF-2
Адрес для корреспонденции: shintyapina@yandex.ru. Шинтяпина А.Б.

Влияние белка теплового шока 90 (Hsp90) на миграцию и инвазию опухолевых клеток человека in vitro
А.В.Снигирева, В.В.Врублевская, Ю.Ю.Скарга, Ю.В.Евдокимовская, О.С.Моренков – 475
ФГБУН Институт биофизики клетки РАН, Пущино
Исследовали влияние очищенного нативного белка теплового шока 90 (Hsp90) из мозга быка и мыши на миграцию и инвазию клеток глиобластомы (А-172) и фибросаркомы (НТ1080) человека. Hsp90 в концентрациях 0.01-0.10 мг/мл стимулировал миграцию и инвазию опухолевых клеток in vitro на 20-32% (p<0.05). Поликлональные антитела к Hsp90 блокировали Hsp90-зависимую стимуляцию инвазии клеток, что свидетельствует о специфичности стимулирующего эффекта экстраклеточного Hsp90 на инвазию опухолевых клеток. Полученные данные позволяют рассматривать экстраклеточный Hsp90 в качестве перспективной молекулярной мишени, ингибирование которой может тормозить инвазию и метастазирование опухолевых клеток.
Ключевые слова: белок теплового шока 90 (Hsp90), миграция клеток, инвазия клеток
Адрес для корреспонденции: snigireva.s@gmail.com. Снигирева А.В.

Возможный механизм образования нитрита и нетиолатных нитрозосоединений в плазме крови при воспалительных процессах
В.Ю.Титов, В.С.Болдырихин, А.В.Иванова, А.Н.Осипов – 479
ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава РФ, Москва
Образование нитрита (NO2) и нетиолатных нитрозосоединений в крови человека при активации лейкоцитов происходит главным образом вследствие деструкции содержащихся в плазме соединений — доноров NO, а не интенсификации синтеза NO. Предложен механизм продукции нитрита и нетиолатных нитрозосоединений в крови при воспалении.
Ключевые слова: оксид азота, нитрит, нитрат, доноры оксида азота, лейкоциты
Адрес для корреспонденции: vtitov43@yandex.ru. Титов В.Ю.

Фармакология и токсикология
Влияние термолабильного токсина Yersinia pseudotuberculosis на функции клеток врожденного иммунитета
Н.Г.Плехова*,**, Е.И.Дробот*, Н.Ф.Тимченко*, Л.М.Сомова*, Е.Н.Персиянова* – 483
*ФГБУ НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН, Владивосток; **Дальневосточный Федеральный университет, Школа биомедицины, Владивосток
Термолабильный токсин Yersinia pseudotuberculosis оказывает зависимое от концентрации избирательное стимулирующее действие на функциональную активность клеток врожденного иммунитета. При пролонгированном апоптозиндуцирующем действии токсина в нейтрофилах обнаруживалась активация ферментов кислородзависимой системы (ЛДГ и миелопероксидазы) в ранние сроки наблюдения (до 3 ч). В свою очередь, повышение количества апоптотически измененных макрофагов отмечалось в ранние сроки (5 ч) контакта с термолабильным токсином и дальнейшее его возрастание наблюдалось на фоне увеличения активности митохондриальных ферментов и продукции метаболитов оксида азота.
Ключевые слова: макрофаги, нейтрофилы, ферменты, токсин, Yersinia pseudotuberculosis
Адрес для корреспонденции: pl_nat@hotmail.com. Плехова Н.Г.

Анальгетическая активность дитерпеновых алкалоидов аконита байкальского
Ю.В.Нестерова, Т.Н.Поветьева, Н.И.Суслов, Г.Н.Зюзьков, С.В.Пушкарский, С.Г.Аксиненко, Э.Э.Шульц, С.С.Кравцова, А.В.Крапивин –  488
ФГБУ НИИ фармакологии им. Е.Д.Гольдберга СО РАМН, Томск
Проведено сравнительное исследование анальгетического действия отдельно выделенных алкалоидов аконита байкальского (напеллин, гипаконитин, зонгорин, мезаконитин, N-окись 12-эпинапеллина). Выявленная обезболивающая активность сопоставима с таковой у метамизола натрия. Обнаружены различия в механизмах аналгезии разных по структуре дитерпеновых алкалоидов. Антиноцицептивный эффект атизиновых алкалоидов (N-окись 12-эпинапеллина, зонгорин) является налоксонзависимым и реализуется за счет влияния на опиоидные рецепторы.
Ключевые слова: аконит байкальский, дитерпеновые алкалоиды, анальгетическая активность
Адрес для корреспонденции: nes-yuliya@yandex.ru. Нестерова Ю.В.

Влияние афобазола на нейротоксические и генотоксические эффекты в модели пренатальной алкоголизации крыс
Е.Д.Шредер, О.В.Шредер, В.В.Забродина, А.Д.Дурнев, С.Б.Середенин – 492
ФГБУ НИИ фармакологии им. В.В.Закусова РАМН, Москва

К 20-му дню внутриутробного развития пренатальное воздействие этанола приводит к формированию широкого спектра нейротоксических поражений головного мозга у эмбрионов. В тканях 13-дневных эмбрионов и плацентах крыс, получавших в период беременности 40% раствор этанола per os (4 мл/кг), было установлено повышение уровней поврежденности ДНК и апоптотических комет. Установлена корреляция между повышением уровней поврежденности ДНК и апоптотических комет в эмбриональных и плацентарных тканях алкоголизированных крыс на 13-й день беременности и появлением морфологических аномалий мозга у их эмбрионов на 20-й день внутриутробного развития. Антимутаген афобазола (1 и 10 мг/кг) способен снижать генотоксические эффекты этанола в тканях эмбрионов и плаценты и взаимосвязанные с ними нейротоксические поражения головного мозга.
Ключевые слова: повреждение ДНК, аномалии мозга, пренатальная алкоголизация, афобазол, крысы
Адрес для корреспонденции: shrederkaterina@mail.ru. Шредер Е.Д.

Иммунология и микробиология
Динамика нарушения и восстановления синтеза ДНК после фракционированного облучения клеток в S–периоде митотического цикла
И.П.Шабалкин, М.В.Гудкова, П.И.Шабалкин, Е.Ю.Григорьева – 496
ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН; ФГБУ ФНКЦ детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д.Рогачёва, Москва
Методом авторадиографии изучалась кинетика синтеза ДНК в митотическом цикле клеток эпителия роговицы мыши после g-облучения клеток дозой 2 Гр в разных точках S-периода. В норме S-период клеток эпителия роговицы включает S1- и S2-фазы, разделенные промежутком времени, в течение которого синтез ДНК не наблюдается. Действие двухкратного облучения вызывает изменение синтеза ДНК в клетке, обусловленное процессами репарации повреждений в клетке. Реализация восстановленных процессов в клетке осуществляется в течение промежутка времени между S1- и S2-фазами S-периода, а также за счет g1-периода митотического цикла клетки. При отсутствии у клетки времени на репарацию повреждений последние переходят в разряд “скрытых” повреждений.
Ключевые слова: синтез ДНК, митотический цикл, облучение, репарация
Адрес для корреспонденции: margo56@bk.ru. Шабалкин И.П.

Генетика
Экспрессия генов VEGF, GFAP и BDNF в головном мозге крыс после разных вариантов фракционированного g–облучения
Я.А.Зоркина*, Г.М.Юсубалиева*,**, Ф.А.Кошкин**, А.Ю.Чаморсов***, А.В.Кистенев***, Г.Е.Горлачев***, А.В.Голанов***, А.А.Потапов***, В.П.Чехонин*,** – 502
*ФГБУ ГНЦ социальной и судебной психиатрии им. В.П.Сербского; **РНИМУ им. Н.И.Пирогова; ***НИИ нейрохирургии им. Н.Н.Бурденко, Москва
В эксперименте с фракционированным облучением головного мозга по разным схемам с фиксированной суммарной дозой ионизирующего излучения 36 Гр показано изменение экспрессии генов VEGF, GFAP и BDNF в нервной ткани на 4, 8 и 12-й неделе после облучения. Снижение экспрессии гена VEGF отмечено в префронтальной коре и гиппокампе через 4 и 8 нед. Через 12 нед экспрессия гена VEGF в префронтальной коре восстановилась до уровня нормы, но в гиппокампе оставалась сниженной. Максимальная экспрессия гена GFAP наблюдалась в префронтальной коре на 4-й неделе и восстановилась до нормы к 12-й неделе. В гиппокампе экспрессия гена GFAP была снижена только на 12-й неделе. Экспрессия гена BDNF была снижена только на 8-й неделе, причем степень снижения была обратно пропорциональна величине разовой дозы. Сделан вывод о разных эффектах воздействия фракционированного g-облучения при фик­сированной суммарной дозе на экспрессию генов в нервной ткани.
Ключевые слова: фракционированное облучение, фактор роста эндотелия сосудов, глиальный фибриллярный кислый белок, нейротрофический фактор мозга
Адрес для корреспонденции: zrkyana@gmail.com. Зоркина Я.А.

Онкология
Двойственное влияние ингибиторов индоламин–2,3–диоксигеназы на терапевтическое действие циклофосфана и циклоплатама в отношении асцитной опухоли Эрлиха у мышей
Л.А.Богданова, Т.С.Морозкова, С.А.Амитина*, Д.Г.Мажукин*, В.П.Николин**, Н.А.Попова**, В.И.Каледин** – 507
ФГБУ НИИ региональной патологии и патоморфологии СО РАМН; *ФГБУН Новосибирский институт органической химии им. Н.Н.Ворожцова СО РАН; **ФГБУН Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск
Ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы этилпируват слабо подавляет рост перевиваемой опухоли Эрлиха у мышей и достоверно усиливает терапевтическое действие на нее циклофосфана. Аналогичный эффект оказывает и другой ингибитор амидоксим. Однако при лечении циклоплатамом этилпируват и амидоксим значительно снижают эффект терапии опухоли. Выявленные различия могут быть обусловлены неодинаковым влиянием циклофосфана и циклоплатама на субпопуляции лимфоидных клеток, участвующих в формировании противоопухолевого иммунитета и толерантности к опухоли.
Ключевые слова: опухоль Эрлиха, ингибиторы индоламин-2,3-диоксигеназы, терапия цитостатиками
Адрес для корреспонденции: pathol@soramn.ru. Богданова Л.А.

Комбинированное лечение низкодифференцированной глиомы с помощью моноклональных антител к внеклеточному фрагменту коннексина–43, темозоломида и лучевой терапии
Г.М.Юсубалиева*,**, В.П.Баклаушев*,**, О.И.Гурина*, Я.А.Зоркина*, И.Л.Губский**, Г.Л.Кобяков***, А.В.Голанов***, С.А.Горяйнов***, Г.Е.Горлачев***, А.Н.Коновалов***, А.А.Потапов***, В.П.Чехонин*,** – 511
*ФГБУ ГНЦ социальной и судебной психиатрии им. В.П.Сербского Минздрава РФ; **Отдел фундаментальной и прикладной нейробиологии РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава РФ; ***Кафедра медицинских нанобиотехнологий НИИ нейрохирургии им. Н.Н.Бурденко РАМН, Москва
В эксперименте на крысах Вистар с индуцированной глиомой С6 исследовали противоопухолевую эффективность моноклональных антител ко второй внеклеточной петле коннексина-43 (MAbE2Сх43), темозоломида и фракционированного g-излучения в режиме монотерапии и в нескольких оптимизированных комбинациях. Оценивали выживаемость животных с глиомой и динамику развития интрацеребральной опухоли с помощью МРТ. В результате монотерапии темозоломидом (200 мг/м2) и изолированной лучевой терапии в суммарной дозе 36 Гр медиана выживаемости животных увеличилась с 28 сут (без лечения) до 34 и 38 сут соответственно. При этом 100% животных погибали как при монотерапии темозоломидом, так и при радиотерапии. Монотерапия глиомы с помощью MAbE2Сх43 в дозе 5 мг/кг сопровождалась достоверным регрессом опухоли (по данным МРТ), выздоровлением 19.23% животных с глиомой и увеличением медианы выживаемости до 39.5 сут после имплантации опухоли. Комбинированная терапия с помощью MAbE2Сх43 и темозоломида привела к полному нивелированию противоопухолевого эффекта (медиана выживаемости — 29 сут). Лечение с помощью MAbE2Сх43 и радиотерапии сопровождалось взаимным усилением терапевтического эффекта, что привело к достоверному замедлению развития опухоли и увеличению медианы выживаемости до 60 сут. Механизм опухоль-супрессивной активности антител может быть связан с блокированием коннексонов в Cx43-позитивных клетках глиомы в зоне перитуморальной инвазии. Повышение эффективности комбинированного лечения, вероятно, обусловлено увеличением проницаемости ГЭБ для антител после облучения головного мозга, а также дополнительным ингибирующим действием антител в отношении радиорезистентных мигрирующих клеток глиомы. Полученные результаты позволяют предположить, что MAbЕ2Cx43 могут быть эффективны в качестве препарата первой линии для комплексной терапии низкодифференцированных глиом.
Ключевые слова: коннексин–43, глиома С6, моноклональные антитела, комбинированная терапия
Адрес для корреспонденции: gaukhar@gaukhar.org. Юсубалиева Г.М.

Использование метода MIRA для анализа метилирования гена RARb2 в циркулирующей ДНК крови при раке легкого
К.Ю.Капицкая, Т.Л.Ажикина, А.А.Пономарева*, Н.В.Чердынцева*, В.В.Власов**, П.П.Лактионов**, Е.Ю.Рыкова** – 517
ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва; *ФГБУ НИИ онкологии СО РАМН, Томск; **ФГБУН Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Новосибирск
Анализ эпигенетических мутаций ДНК в циркулирующей ДНК крови является перспективным направлением для создания неинвазивных методов диагностики и определения эффективности терапии рака. Для оценки статуса метилирования целевых генов в составе циркулирующей ДНК применяют методы, основанные на предварительной бисульфитной конверсии ДНК. В данной работе был использован другой подход, основанный на селекции гиперметилированных последовательностей циркулирующей ДНК при помощи ДНК-метил-связывающего белка (methylated-CpG island recovery assay; MIRA). Определен уровень метилирования гена опухолевой супрессии RARb2 в циркулирующей ДНК при раке легкого и выявлена тенденция увеличения метилирования этого гена у больных по сравнению со здоровыми донорами.
Ключевые слова: циркулирующие ДНК крови, диагностика рака, аберрантное метилирование, ген опухолевой супрессии RARb2, метод MIRA
Адрес для корреспонденции: rykova@niboch.nsc.ru. Рыкова Е.Ю.

Компоненты системы RANK/RANKL/OPG, ИЛ–6, ИЛ–8, ИЛ–16, ММП–2 и кальцитонин в сыворотке крови больных с новообразованиями костей
Н.Е.Кушлинский, Ю.С.Тимофеев, Ю.Н.Соловьев, Е.С.Герштейн, Н.В.Любимова, И.В.Булычева – 522
ФГБУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва
Иммуноферментными методами определено содержание sRANKL, RANK, OPG, ИЛ-8, ИЛ-6 и ИЛ-16, а также ММП-2 и кальцитонина в сыворотке крови больных со злокачественными, пограничными и доброкачественными новообразованиями костей и у практически здоровых людей (контрольная группа). Выявлено достоверное повышение уровней RANK, OPG, ИЛ-8, ИЛ-6 и соотношения OPG/sRANKL, а также снижение уровня ММП-2 в сыворотке крови больных с новообразованиями костей по сравнению с контрольной группой. Концентрация ИЛ-16 в сыворотке крови больных остеосаркомой была достоверно ниже, чем у больных хондросаркомой. Ни для одного из исследованных маркеров не выявлено достоверных различий между саркомами костей в зависимости от степени дифференцировки опухоли. Уровень кальцитонина был связан с локализацией и типом пораженной кости.
Ключевые слова: опухоли костей; система RANK/RANKL/OPG; интерлейкин-16, -6, -8;матриксная металлопротеиназа-2; кальцитонин
Адрес для корреспонденции: biochimia@mtu-net.ru. Кушлинский Н.Е.

Нанотехнологии
Адресная доставка цисплатина с помощью коннексин–43–векторных наногелей в очаг экспериментальной глиомы С6
Н.В.Нуколова1,2,3, В.П.Баклаушев1,2, Т.О.Абакумова1,3, П.А.Мельников2, М.А.Абакумов1,3, Г.М.Юсубалиева1, Д.А.Бычков4, А.В.Кабанов3,5, В.П.Чехонин1,2527
1Отдел фундаментальной и прикладной нейробиологии ФГБУ ГНЦ социальной и судебной психиатрии им. В.П.Сербского Минздрава РФ; 2Кафедра медицинских нанобиотехнологий Медико-биологического факультета ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова Минздрава РФ; 3Кафедра химической энзимологии Химического факультета, 4Геологический факультет МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва; 5Отдел молекулярной фармакологии Фармацевтического отделения Университета Северной Каролины, Чапел-Хилл, США
Целью исследования являлось создание наноконтейнера, конъюгированного с моноклональными антителами к коннексину-43 (Сх43), который активно экспрессируется по периферии глиомы С6 и в зоне астроглиального вала. Были синтезированы стабильные векторные наногели с высокой степенью загрузки цисплатином (до 35%). Проведен сравнительный анализ противоопухолевого эффекта при использовании Сх43-модифицированных наногелей по сравнению со свободным цисплатином и неспецифическими препаратами на модели глиомы С6. Показано, что векторные наногели способствуют уменьшению системной токсичности цисплатина, эффективно сдерживают рост опухоли и значительно увеличивают среднюю продолжительность жизни животных с экспериментальными опухолями.
Ключевые слова: цисплатин, наногели, адресная доставка, моноклональные антитела к коннексину-43, опухоли мозга
Адрес для корреспонденции: nnukolova@gmail.com. Нуколова Н.В.

Морфология и патоморфология
Влияние активированного протеина С на размеры моделируемого ишемического очага и морфометрические показатели нейронов и нейроглии в его перифокальной зоне
Р.М.Худоерков, И.Г.Савинкова*, С.М.Струкова*, Л.Р.Горбачева*, М.В.Гуляев*, Ю.А.Пирогов*, В.Н.Сальков, В.Б.Соболев, С.А.Гаврилова*, В.Б.Кошелев* – 534
ФГБУ Научный центр неврологии РАМН, Москва; *МГУ им. М.В.Ломоносова
На модели фокальной ишемии мозга оценивали действие активированного протеина С (АРС) на количественные показатели нейронов и нейроглии в перифокальной зоне инфаркта, вызываемого в левом полушарии коры головного мозга у крыс двух групп. Животные 1-й группы служили контролем (контрольный инфаркт). Крысам 2-й группы через 3 ч после воспроизведения инфаркта в правый боковой желудочек мозга вводили АРС (50 мкг/кг) и через 72 ч определяли размеры инфаркта, а в перифокальной зоне инфаркта оценивали нейроны и нейроглию. АРС по сравнению с контрольным инфарктом уменьшал его размеры в 2.5 раза, а в перифокальной зоне инфаркта на 16% предотвращал гибель нейронов в слое V, не создавая значимых изменений в слое III, и не влиял на размеры тел нейронов, но на 11% увеличивал размеры ядер нейронов слоя III. АРС не только поддерживал резко увеличившееся количество глиоцитов в перифокальной зоне инфаркта, но и способствовал их росту. Сделан вывод о том, что АРС защищает нейроны от гибели в ишемическом очаге за счет увеличения числа глиоцитов и стимуляции компенсаторно-восстановительных процессов.
Ключевые слова: активированный протеин С, нейрон, нейроглия, перифокальная зона инфаркта мозга, морфометрия
Адрес для корреспонденции: rolfbrain@yandex.ru. Худоерков Р.М.

Методики
Математическое моделирование регуляции биологической системы белков p53—Mdm2
О.Ф.Воропаева, Ю.И.Шокин, Л.М.Непомнящих*, С.Р.Сенчукова* – 539
ФГБУН Институт вычислительных технологий СО РАН; *ФГБУ НИИ региональной патологии и патоморфологии СО РАМН, Новосибирск
На основе функциональной нелинейной восьмипараметрической математической модели выполнено численное моделирование нарушений в системе белков p53 и Mdm2, участвующих в исправлении дефектов ДНК и вовлеченных во многие жизненно важные процессы, включая образование опухолей, нейродегенерацию и старение. Изучены стрессовые ситуации, связанные с возникновением дисбаланса в скоростях генерации и деградации р53 и Mdm2, а также с нарушениями в механизме взаимодействия белков, регулируемом в рамках рассмотренной модели через константы диссоциации. Численно исследованы варианты компенсации рассмотренных нарушений повторным стрессом для параметров системы.
Ключевые слова: p53–зависимый апоптоз, p53–Mdm2–сеть, математическое моделирование
Адрес для корреспонденции: pathol@soramn.ru. Воропаева О.Ф.